蚕蛹壳几丁质降解菌的分离筛选及其产酶条件优化

[目的]对产几丁质酶菌株发酵产酶活性工艺进行优化.[方法]将筛选得到的1株产几丁质酶菌株G-254进行驯化培养,通过单因素试验考察了不同碳源、氮源和无机盐对菌株产酶活的影响;进行响应面试验,以菌株发酵所产酶活为响应值,确定最佳的发酵产酶工艺条件.[结果]菌株G-254发酵产几丁质酶最佳发酵条件为,葡萄糖8%,牛肉膏料5%,硫酸镁0.07%,在此条件下获得的几丁质酶活为6.86 U.[结论]提高了菌株发酵产几丁质酶酶活,为后续工业化发酵生产奠定了基础.     

果胶酶产生菌的分离及其产酶条件研究

[目的]从自然界寻求高效的果胶酶生产菌株,减少生产成本,使发酵产生的果胶酶直接应用于果汁、果酒等的澄清中.[方法]从富含果胶质的土壤及腐烂水果中采集样品,筛选出2株产酶活性相对较高的菌株,并对其最佳培养时间、培养温度、最适pH以及最适接种量等酶学性质进行初步研究.[结果]确定了2个菌株的最佳培养条件:A1在28 ℃,pH 7.0,接种量20%,发酵周期48 h时产酶最高,具有较强的分解果胶质的能力;A2在31 ℃,pH 7.0,接种量30%,发酵周期60 h时产酶最高,其有较强的分解果胶质的能力.[结论]菌株A1生长繁殖周期较短,具快速的生长期.同时生长的外界环境易于获得,但产酶效益较低,酶学曲线波动较大.稳定性差;A2具长的生长期,所需培养温度也较高,培养条件有些难度,但产酶效益较高,总体酶学曲线稳定性较好,具长的稳定期.     

脂肪酶产生菌的筛选·产酶条件及酶特性研究

[目的]筛选脂肪酶高活性菌株作为脂肪酶生产菌株和脂肪酶基因的供体菌.[方法]从油脂厂等地采集26份含菌样品,采用溴甲酚紫平板对样品进行初筛,以产脂肪酶发酵培养基摇瓶复筛,获得1株产脂肪酶活性较高的菌株09-7-1,经鉴定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger).采用正交试验对影响该菌株产酶的因素进行了研究,并探讨了该菌株所产脂肪酶的性质.[结果]该菌株最佳产酶条件:碳源为0.5%的可溶性淀粉,氮源为0.2%的酵母膏,培养温度为32℃,发酵液pH为5.2,该菌株最初发酵液中酶活力为13.164 U/ml,优化后酶活力达24.112 U/ml,是最初酶活力的1.83倍.该菌株所产脂肪酶最适作用温度为30℃,最适作用pH为7.0;酶液在60℃保温90 min后,活性损失较少,pH为5.5～10.0内稳定.[结论]该研究可为脂肪酶生产和基因研究奠定基础.     

酸性α-淀粉酶高产菌株的原生质体诱变选育

[目的]以产酸性α-淀粉酶菌解淀粉芽孢杆菌B-5为出发菌株,通过对B-5原生质体进行紫外线诱变以达到提高产酸性α-淀粉酶活力的目的.[方法]在溶菌酶浓度为20 mg/ml,37℃酶解90 min条件下,原生质体制备率达到94%.然后经紫外线诱变处理,从中筛选水解圈与菌落比值较大者进行发酵,测定酸性α-淀粉酶活力.[结果]从大量突变菌株中筛选得到1株α-淀粉酶活力为267 U/ml的突变菌株UV-329,其产酶活力较出发菌株B-5提高了254.2%.[结论]利用紫外线对解淀粉芽孢杆菌B-5原生质体进行诱变是一种有效的微生物育种方法.     

南极适冷菌Rheinheimera sp.97产抗菌活性物质发酵条件的优化

[目的]优化南极适冷菌Rheinheimera sp.97产抗菌活性物质的发酵条件.[方法]通过单因素和正交试验对南极适冷菌R.sp.97产抗菌活性物质的发酵培养基进行了优化,并通过单因素试验对其发酵条件进行了优化.[结果]菌株R.sp.97产抗菌活性物质的最佳培养基为:蛋白胨3.0g/L,硫酸1.0g/L,淀粉2.0g/L,NaCl 15.0g/L;最佳发酵条件为:发酵培养基初始pH8,发酵温度10℃,摇瓶装液量30.0%(V/V),接种量1.0%(V/V).优化后菌株R.sp.97发酵液的抗菌活性较优化前提高了22.2%.[结论]为研究南极适冷菌R.sp.97的活性物质奠定了基础.     

饲料玉米中优质乳酸菌的分离和鉴定

[目的]从饲料玉米中筛选适合做青贮饲料添加剂的高效乳酸菌.[方法]用MRS+CaCO<,3>固体培养基筛选乳酸菌,经形态学和生理生化试验进行初步鉴定,测定其产酸效率;挑选出12株产酸率强的乳酸菌进行耐盐和耐酸能力的测定,并时其进行16 S rDNA 鉴定.[结果]从饲料玉米中共分离得到44 株乳酸菌,12株产酸能力强的菌株经生理生化试验鉴定分别属于明串珠菌属、乳杆菌属和肠球菌属,且12株菌株都具有良好的耐盐、耐酸能力.经16 S rDNA鉴定:A4、B9、B11、B12 和B14 为植物乳杆菌;A1、A2、A7、A11和B8为肠膜明串珠菌葡聚糖亚种;A8和A9为兼性肠球菌.[结论]从饲料玉米中筛选出具有较强产酸能力的乳酸菌,作为青贮饲料添加剂.     

黄绿木霉菌菌株产几丁质酶发酵条件的研究

[目的]研究黄绿木霉菌(Trichoderma aureoviride sp.)产几丁质酶的最佳发酵条件,为几丁质酶工业提供新酶源.[方法]采用正交试验设计,以DNS法测定酶解后糖含量变化为指标,对发酵务件进行优化.[结果]在以2%胶体几丁质为碳源、2%蛋白胨为氯源、摇床转速为170 r/min时,黄绿木霉菌产几丁质酶的最佳发酵条件组合:培养基的初始pH为5,接种量为8%,瓶装量为20 ml,在28℃下培养6 d.[结论]试验确定了黄绿木霉菌产几丁质酶最佳条件,为其在工业生产中的应用奠定了基础.     

枯草芽抱杆菌产酶规律及酶学性质研究

[目的]研究浙江建德分离得到的枯草芽抱杆菌淀粉酶的产酶规律和酶学性质.[方法]将分离得到的枯草芽袍杆菌发酵培养,研究其淀粉酶产酶规律,并研究了温度、pH、金属离子对酶学性质的影响.利用双倒数曲线法获得该酶的米氏常数戈.[结果]随着发酵时间的延长,发酵液中淀粉酶的含量提高.在培养30h时,产酶量达到最高.该淀粉酶的最佳反应温度和pH分别为40℃和7.5.该酶具有一定的热稳定性,对酸碱条件较敏感.Na+、K+、Ca2+、Mg2+对该酶具有激活作用,Pb2+、Hg2+对该酶具有显著的抑制作用,Cu2+的影响不显著.该淀粉酶的米氏常数Km为2.31×10-3 mol/L.[结论]该研完对该菌株淀粉酶的开发及工业应用具有较强的指导意义.     

产抑菌活性物质放线菌菌株的筛选

[目的]筛选产抑菌活性物质的放线菌菌株.[方法]以金黄色葡萄球菌、对青霉素和头孢菌素类耐药的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为指示菌,采用滤纸片扩散法对300株放线菌的发酵产物进行抗菌活性筛选,通过最小抑菌浓度法(MIC)时筛选的阳性菌株进行抗菌活性测定.[结果]筛选到抗菌活性物质产生菌111株,抑菌率为37.0%;其中对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和耐药金黄色葡萄球菌有抑制活性的菌株分别为111、10和47株.各菌株的最小抑菌浓度有很大差别,菌株174883对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,其发酵样品稀释到2048倍仍然表现出抑菌活性.用青霉素酶和头孢菌素酶作用于阳性菌株发酵产物,筛选到6株菌株代谢产物的抑菌活性变弱,菌株32349和kj0428的抑菌活性被抑制最明显.[结论]筛选得到的阳性放线菌菌株具有良好的抗菌活性,为新型抗生素的筛选提供了研究基础.     

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝活性研究

[目的]筛选出具有高絮凝活性的微生物产生菌,并观察研究微生物产生菌的外现形貌,并确定微生物产生菌的最佳培养条件.[方法]分别从土壤、活性污泥、食品厂污水和垃圾渗滤液中筛选出具有絮凝活性的菌株若干,然后在不同的培养基条件下通过富集培养、平板分离、纯化培养和复筛,筛选出具有高絮凝活性的菌种.在显微镜下观察菌种的形貌.最后考察了培养温度、培养时间和摇床转速对絮凝效果的影响,对培养条件进行了优化.[结果]从土壤、活性污泥、食品厂污水和垃圾渗滤液中筛选出具有絮凝活性的菌种8株,然后在不同的培养基条件下通过富集培养、平板分离、纯化培养和复筛等,筛选出絮凝活性超过90%菌种2株,在显微镜下初步鉴定为杆菌.以絮凝活性最高的F-4为例,该菌产絮凝剂的最佳培养条件为:培养时间56 h、培养温度30℃、摇床转速150 r/min.[结论]在该条件下,F-4菌株对高岭土悬浊液的絮凝率达到93.1%.