一起由副溶血性弧菌引起的食源性疾病的病原学研究及溯源分析

目的对一起由副溶血性弧菌引发的食源性疾病进行实验室检测及溯源分析。方法对该起事件中采集的样品进行病原学检测,采用细菌分离培养、生化鉴定、血清学分型、实时荧光聚合酶链反应检测副溶血性弧菌及其毒力基因,对分离的阳性菌进行脉冲场凝胶电泳(pulse-field gel electrophoresis,PFGE)分析。结果本次从1份厨师和10份患者便及肛拭标本中分离培养出11株副溶血性弧菌,均携带tdh毒力基因,神奈川试验结果阳性,血清型为O3:K6型。对11株阳性菌进行PFGE分子分型和溯源分析,所有菌株获得相同的PFGE带型。结论结合流行病学调查,实验室病原学检测和PFGE结果,可判定此次事件为一起由副溶血性弧菌引起的食源性疾病暴发事件。     

一起检出多种致病菌的食源性疾病暴发调查与病因探讨

目的对一起食源性疾病暴发中检出多种致病菌的情况进行探讨分析,找出真正的致病菌,为研究类似的食源性疾病病因提供参考。方法利用标准化的食源性疾病暴发个案调查表收集信息,采用描述流行病学描述事件特征、分析流行病学探索危险食物,采集的样本按照GB 4789系列食品卫生微生物学检验标准进行可疑致病菌分离培养,分离出的副溶血性弧菌按照DNA指纹图谱分析方法进行基因分型。结果搜索到共同进餐者30例,失访5例,其中符合病例定义的17例,罹患率为56.67%(17/30);临床表现主要以腹泻(17/17)、腹痛(16/17)为主,腹痛以上腹部疼痛为主(10/16);发病潜伏期为11~25 h;回顾性队列研究未发现可疑食物。在病例肛拭子中检出9株副溶血性弧菌,8株奇异变形杆菌,1株沙门菌混合副溶血性弧菌,1株空肠弯曲菌;在从业人员肛拭子中检出1株奇异变形杆菌;在环境涂抹拭子中检出1株副溶血性弧菌,4株奇异变形杆菌;在食品样品中检出1株副溶血性弧菌,4株奇异变形杆菌。对从9例病例检测到的副溶血性弧菌进行脉冲场凝胶电泳分子分型,结果发现其遗传相似性达97%以上。结论综合现场流行病学调查和食品卫生学以及实验室检测结果分析,排除其他致病因子引起该起事件暴发的可能,认为这是一起由副溶血性弧菌引起的食源性疾病暴发事件。     

北京市通州区即食非发酵豆制品微生物污染状况及致病菌分析

目的：了解北京市通州区不同包装、不同采样场所即食非发酵豆制品微生物污染情况,为本地区食源性疾病的风险评估提供依据。方法：采集即食非发酵豆制品70份,采用GB 4789系列标准方法进行大肠菌群计数、菌落总数、致病菌的检测;对检测出的致病菌检测其毒力基因和血清分型,并进行药敏分析和PFGE分子分型。结果：预包装的微生物检测合格率均高于散装,预包装致病菌检出率低于散装,超市的微生物合格率高于网店和农贸市场。本次共检出致病菌14株,沙门氏菌5株;单核细胞增生李斯特氏菌4株,血清型为1/2a有3株,1/2b有1株,且所检测的6对毒力基因均为阳性;致泻大肠埃希氏菌5株,均携带astA毒力基因,为肠聚集性大肠埃希菌。结论：北京市通州区即食非发酵豆制品污染较为严重,部分豆制品中检测出了食源性致病菌,存在较高的食物安全隐患,相关部门应加强监管力度,保障食品安全。     

一起由金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌引起食物中毒的实验室检测分析

目的：通过实验室微生物检测查清山东省淄博市淄川区一起学校食物中毒事件的原因,为相似的食源性疾病暴发事件提供处置依据。方法：采集可疑食品及其包装袋8份、病例呕吐物2份至实验室进行常见致病菌检测,用实时荧光PCR方法测定增菌液中的金黄色葡萄球菌肠毒素类型。结果：1份面包屑检出金黄色葡萄球菌,1份吃剩的鸡腿检出蜡样芽胞杆菌,其余样品未检出可疑致病菌。结论：根据采集样品实验室微生物检测结果,结合现场流行病学调查以及中毒病例临床症状综合分析,此事件因食物保存不当,导致金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌滋生,食入引起食物中毒。     

一起引起食源性疾病的小肠结肠炎耶尔森菌分离菌株的检测分析

目的 了解一株引起婴幼儿腹泻的食源性疾病的小肠结肠炎耶尔森菌的血清型、毒力基因携带和耐药性.方法 通过血清凝集法、改良K-B纸片法及PCR法,对分离菌株进行血清分型、药敏试验、毒力基因(ail,ystB,virF)及0:3血清型菌株特异性脂多糖O-侧链的生物合成基因,rfbc的检测.结果 本菌株0:3血清凝集试验阳性,带有毒力基因ail、virF及0:3血清型菌株特异性鉴别基因rfbc,而毒力基因yatB阴性;该菌株已对头孢唑林、氨苄西林和复方新诺明产生耐药,但对其他头孢类、碳青霉烯类、氨基糖苷类等药物敏感.结论 引起食源性疾病的病原菌是0:3血清型且带有ail、virF毒力基因的致病性非1A型小肠结肠炎耶尔森菌.     

副溶血性弧菌食源性疾病暴发分离株的血清型、核糖型及毒力基因研究

目的 了解目前食源性副溶血性弧菌暴发菌株在上海地区的血清型分布、毒力相关基因的携带情况,及Ribo分型.方法 收集上海市27起食源性副溶血性弧菌暴发事件分离的98株副溶血性弧菌,采用副溶血性弧菌分型血清对所收集的菌株进行血清学分型.利用双重PCR方法扩增tdh,trh两个重要的毒力基因以了解其毒力基因的携带情况.应用Riboprinter系统检测上述菌株的酶切片段杂交多态性.结果 引起27起暴发的98株副溶血性弧菌分为11个血清型,5个Ribo型.优势血清型为03:K6,优势Ribo型为vp-EcorI-002型.全部分离菌株均携带toxR基因,97株携带tdh基因,1株携带trh基因.有多起暴发事件分离到多个血清型的副溶血性弧菌.结论 血清分型和PCR方法检测毒力基因,是副溶血性孤菌暴发事件实验室诊断的有用方法.对于从一起暴发事件中检出的不同血清型的副溶血性弧菌需要确认各菌株与暴发的关系.     

台州市食源性单核细胞增生李斯特菌分子特征研究

目的了解台州市食品中分离的单核细胞增生李斯特菌的血清型、毒力基因以及基因分型情况,建立食源性单核细胞增生李斯特菌的分子特征本底信息,为食源性疾病的防治提供技术支持。方法对近几年从食品中分离的37株单核细胞增生李斯特菌进行多重PCR血清分型、9种毒力基因(prf A、inl A、inl B、iap、fla A、hly A、plc B、mpl和act A)PCR检测、PFGE基因分型,用Bio Numerics 6.6软件对分型数据进行聚类分析。结果 37株食源性单核细胞增生李斯特菌的血清型以1/2a或3a型别为主;所有菌株均检出4种以上毒力基因,有15株菌携带所有9种毒力基因;37株菌经Apa I酶切PFGE分型后,共得到22种带型,每种带型包含1~5株不等,相似度区间为67%~100%。结论台州市食源性单核细胞增生李斯特菌存在致病流行风险,建立的指纹图谱数据库可为食源性疾病的防治提供技术支持。     

4起副溶血性弧菌食源性疾病暴发事件分离株病原学特征和溯源分析

目的 分析2019年淄博市4起副溶血性弧菌食源性疾病暴发事件分离株的病原学特征。方法 采用血清学分型、毒力基因检测(tlh、tdh、trh)、微量肉汤稀释法药敏试验和脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对11株分离株进行分析。结果 9株患者分离株血清型鉴定为O3∶K6型,毒力基因均为tlh^+tdh+trh-;2株环境分离株血清型分别为O8∶K22和O1∶K32型,毒力基因均为tlh^+tdh-trh-。11株分离株全部对头孢唑林耐药,部分菌株对氨苄西林和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐药。其中,2株对3种抗生素均耐药,对其他抗生素均敏感。经PFGE聚类分析,同一暴发事件中患者分离株高度相关。结论 4起暴发事件的患者分离株均为流行株O3∶K6型,均携带tdh基因,部分菌株出现多重耐药情况,同一暴发事件的分离株之间同源性高,提示可能为同源暴发,应加强对副溶血性弧菌污染源头的监管力度,减少食源性疾病的发生。     

2015年江苏省食源性疾病暴发事件的流行病学 特征分析

目的 对2015年江苏省食源性疾病暴发事件的流行病学特征进行分析,提出防控措施和策略。方法 对2015年国家食源性疾病暴发报告系统上报的77起食源性疾病暴发事件进行分布研究。结果 2015年共发生食源性疾病暴发事件77起,累计发病1111人,其中死亡6人。食源性疾病暴发事件的主要发病时间是7-9月;饮食服务单位是发生食源性疾病暴发事件的主要场所, 其次依次为集体食堂、家庭和农村宴席;微生物是引起食源性疾病暴发事件发生的主要致病因素;除不明原因外引起食源性疾病暴发事件的主要原因食品是动物类食品。结论 加强对高发季节、高发因素、高发场所的食品安全监管,针对性加强毒蕈中毒的食品安全教育,提高食源性疾病暴发事件的流行病学调查能力,是预防和控制食源性疾病暴发事件的有效措施。     

一起肠聚集性大肠埃希氏菌引起的食源性疾病暴发调查分析

目的 调查一起引起学生集体腹泻事件的原因。方法 通过查阅学校医务室就诊记录、考勤记录、就餐消费系统刷卡记录和医院就诊记录等主动搜索病例,开展病例个案和现场卫生学调查,采集相关样品进行实验室检测等,运用回顾性队列研究判断本次食源性疾病暴发事件的可疑餐次和食物。结果 通过访谈、个案调查、实验室检查等共搜索到病例217人,临床特征主要为腹泻(腹泻次数≥3次/24 h占比62%,135/217)、腹痛(47%,102/217)等;从生物、食物原料和环境样品中共检出肠聚集性大肠埃希氏菌(enteroaggregative Escherichia coli, EAEC)毒力基因阳性样品55份,分离到EAEC菌株28株,其中27株进行PFGE分型,共形成A~Q 17个型别,呈高度多态性。可疑食品是5月30日晚餐的凉拌椒麻鸡。结论 该起事件是有学校食堂配餐引起的一起肠道聚集性大肠埃希氏菌（EAEC）所致食源性疾病暴发。建议监管部门加强对学校食堂的监督管理,提高食堂从业人员食品安全意识,预防类似事件的发生。     

分型方法在单核细胞增多性李斯特菌监测溯源中的应用研究进展

单增李斯特菌(LM)是引起人和动物李斯特菌病的重要食源性病原菌,具有较高的病死率,严重危害人类公共卫生安全和畜牧业发展。快速准确的鉴定LM污染来源,对有效控制李斯特菌病的暴发和蔓延发挥重要作用。建立高效快捷的分型方法是LM溯源的关键。目前LM分型方法主要分为表型分型和分子分型方法,每种分型方法各有优劣,具有适用不同的流行病学调查范围。本文就LM分型方法的研究进展进行综述,以期为开展LM的暴发确认和溯源检测方法的选择提供参考依据,对防御并控制LM引起的食源性疾病的暴发和传播具有重要意义。     

金黄色葡萄球菌肠毒素与多位点序列分型分子分型研究进展

金黄色葡萄球菌是引起临床疾病、社区感染和食物中毒的常见革兰氏阳性菌;肠毒素是参与金黄色葡萄球菌引起食物中毒、猩红热、全身感染等疾病的重要毒力因子;目前已发现27种金黄色葡萄球菌肠毒素/类肠毒素,不同来源金黄色葡萄球菌携带肠毒素/类肠毒素存在差异;多位点序列分型(MLST) 是一门新兴的基于细菌多个管家基因位点差异性分析、可长期监测细菌遗传进化趋势的分子分型技术;截至2021年初MLST已建立128种细菌的分型数据库,金黄色葡萄球菌数据库中已有6583种分型,金黄色葡萄球菌ST分型存在明显的地区流行性,各地已形成独特优势克隆。目前研究表明金黄色葡萄球菌肠毒素/类肠毒素携带与MLST分型间存在一定的相关性,本文将围绕金黄色葡萄球菌肠毒素/类肠毒素、MLST分型及相关性进行综述。     

广州地区海产品中创伤弧菌病原学特征分型

目的研究广州地区海产品中分离的创伤弧菌的毒力相关基因与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型状况,初步建立区域PFGE溯源数据库,为该菌的分子流行病学研究和食源性疾病溯源提供支持。方法对68株创伤弧菌进行毒力相关基因鉴定和PFGE分型,采用Bio Numerics软件分析聚类关系。结果海产品中分离的创伤弧菌均为溶血素A基因(vvh A)核酸阳性,vcg C/E和16S rRNA A/B分型结果显示,共有5种基因型别,分别有CB型、EA型、CAB型、CA型和EB型。共检测出42株为BT1型。PFGE分型结果显示68株创伤弧菌有52种PFGE型别。结论广州地区海产品中分离的创伤弧菌PFGE型别多,且相互之间关系分散;毒力相关基因型以CB型为主。     

食源性致病微生物分型溯源技术及研究进展

分型溯源技术是研究致病微生物暴发、分析暴发源头的重要方法,在食品安全监管处置中发挥着重要的作用。传统的分型溯源技术在致病微生物暴发检测中发挥着重要的作用,并在不断的发展完善当中,同时以全基因组测序为基础的基因分型溯源技术也因其较高的分辨率也受到了越来越多的关注。本文就近几年国内外快速发展完善的食源性致病微生物分型溯源技术进行综述,为我国食源性致病微生物的精准分型以及溯源网络的建设提供较为全面的参考。     

克罗诺杆菌分子分型及毒力机制研究进展

克罗诺杆菌是一种急性细菌病原体,最初因与新生儿重症监护室爆发的几起致死性疾病（脑膜炎、坏死性小肠结肠炎）相关而受到人们广泛关注。近年来,关于该菌属的多样性已经有了清晰的认识,并且已经开发了多种检测和分型方法。常用的分型方法包括生化分型、脉冲场凝胶电泳分型及基于DNA序列的分型（单基因分型、O-血清分型、多位点序列分型、单核苷酸多态性分型和规律成簇的间隔短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）-cas。克罗诺杆菌属的7 个种之间毒力作用存在差异,外膜蛋白和外膜囊泡在侵染引发细胞病变过程中发挥了重要作用,唾液酸的利用可能具有临床意义。目前该属菌株毒力机制研究结论尚未统一,基因测序所揭示的大量毒力因子仍需进一步验证。克罗诺杆菌分型方法在促进该菌分类学发展的同时也为其毒力机制研究奠定了基础。     

肉鸡屠宰环节中金黄色葡萄球菌的流行及分子特征和耐药性

为探究肉鸡屠宰加工环节中金黄色葡萄球菌的污染关键环节及菌株的分子特征和耐药性,对陕西省某肉鸡屠宰场5个屠宰环节（活鸡肛拭、浸烫、预冷、分割和贮存）进行4次样本收集。通过选择培养和聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增nuc基因对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定。然后对分离株进行23种毒素编码基因、27种耐药基因、16种抗生素耐药性及葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A,SPA)、多位点序列分型（multilocus sequence typing,MLST）和肠杆菌科基因间重复序列PCR(enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR,ERIC-PCR)分型检测。结果表明,收集的144份样本中有32份样本被污染（22.2%,32/144）。除活鸡肛拭样本无检出外,其余环节样本均有检出。其中浸烫褪毛环节污染率最高（40.0%,12/30）,其次为分割环节（26.7%,8/30）、预冷环节（21.9%,7/32）和贮存环节（15.6%,5/32）。23种被检毒素编码基因中...     

Molecular epidemiology,antimicrobial activity,and virulence gene clustering of Streptococcus agalactiae isolated from dairy cattle with mastitis in China

Streptococcus agalactiae is a contagious pathogen that causes bovine mastitis worldwide, resulting in considerable economic losses. In this study, we isolated 42 S. agalactiae strains in 379 milk samples from cows with subclinical mastitis on 15 dairy farms in 12 Chinese provinces. Analysis based on capsular typing and multilocus sequence typing, combined with patterns of virulence gene scanning and antimicrobial resistance, identified the lineages and populations of the isolates. We grouped the 42 isolates into 7 sequence types belonging to 6 clonal complexes, mainly CC103 (31/42 isolates; 73.8%). We identified an ST-23 strain named Sa 129 for the first time on Chinese dairy farms—this strain is usually associated with human isolates. Capsular types Ia and II were predominant in capsular typing. The prevalence of virulence profile 1 (bibA, cfb, cspA, cylE, fbsA, fbsB, hylB, and pavA) was 64.3%, and represented the main trend in China. With respect to antimicrobial resistance, most isolates were susceptible to β-lactams, rifamycin, glycopeptides, and oxazolidone; resistance to several antimicrobial agents, including lincomycin, clindamycin, and doxycycline, varied in 4 different regions. Our research provides a profile for the molecular epidemiology, multilocus sequence typing, antimicrobial resistance, and virulence gene clustering of S. agalactiae, and may be beneficial for the clinical monitoring, prevention, and control of mastitis in dairy cattle.     

Listeria monocytogenes virulence and pathogenicity,a food safety perspective

Several virulence factors of Listeria monocytogenes have been identified and extensively characterized at the molecular and cell biologic levels, including the hemolysin (listeriolysin O), two distinct phospholipases, a protein (ActA), several internalins, and others. Their study has yielded an impressive amount of information on the mechanisms employed by this facultative intracellular pathogen to interact with mammalian host cells, escape the host cell's killing mechanisms, and spread from one infected cell to others. In addition, several molecular subtyping tools have been developed to facilitate the detection of different strain types and lineages of the pathogen, including those implicated in common-source outbreaks of the disease. Despite these spectacular gains in knowledge, the virulence of L. monocytogenes as a foodborne pathogen remains poorly understood. The available pathogenesis and subtyping data generally fail to provide adequate insight about the virulence of field isolates and the likelihood that a given strain will cause illness. Possible mechanisms for the apparent prevalence of three serotypes (1/2a, 1/2b, and 4b) in human foodborne illness remain unidentified. The propensity of certain strain lineages (epidemic clones) to be implicated in common-source outbreaks and the prevalence of serotype 4b among epidemic-associated stains also remain poorly understood. This review first discusses current progress in understanding the general features of virulence and pathogenesis of L. monocytogenes. Emphasis is then placed on areas of special relevance to the organism's involvement in human foodborne illness, including (i) the relative prevalence of different serotypes and serotype-specific features and genetic markers; (ii) the ability of the organism to respond to environmental stresses of relevance to the food industry (cold, salt, iron depletion, and acid); (iii) the specific features of the major known epidemic-associated lineages; and (iv) the possible reservoirs of the organism in animals and the environment and the pronounced impact of environmental contamination in the food processing facilities. Finally, a discussion is provided on the perceived areas of special need for future research of relevance to food safety, including (i) theoretical modeling studies of niche complexity and contamination in the food processing facilities; (ii) strain databases for comprehensive molecular typing; and (iii) contributions from genomic and proteomic tools, including DNA microarrays for genotyping and expression signatures. Virulence-related genomic and proteomic signatures are expected to emerge from analysis of the genomes at the global level, with the support of adequate epidemiologic data and access to relevant strains.     

食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌分离鉴定方法研究进展

小肠结肠炎耶尔森氏菌是一种具有嗜冷特性的食源性致病菌,广泛存在于食品中,对人们健康构成较大威胁。建立高效的分离鉴定技术对该菌进行监控是相关食品安全的重要保障。本文对小肠结肠炎耶尔森氏菌的分离过程,包括分离前增菌、分离前碱处理和平板分离,以及传统生化和血清型鉴定、分子生物学鉴定、免疫学鉴定和谱学鉴定方法等方面的研究进展进行了阐述。小肠结肠炎耶尔森氏菌的深入检测研究不仅有赖于现有分离鉴定方法的不断优化,还需要开发更多新型检测技术应用于菌株溯源分析、流行病学和耐药性等方面的研究,以期为该类菌株资源数据库的建立和整理,预防相关耶尔森氏菌疾病的爆发提供良好的保障。