LHRH受体在喉癌组织中的表达及其在喉癌HEp-2细胞膜表面与LHRH-PE40的亲和力

目的探讨人促黄体激素释放激素(luteinizing hormone releasing hormone,LHRH)受体在喉癌组织中的表达及其在喉癌HEp-2细胞膜表面与LHRH-PE40的亲和力。方法取外科手术收集的50份喉鳞癌及20份癌旁组织标本,采用Western blot法检测LHRH受体的表达,免疫荧光分析法检测LHRH受体的亚细胞定位,ELISA法检测HEp-2细胞膜表面LHRH受体与LHRH-PE40的亲和力。结果 LHRH受体在喉癌组织中的表达量明显高于癌旁组织(P0.001);LHRH受体在喉癌组织中定位于细胞膜和细胞质,而在癌旁组织中定位于整个腺体周边;LHRH受体在HEp-2细胞膜表面与LHRH-PE40的结合显示出线性和饱和性,且可被LHRH直接特异性抑制。结论 LHRH受体在喉癌组织中的过度表达及其在喉癌细胞表面与LHRH-PE40的高亲和力表明,其可能是LHRH-PE40的一个潜在的治疗靶点。     

LHRH-PE40与癌细胞表面LHRH受体结合特性的检测

目的检测LHRH-PE40融合蛋白是否保留了LHRH与癌细胞表面其相应受体特异性结合的性质。方法在Hela细胞培养液中,分别加入LHRH和LHRHPE40,经结晶紫染色法检测A值。另取宫颈癌组织切片,分别加LHRH-PE40和LHRH后,再加兔抗PE40血清和羊抗兔IgG异硫氰酸荧光素,在荧光显微镜下观察荧光强度。结果随着LHRH与LHRHPE40的摩尔数之比由100/1、250/1增加到500/1,细胞毒性的效果逐渐减弱。当LHRH/LHRH-PE40达到500/1时,肿瘤细胞表面的LHRH受体饱和;LHRH/LHRHPE40达750/1时,其A值与500/1时的A值接近。宫颈癌组织加入LHRH竞争后,荧光强度较仅加LHRHPE40组明显减弱。结论重组毒素LHRH-PE40仍保留了与癌细胞LHRH受体结合的特性。     

促黄体激素释放激素-TAT-p53融合蛋白制备及其对肿瘤细胞增殖作用的影响

目的制备促黄体激素释放激素(luteinizing hormone releasing hormone,LHRH)-TAT-p53融合蛋白,探讨其抗肿瘤作用。方法以重组质粒pET28a-p53为模板,经PCR扩增目的基因,双酶切,克隆至原核表达载体p ET20b中,构建重组表达质粒p ET20b-LHRH-TAT-p53,并在E. coli中IPTG诱导表达,经金属螯合层析、DEAE弱阴离子交换层析纯化目的蛋白。取对数生长期的HeLa、BGC及MDCK细胞进行细胞活性试验,检测pET28a-p53蛋白活性。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒pET20b-LHRH-TAT-p53构建正确;融合蛋白相对分子质量约54 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白55%;HeLa及BGC细胞加入纯化复性的重组蛋白后,细胞变圆、色暗、折光性变差,甚至裂解死亡,细胞死亡数增加,而MDCK细胞无变化;一定浓度范围内(25～120μg/m L)蛋白对HeLa及BGC细胞有明显的抑制作用。结论成功制备了LHRH-TAT-p53融合蛋白,该蛋白具有生物活性,对肿瘤细胞有杀伤作用。本研究为下一步制备靶向LHRH的肿瘤治疗药物提供了参考。     

促性腺激素释放激素拮抗剂研究进展

促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂是对GnRH的分子结构进行人为改造继而合成出的一种Gn RH类似物,这种Gn RH类似物在人体吸收后被酶裂解的速度变慢,半衰期延长,临床用药更为安全。其发挥作用的方式主要是竞争性地结合促性腺激素释放激素受体(GnRHR),从而快速有效地切断信号的传递,目前临床上广泛地应用于各种性激素类疾病。例如子宫内膜异位症、前列腺癌、子宫肌瘤以及体外受精-胚胎移植(IVF-ET)方案。Gn RHA研究进展较缓慢,本文将对最新上市或处于临床研究的GnRHA进行综述。     

抗促黄体激素释放激素受体单克隆抗体对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨抗促黄体激素释放激素受体(luteinizing hormone-releasing hormone receptor,LHRHR)单克隆抗体4F3B10对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及凋亡的影响。方法利用半定量RT-PCR分析Ishikawa细胞中LHRHR基因m RNA的转录水平,以β2-M基因为内参标准,通过光密度定量扫描比较确定LHRHR基因量。采用CCK-8法检测4F3B10对Ishikawa细胞增殖的影响;利用Annexin V-FITC/PI双染,在流式细胞仪上检测4F3B10对Ishikawa细胞凋亡的影响。结果 Ishikawa细胞中LHRHR的基因量约为内参的67.23%。4F3B10对Ishikawa细胞的增殖具有抑制作用,且呈剂量依赖性;经半数抑制浓度的4F3B10作用Ishikawa细胞48 h后,细胞凋亡率较未经4F3B10作用的细胞显著升高(P0.05)。结论 4F3B10可有效抑制Ishikawa细胞增殖,并可诱导其凋亡。     

LHRH-PE40对黑色素瘤A375细胞的诱导凋亡作用

目的 研究促黄体激素释放激素-绿脓杆菌外毒素(Luteinizing hormone releasing hormone-Pseudomonas aeru-gionosa exotoxin 40,LHRH-PE40)对黑色素瘤A375细胞的诱导凋亡作用。方法用LHRH-PE40处理A375细胞,透射电镜观察细胞结构的改变;DNA ladder和流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果经LHRH-PE40作用后,透射电镜观察可见A375细胞核聚集于一侧;DNA ladder检测发现,A375细胞的DNA电泳图像呈梯形条带;流式细胞术检测结果显示,A375细胞出现明显的二倍体峰,细胞周期也发生了相应的改变。结论 LHRH-PE40对A375细胞的细胞毒性作用可以有效诱导A375细胞凋亡。     

LHRH-PE40对LOVO细胞的靶向杀伤作用

目的研究LHRH-PE40对LOVO细胞的靶向杀伤作用。方法用XTT检测LHRH-PE40对LOVO细胞的体外细胞毒性。将LOVO细胞移植于裸鼠,测定静脉注射LHRH-PE40对体内肿瘤细胞生长的抑制作用。结果LHRH-PE40对LOVO细胞细胞毒作用的半数抑制浓度为2·103μg/ml,在裸鼠肿瘤模型中,LHRH-PE40剂量为150μg/kg时抑瘤率为68·49%,这种细胞毒性作用可以被LHRH(或LHRH类似物)特异性抑制。结论在体内外LHRH-PE40对LOVO细胞具有很强的细胞毒作用,其机制是LHRH-PE40通过与癌细胞膜上的LHRH受体特异结合发挥细胞杀伤作用。     

GnRH-Ⅰ疫苗的研究进展

促性腺激素释放激素-(IGnRH-Ⅰ)疫苗作为生育调节的免疫学制剂,应用范围广,在动物去势及避孕和人类免疫治疗研究中均显示出无可比拟的优越性。GnRH-Ⅰ疫苗包括化学合成肽疫苗、基因工程疫苗和核酸疫苗,目前的研究热点是GnRH-Ⅰ核酸疫苗。本文就上述疫苗的研究进展作一综述。     

充分发挥调度协调平衡优势节能降耗

本文研究了紧腺素能α－，β１－受体和ＤＡ受体在促甲状腺素释放激素抗兔失血性休克中的重要性。结果显示β１－受体拮抗剂美多心安，ＤＡ受体拮抗剂氟哌啶醇单用或联合用药预处理可取消ＴＲＨ抗兔失血性休克的作用，而α－受体拮抗剂酚妥拉明预处理则不取消ＴＲＨ的抗休克作用，表明ＴＲＨ的抗休克作用与β－肾上腺素能受体和多巴受受体密切相关，而与α－肾上腺素能受体关系不大。     

以VEGF受体为靶向的融合毒素的研究

肿瘤的快速生长主要依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子(VEGF)在刺激血管内皮细胞生长和诱导血管生成方面起重要作用。肿瘤组织因血管含量丰富,VEGF特异性受体的数目远高于邻近正常组织,因此可以将血管内皮生长因子和某些细胞毒素构建为融合毒素,特异性定位于肿瘤部位,通过抑制血管的增生达到抑制肿瘤的目的。国外自二十世纪九十年代后期开展这方面研究,国内尚少见此类报道。本文就此类融合毒素的设计及临床研究等方面的进展作一综述。     

大豆饮料雌激素样作用的实验研究

[目的]:研究大豆饮料的雌激素样作用。[方法]:通过测定大豆饮料对正常小鼠子宫和卵巢指数和血清中雌激素E2和促性腺激素FSH和LH的影响及对去卵巢小鼠子宫系数和血清中相关激素的影响。观察其雌激素样作用。[结果]:大豆饮料能提高正常小鼠子宫和卵巢指数(P0.05)、去卵巢小鼠子宫系数(P0.05);提高正常小鼠及去卵巢小鼠血清雌二醇(E2)水平(P0.05,P0.01);降低正常小鼠血清促卵泡生成素(FSH)(P0.01)和促黄体生成素(LH)水平(P0.01);降低去卵巢小鼠血清FSH和LH浓度(P0.05)。[结论]:大豆饮料具有一定的雌激素样作用。     

老年急性脑血管病患者的腺垂体分泌功能及临床意义

目的观察老年急性脑血管病(简称ACVD)患者的腺垂体分泌状况,并掌握其病理规律。方法对107例老年急性脑血管病患者的血清泌乳素(简称PRL)、生长激素(简称GH)、促黄体生成素(简称LH)、促滤泡成熟激素(简称FSH)、促甲状腺素(简称TSH)及血浆促肾上腺皮质激素(简称ACTH)水平进行了放免检测。结果伴随着老年急性脑血管病(简称ACVD)患者病程的不同,6种指标均呈现出不同的变化;老年急性脑血管病并发多脏器功能衰竭(MOF)的患者的血清泌乳素、生长激素与促滤泡成熟激素显著高于单纯性老年急性脑血管病;老年急性脑血管病并发MOF的患者中,重型患者血清泌乳素、生长激素显著高于轻型患者。     

分泌抗人精液抑制素单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

抑制素（Inh力in，IB）是由性腺产生的一种精蛋白激素，可反馈抑制垂体促性晚激素，尤其是滤泡刺激素的产生和分泌。为探索特异性干扰精于发生和法泡生长的节育途径以及不育症的机理，作者提纯了阻，并以此作为抗原免疫BALB／C小鼠，以小鼠的脾细胞与NS一五小鼠骨位癌细胞历合，获得司株分泌抗一b单克隆抗体的杂交癌细胞株，分别命名为IBI。、IG5、LA‘和IA。。用＊usA检测抗一IB效价．细胞培养上清为五：800～1：1600；小鼠腹水及其血清为10－‘～10－’。抗一IBMCAb与大白鼠促黄体激素、促滤泡激素和催乳素均不产生交叉反应。…     

人垂体生殖激素(FSH和LH)纯品的研制

本研究用乙醇法从人脑垂体丙酮干粉中提取粗品。用CM-52纤维素离子交换层析法分离促卵泡激素(FSH)和促黄体激素(LH),再用SP-Sephadex-C_(50)离子交换葡聚糖凝胶层析法纯化FSH,用DEAE-52纤维察离子交换层析法纯化LH,用HPLC蛋白A亲和层析法纯化抗LH和抗FSH免疫球蛋白,最后用HPLC抗LH的IgG和抗FSH的IgG精制LH和FSH。精制的FSH放免活性为5406Iu/mg(国际标准品4292),交叉反应(W/W)与LH为1.2％(国际标准品<3.1％)与TSH为0.46％(国际标准品>0.7％)。精制的LH放免活性为7928Iu/mg(国际标准品6640),交叉反应(W/W)与FSH<0.5％(国际标准品<2％)与TSH<0.1％(国际标准品<1％)。本研究制备的人脑垂体FSH和LH纯品达到了国际上同类产品水平,填补了国内空白。     

固液结合法合成抗肿瘤多肽药物醋酸布舍瑞林的相关分析

性激素依赖性疾病在欧美等发达国家的发病非常高,如前列腺癌、乳腺癌等。尽管在亚洲地区的发病率略低,但是有逐年上升的趋势。促性腺激素释放激素(Gn RH)类似物具有活性高、用量少以及安全性高的优势,广泛应用于性激素依赖性疾病的治疗中。尽管Gn RH的治疗效果显著,但是其昂贵的价格成为了许多患者的经济负担。文章通过查阅相关文献资料,采用固液相结合技术,对醋酸布舍瑞林的合成路线进行探讨,旨在为醋酸布舍瑞林的扩大生产、降低其市场售价起到促进作用。     

从生产促性腺激素的废渣中回收苯甲酸钠

本文介绍了重结晶法从生产促性腺激素的废渣中提取苯甲酸,再用纯碱中和生产苯甲酸钠的工艺方法,变废为宝,大幅度降低了促性腺激素的生产成本。     

具有烷基化功能基团的EGFR酪氨酸激酶抑制剂研究进展

近年来,针对肿瘤生长的关键调控因子,尤其是针对肿瘤信号通路中起关键调控作用的表皮生长因子受体酪氨酸激酶进行的小分子激酶抑制剂的研发为人们提供了有效对抗肿瘤的新策略。综述了以4-芳氨基喹唑啉为母核具有烷基化功能基的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂的研究进展,介绍了产生烷基化作用的功能基团以及抑制剂对受体蛋白的作用机理和结合方式。     

PD-1抗体在肿瘤治疗中的应用

肿瘤通过刺激免疫系统的抑制受体改变原有免疫反应,进行免疫逃逸。通过阻断T细胞抑制受体,阻断肿瘤的发生,为抗肿瘤免疫提供了潜在的治疗方法。PD-1(programmed death-1)是T细胞抑制受体,在T细胞功能性紊乱时持续表达,其可作为停止信号在肿瘤中限制T细胞的效应功能。阻断PD-1信号可有效帮助衰竭T细胞,促进抗肿瘤免疫应答。PD-1抗体在癌症治疗及免疫刺激中具有重要作用,本文就PD-1及其配体、PD-1/PD-Ls信号通路以及PD-1抗体在肿瘤治疗中的应用作一综述。     

19-正甾体激素合成的新路线

19-正甾体激素在医药上可用作口服避孕剂及促性激素制剂。这种激素一般可用Syntex 法合成,但也有用光化反应及C~(19)甲基氧化反应进行合成的。在这些方法中,以Syntex 法为最有效。经过改进的方法,可用下列方程式表示:将N-溴代乙酰胺及过氯酸制成的次溴酸添加于     

破伤风毒素及其AB片段对金鱼的毒力

作者研究了破伤风毒素及其 AB 片段对金鱼和小鼠的毒力,发现16ng 的毒素即可使金鱼麻痹和死亡;26μg 的 AB 片段即可使小鼠麻痹和死亡,而对金鱼却无作用。当抗 C 或 AB 片段的抗体与毒素结合后,可阻断毒素对金鱼的致麻痹作用。上述结果表明,破伤风毒素可作用于金鱼的外周神经系统,而 AB 片段则不能。毒素与其受体结合是毒素对金鱼作用所必需的。