乳源锌螯合肽酶解制备及其螯合特性分析

为研究乳源锌螯合肽酶解制备最佳工艺条件及其螯合特性,从而为促锌吸收活性物质的研究提供基础,以牛乳酪蛋白为原料,以锌螯合率为指标,确定胰蛋白酶酶解制备锌螯合肽的最佳工艺条件,并对最优条件下酶解物的分子质量分布及氨基酸组成进行测定,同时通过傅里叶变换红外扫描和紫外扫描手段对酶解物和肽锌复合物进行结构表征对比分析。结果显示,最佳酶解条件为时间3 h,温度50℃,p H 8. 5,底物质量浓度为70 g/L,加酶量0. 6%(质量分数)。最佳条件下,酶解物的锌螯合率为87. 78%,分子肽分子质量小,人体必需氨基酸含量丰富。螯合前后光谱存在明显差异,Zn~(2+)与羧基等进行了配位结合。乳源锌螯合肽具有较高的锌螯合活性,实验结果为补锌剂的生产应用奠定了基础。     

米蛋白肽锌的制备工艺研究

以米渣水解产生的蛋白肽与硫酸锌螯合制备蛋白肽螯合锌,用复合胰蛋白酶进行限制性酶解,对酶解工艺影响因素进行研究,探索出酶法水解米渣的最佳工艺参数.确定最佳螯合工艺条件为蛋白肽与硫酸锌的摩尔比为 2:1,pH5.5,反应温度 70℃,反应时间90 min.     

芝麻蛋白制备金属螯合肽的酶解工艺研究

分别采用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶Alcalase对芝麻蛋白进行水解,结果表明胰蛋白酶为制备金属螯合肽的最佳酶。通过优化胰蛋白酶酶解工艺条件发现最佳条件为:底物质量浓度5%(g/100mL),酶添加浓度20u/g(底物),水解时间5h,得到的酶解产物金属螯合率最强,与Fe2+的螯合率为90.9%,与Zn2+的螯合率为93.5%。通过考察水解度对酶解产物金属螯合率及抗氧化能力的影响,结果显示水解度在18.9%到22.4%之间的酶解产物金属螯合率强,且水解度在一定范围内金属螯合率和抗氧化能力均与水解度呈正相关性。     

米蛋白肽铁的螯合条件优化

以米渣为蛋白肽原料,以FeSO4为铁源制备蛋白肽螯合铁。通过实验确定用复合胰蛋白酶进行限制性酶解,用酶量为1%,理想的酶解工艺条件:酶解温度50℃,固液比1∶5,pH为8,酶解时间4h;通过单因素实验和正交实验,采用氮气保护措施,确定了最佳螯合工艺条件:蛋白肽与亚铁盐的配体摩尔比为2∶1,pH为5.0,反应温度50℃,反应时间40min。可得到棕灰色粉末状蛋白肽螯合铁,螯合率为94.4%。     

正交试验优化花生肽螯合锌的制备工艺

研究了花生蛋白水解物和锌离子制备肽锌螯合物的工艺条件,以螯合率为评价指标,考察肽与锌的质量比、反应pH、反应温度和反应时间对螯合反应的影响。在单因素试验基础上,采用4因素3水平正交法确定花生肽-锌螯合物的制备工艺。最佳工艺条件:花生肽-锌质量比4∶1、反应体系pH 6.0、反应温度50℃、反应时间40 min。在此条件下,锌的螯合率为57.04%。     

蚕蛹源肽锌纳米粒子的制备及其结构表征

为开发安全易吸收的补锌制剂,提升蚕蛹的利用价值,通过酶解蚕蛹蛋白制备蚕蛹肽,并将其与锌螯合生成肽锌螯合物。以锌螯合能力为指标,确定蚕蛹肽的酶解制备工艺及蚕蛹肽锌螯合物的制备工艺,采用紫外光谱、荧光光谱、扫描电镜、元素分析仪、粒径分析及红外光谱等技术对螯合前后的样品进行结构表征。结果表明,酶解制备蚕蛹肽的条件为碱性蛋白酶加酶量为1%、pH8.0、温度50℃、酶解时间6 h,该条件下的螯合率达58.05%;肽锌纳米粒的最佳制备条件为肽锌质量比1:0.5、pH6.5,温度55℃,时间20 min,此时螯合率达72.63%;添加硫酸锌后,紫外光谱与荧光光谱强度的减弱显示Zn²⁺与蚕蛹肽成功的发生了结合,所得蚕蛹肽-锌螯合物为粒径71.99 nm的纳米粒子,表面呈均匀的颗粒状结构,锌相对含量达37.46%,肽链中的-COOH、-NH₂和-C=O是锌离子与蚕蛹肽的主要结合位点。综上,蚕蛹是制备肽锌螯合物的良好原材料,这为丰富有机锌补充剂资源库和蚕蛹综合利用奠定了一定的理论基础。     

响应面法玉米蛋白肽锌制备条件的优化

以玉米蛋白粉为原料,碱性蛋白酶酶解制得玉米肽,与硫酸锌螯合后,得到玉米蛋白肽锌。根据Box-Behnken的中心组合实验设计原理,运用Minitab15.0数据统计分析软件,采用三因素三水平的响应面分析法优化制备玉米蛋白肽锌的工艺。结果表明:最佳的制备条件为反应时间90min、pH为5、温度63℃、蛋白肽与锌的摩尔比为2∶1,在此条件下,螯合率为57.9%。     

花生肽亚铁螯合物的制备工艺优化及结构特性研究

研究超声波辅助条件下花生肽亚铁螯合物的制备工艺及其结构特性。方法 采用超声波辅助双酶酶解,考察肽铁质量比、pH、螯合温度和时间对螯合率的影响,并采用紫外、红外、荧光光谱及扫描电镜分析花生肽螯合前后空间结构及表观形态变化。结果 超声条件下碱性酶与风味酶复配能显著提高花生肽的亚铁离子螯合率;得到螯合率最佳的反应条件为肽铁质量比3.2:1,pH为7.9,温度38 ℃,时间30 min,亚铁螯合率可达67.5%;光谱分析表明,花生肽段所含的氨基与羧基参与螯合反应,使其空间结构发生改变;扫描电镜结果显示花生肽由平滑的片状结构转变为密集的球状结构。结论 得到了花生肽亚铁螯合物的最优制备工艺并确定其螯合位点,本研究不仅能提高花生粕的经济价值,还有利于促进新型铁制剂的开发。     

酶法复合氨基酸锌络合物制备研究

采用木瓜蛋白酶对鱼蛋白进行酶解,以酶解产生的氨基酸与硫酸锌螯合制备复合氨基酸螯合锌。结果表明:酶解的最佳条件是酶用量80mg、底物浓度为1%、酶解时间4h、酶解温度60℃。螯合的最佳条件为氨基酸与硫酸锌的摩尔比为4∶1、pH5.5、反应温度80℃、反应时间40min,所得螯合率达到80.5%。     

鸡胚肽锌螯合物的制备工艺及免疫调节功能研究

以鸡胚蛋为原料,通过分步酶解法制备鸡胚肽。以螯合率及螯合物得率为指标,利用单因素实验结合响应面法优化制备鸡胚肽锌螯合物,通过小鼠免疫器官胸腺和脾脏质量指数探究鸡胚肽锌螯合物的免疫调节功能。结果表明,先用碱性蛋白酶后用胰蛋白酶将鸡胚蛋进行酶解,在螯合温度70 ℃,鸡胚肽与锌的浓度比为2.3:1,pH为8,螯合时间2.2 h的条件下,鸡胚肽与锌元素的螯合率最高,为48.98%±0.35%,此时螯合物得率为38.04%±0.26%,得率较高且稳定。按照此方法制备的富锌鸡胚肽能使胸腺和脾脏的质量指数明显增大,说明通过双酶酶解制备的鸡胚小肽与锌元素的螯合物具有一定的免疫调节功能,并呈现一定的量效关系。鸡胚肽锌螯合物在食源性螯合肽免疫功能方面具有一定的开发利用价值。     

金枪鱼骨胶原多肽螯合钙的制备

以金枪鱼下脚料鱼骨为原料,对鱼骨进行酶解获得鱼骨胶原多肽,最终与氯化钙螯合制备螯合钙。以多肽浓度为指标探讨鱼骨粉酶解的酶解工艺,并以螯合率为指标探讨螯合工艺。最终确定的最佳酶解条件为:胰蛋白酶与风味蛋白酶2∶1复合、p H 7.0、60℃。此时酶解所得胶原多肽含量最高。最佳螯合条件为:pH 6.0、55℃、40min、质量比1∶1。此时螯合率最高。该条件下制备的金枪鱼骨胶原螯合肽呈均匀的颗粒状分布,粒径分布范围为0.5～0.7μm,赋予其良好的食品加工特性。     

具有铁螯合能力的驴骨胶原肽酶解条件优化及微观形态

为充分开发利用驴骨资源,开发一种酶解驴骨蛋白从而得到驴骨胶原蛋白肽的方法,考察该酶解肽与亚铁离子的螯合能力,并将其产物进行表征。以亚铁离子螯合率为考察指标,筛选最优酶种类,通过单因素实验和考虑交互作用的正交实验优化确定驴骨的最佳酶解条件。结果表明,驴骨的最佳预处理条件为121 ℃蒸煮30 min,木瓜蛋白酶为最佳酶,优化过后的酶水解工艺参数为温度50 ℃、pH 7.0、酶底比1 000 U/mL、时间3 h,此时驴骨胶原肽和亚铁离子的螯合率为38.40%,可得到微观结构为片状的螯合产物。木瓜蛋白酶酶解驴骨蛋白可以制备有螯合亚铁离子能力的驴骨胶原肽,具有促铁吸收的潜力,对开发驴骨胶原肽相关产品具有科学参考作用。     

蚌肉肽—锌螯合物制备工艺及其保肝作用研究

以蚌肉为原料,采用优化酶解工艺制备蚌肉肽。以螯合率为指标,对蚌肉肽的富锌工艺进行优化并评价其溶液保肝作用。结果显示,蚌肉肽—锌的最佳螯合工艺参数为螯合温度70℃,螯合pH 8.0,蚌肉肽与锌溶液质量浓度比21 (g/mL),螯合反应1.5h。该工艺条件下螯合率为58.55%;制备的富锌蚌肉肽保肝作用显著,当灌胃剂量为400mg/kg·BW时,SOD与GSH-Px的活性分别为(142.78±7.73),(258.16±8.52)IU/L。     

高收率低苦味值大豆低聚肽的制备

以大豆分离蛋白为原料,以酶解收率为指标对最优的酶解工艺进行研究。在单酶水解的基础上,用复合碱性蛋白酶,中性蛋白酶,胰蛋白酶进行水解,通过正交试验确定了复合酶的最佳水解条件为:碱性蛋白酶/中性蛋白酶/胰蛋白酶加酶1∶2∶3,温度50℃,酶解时间4.5h,在此最佳条件下,酶解收率为86.76%,大豆低聚肽含量为93.49%,苦味值比单酶水解明显降低。     

南极磷虾金属螯合肽蛋白基料的酶解制备工艺优化

建立南极磷虾金属螯合肽蛋白基料制备工艺,拓展南极磷虾蛋白资源应用领域。以脱脂南极磷虾粉为底物,以酶解产物的水解度及Zeta电位为指标,从5种蛋白酶中筛选确定制备南极磷虾金属螯合肽蛋白基料的最优酶为胰蛋白酶;通过单因素试验和响应面试验优化确定最佳工艺条件为:酶解时间2.75 h、加酶量2.50%、料液比为1:3,该条件下蛋白水解度(14.16±0.43)%,与理论值基本一致。酶解产物的Zeta电位(—29.83±0.66)mV,相对分子质量主要分布于3000 u以下,具有金属离子结合能力的氨基酸占总氨基酸的(31.91±0.45)%,是制备南极磷虾金属螯合肽的良好蛋白基料。研究将为南极磷虾蛋白资源的高效精准利用提供科学指导。     

米糠肽-铁锌螯合物制备工艺研究

目的 研究米糠蛋白制备米糠肽-铁锌螯合物的工艺。方法 以米糠蛋白为原料,优化米糠肽-铁锌螯合物制备工艺。以亚铁离子与锌离子的螯合率和水解度为评价指标,考察蛋白酶种类、反应物质量比、温度、时间及pH值对米糠酶解产物铁锌螯合率的影响。在单因素试验的基础上,结合JMP软件进行定制试验设计,确定米糠肽-铁锌螯合物的制备工艺。结果 碱性蛋白酶较适宜制备米糠肽-铁锌螯合物,其最佳螯合工艺条件为时间70 min、温度70 oC、反应物质量比3:1、pH 5.0;在此条件下,其产物亚铁离子螯合率达到38.29%、锌离子螯合率达到57.2%,与预测值接近。结论 本研究采用米糠肽同时螯合铁锌2种金属离子,不仅可以充分吸收米糠肽的营养成分,提高消化率,发挥其降血压、降血脂、抗氧化等功能特性,还可以同时补铁、补锌,对人体具有积极作用。     

带鱼蛋白水解肽-金属配合物制备工艺

为提高带鱼下脚料的利用率为目的,以带鱼下脚料为原料,用木瓜蛋白酶水解,并分别与氯化亚铁、氯化镁、氯化锌和氯化钙螯合,采用单因素试验及正交试验进行优化,测定最佳螯合条件。研究表明:当金属元素添加量为2%时,带鱼蛋白水解肽-金属配合物(铁肽、钙肽、镁肽和锌肽)最佳螯合工艺条件为:螯合时间30 min, pH 7.0,温度30℃。此时铁肽、钙肽、镁肽和锌肽最大螯合率分别为68.9%, 63.2%, 65.7%和42.3%。     

紫菜酶解产物锌螯合-α-葡萄糖苷酶抑制剂活性肽的研究

研究紫菜酶解α-葡萄糖苷酶抑制活性肽与锌螯合反应的条件,并对锌-螯合-糖苷酶抑制剂活性肽的胃肠消化稳定性进行评价。对条斑紫菜在一定条件下进行内切与外切蛋白酶的复合酶解获得具备α-葡萄糖苷酶高抑制活性的多肽,采用超滤纳滤双膜组合分离后旋转蒸发浓缩冻干,获得的多肽质量浓度为1 mg/mL时对0.5 mg/mL的α-葡萄糖苷酶抑制率达68%;利用α-葡萄糖苷酶抑制活性肽与锌溶液反应进行螯合条件优化,螯合的最佳条件为：时间1.5 h,pH 4.5,温度37 ℃,质量浓度6 mg/mL,得到的锌-螯合-糖苷酶抑制剂活性肽溶液螯合度为25.6%,螯合后对α-葡萄糖苷酶抑制活性提高到79.8%;建立体外胃肠消化模型,以α-葡萄糖苷酶抑制活性为指标,评价制备的锌-螯合-糖苷酶抑制剂活性肽的胃肠消化耐受性,结果表明：经过不同酶与底物比、时间胃消化后α-葡萄糖苷酶抑制活性下降均在7%左右,十二指肠消化后,抑制活性下降均在5%以内,具有良好的胃肠消化稳定活性。     

二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽及其抗氧化活性研究

通过碱性蛋白酶进行第一步酶解,胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分别进行第二步酶解制备鱼鳞明胶抗氧化肽。结果表明,二步酶解法能有效提高酶解物的水解度,降低水解物的分子量,碱性蛋白酶—胰蛋白酶水解物具有显著的自由基清除能力和Fe~(2+)螯合能力。通过响应面优化的胰蛋白酶最佳二步酶解工艺为:底物浓度100 mg/mL、pH 7.8、温度53℃、时间50min,该条件下制备的水解物的Fe~(2+)螯合率为65.72%,清除DPPH·、·OH和O_2~-·的IC_(50)值分别是7.39,0.68,1.84mg/mL。     

基于亚铁螯合能力的灰树花蛋白酶解工艺优化及其抗氧化活性

以灰树花为原料,探究灰树花蛋白亚铁螯合肽的最佳制备条件,并对其抗氧化活性进行评价。从6?种蛋白酶中筛选出酶解最佳用酶,在此基础上,以亚铁螯合能力为响应值,进行单因素和正交试验,同时研究了灰树花蛋白亚铁螯合肽对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基的清除效果。结果表明,碱性蛋白酶酶解物的亚铁螯合能力最强,在pH?9、加酶量1?800?U/g、酶解温度55?℃、底物质量浓度0.5?g/100?mL、酶解时间2.5?h的条件下,灰树花蛋白亚铁螯合肽的亚铁螯合能力最强,可达1.854?mg/g,此时水解度为6.14%。灰树花蛋白亚铁螯合肽对DPPH自由基和羟自由基有较强的清除效果,且与多肽质量浓度呈正相关。结果显示,灰树花蛋白亚铁螯合肽具有良好的亚铁螯合能力,并具有较好的抗氧化活性,有望发展为新型的膳食补充剂。