高效液相色谱法测定乳清蛋白主要成分的研究

建立了测定乳清蛋白中α-La和β-Lg含量的高效液相色谱分析方法,采用Kromasil C8色谱柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相A为0.1%的三氟乙酸-水溶液,流动相B为0.09%的三氟乙酸-乙腈溶液梯度洗脱,流速为0.8mL/min,二极管阵列检测器,检测波长215nm,柱温30℃。外标法定量,α-La和β-Lg两种组分线性关系良好,相关系数分别为0.9998和0.9984,检测限为3μg/mL、10μg/mL。     

高效液相色谱法测定牛乳中α-乳白蛋白

利用常规的C18色谱柱的高效液相色谱建立测定牛乳中主要过敏蛋白α-乳白蛋白含量的方法。色谱条件:色谱柱Alltima-C18(4.6 mm×200 mm,5μm),柱温为45℃,UV检测波长215 nm,流动相A为含0.1%三氟乙酸的超纯水,流动相B为乙腈:超纯水:三氟乙酸=400:100:0.5,采用梯度洗脱方法,流速0.8 mL/min。结果表明:α-乳白蛋白的线性范围分别为50～1 000μg/mL(r=0.990 9);α-乳白蛋白平均回收率为97.27%,RSD=0.76%(n=5);该方法简便、准确,适合于乳制品中α-乳白蛋白含量的测定。     

UPLC法测定乳及乳制品中乳清蛋白的研究

建立了超高效液相色谱法同时测定鲜牛乳和婴幼儿配方奶粉中α-乳球蛋白、β-乳白蛋白、乳铁蛋白的方法.鲜牛乳和奶粉经前处理后,采用ACQUITY UPLC BEH300? C18色谱柱进行分离,以0.1％TFA/H2O,乙腈+三氟乙酸(1000:0.5)为流动相,流速为0.5 mL/min,进行梯度洗脱,在280 nm波长...     

高效液相色谱法测定羊乳中的乳铁蛋白

为开发羊乳中乳铁蛋白的高效液相色谱测定方法及报告羊乳中乳铁蛋白的分布规律。本研究采集哈尔滨地区羊乳样品(n=24)和经过巴氏杀菌的羊乳样品(n=24),采用高效液相色谱测定其乳铁蛋白质量浓度。样品脱脂后,调整pH沉淀酪蛋白,采用C8色谱柱分离,二极管阵列检测器210nm检测,以水、乙腈、三氟乙酸为流动相进行线性梯度洗脱。方法回收率94.2%,线性范围50~300μg/mL,检出限12μg/mL,定量限40μg/mL。原料羊乳中乳铁蛋白的质量浓度的平均值122.1μg/mL,巴氏杀菌后羊乳中乳铁蛋白的平均值103.9μg/mL。巴氏杀菌对羊乳中乳铁蛋白浓度无影响。     

反相高效液相色谱法同时测定鲜牛乳中的乳清蛋白

通过对高效液相色谱条件中色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温优化的试验,建立了反相高效液相色谱对鲜牛乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白同时微量检测的分析方法,最终确定采用Agela Venusil ASB C8(5μm,4.6 mm×250 mm,150μm)色谱柱;三氟乙酸/乙腈/水流动相,流速0.8 m L/min,检测波长215 nm,柱温30℃的色谱条件,并利用外标法定量。结果表明,α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白3种组分的线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9991、0.9998,检出限为0.001~0.012 mg/m L,样品平均回收率在86.5%~109.08%之间,精密度和重现性试验RSD值均小于5%。该方法的前处理简单、耗时少,样品损失少,分离效果好,能够实现牛乳中3种蛋白的同时检测。     

高效液相色谱法测定乳中唾液酸含量

利用酸水解法把乳中的唾液酸释放出来,以邻苯二氨盐酸盐(10 mg/mL)为衍生化试剂,在80℃水浴锅中衍生40 min,采用Symmetry C18 柱(250 mm×4.6 mm, 5 mm);流动相为1.0 %的四氢呋喃水溶液(含0.2 %磷酸)-乙腈(92:8);流速为1.0 mL/min,柱温为35 ℃;紫外检测波长230 nm.结果表明,唾液酸在10～320 μg/mL范围内线性良好,平均回收率为95.7 %.本方法具有灵敏度高,重复性好等特点,可准确测定乳中唾液酸含量 .     

HPLC-ELSD测定茶梗中茶氨酸的含量

采用蒸发光散射检测器(ELSD)测定茶叶下脚料茶梗中茶氨酸的含量。以AE.LichromC18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,含0.1%三氟乙酸的乙腈-含0.1%三氟乙酸的水(体积比为2:98)为流动相,流速0.5mL/min,漂移管的温度54℃,载气(N2)1.46×105Pa。茶氨酸在2.55～20.43μg范围内有良好线性关系,平均回收率为98.5%,RSD=2.30%,茶梗中茶氨酸的含量为6.59～17.04mg/g。该方法简单,快速,分离度好,下脚料茶梗仍具有较大的开发利用价值。     

高效液相色谱法测定大豆胚轴中DDMP皂甙αg和βg

为检测大豆中的αg和βg含量 ,应用高效液相色谱 -差示折射法 (HPLC -dRI)测定大豆皂甙样品中DDMP皂甙αg和 βg含量 ,色谱柱为ODS -AM - 30 3柱 (YMC ,4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,流动相为含 0 1%三氟乙酸的乙腈 水 (4 0 6 0 )。DDMP皂甙αg和 βg分别在 1 38～ 6 88μg和 1 6 2～ 8 12 μg范围内线性关系良好 ,平均回收率为 93 4 %和 94 2 % ,RSD为 4 0 7%和 4 2 8%。方法准确度高 ,重现性好 ,适用于大豆皂甙样品中DDMP皂甙以及其它大豆皂甙的含量测定。     

高效液相色谱—二极管阵列检测法测定原料乳中的舒巴坦

建立了利用高效液相色谱-二极管阵列法(high-performance liquid chromatography-photodiode array,HPLC-PDA)测定原料乳中舒巴坦含量的方法。采用C18色谱柱,以5.44g/L磷酸二氢钾溶液(pH5.0)-乙腈(95∶5)为流动相,流速为lmL/min,检测波长220nm,柱温30℃。样品经乙腈提取、乙酸锌沉淀蛋白,HPLC-PDA检测。舒巴坦浓度在10～200μg/mL范围内,线性良好(R2=0.9998),添加回收率为98.82%～101.42%,检出限为0.25mg/kg,定量限为0.75mg/kg。该方法操作简单,结果准确、可靠,适用于原料乳中舒巴坦的快速检测。     

高效液相色谱法测定大豆胚轴中A类皂甙的含量

建立了A类大豆皂甙的高效液相色谱-差示折射(HPLC-dRI)检测方法。色谱条件为:ODS-AM-303色谱柱(YMC,4.6mm×250mm,5μm),柱温40℃,含0.1%三氟乙酸的乙腈-水(40∶60)为流动相,流速1mL/min。大豆皂甙A1和A2分别在1.39～6.96μg和1.67～8.34μg范围内线性关系良好,平均回收率为91.3%和92.6%,RSD为4.63%和3.48%。方法准确度高,重现性好,适用于大豆皂甙样品中A类皂甙的测定。