紫外线消毒对光复活时大肠杆菌活性的影响

以大肠杆菌为研究对象，考察了紫外线消毒对大肠杆菌的灭活效果及紫外线消毒后大肠杆菌在可见光下发生光复活的情况，同时考察了紫外线消毒和光复活过程中大肠杆菌电子传递体系（ETS）活性的变化。结果表明，大肠杆菌的灭活率随着紫外线剂量的增加而提高，在相同剂量下高强度的紫外线对大肠杆菌的灭活效果好于低强度的紫外线。经紫外线灭活后的大肠杆菌在可见光下会发生光复活，紫外线剂量对大肠杆菌的光复活有一定影响，高剂量下大肠杆菌发生光复活的能力比低剂量下的差；相同剂量下，较高强度的紫外线有利于控制大肠杆菌的光复活。对大肠杆菌ETS活性的研究表明，随着紫外线强度和剂量的增加，大肠杆菌的活性不断降低；紫外线消毒后的大肠杆菌经可见光照射后发生光复活时，其活性有所增加，在较高的紫外线剂量和强度下大肠杆菌的活性增加较少，而在较低剂量和强度下大肠杆菌的活性恢复能力较强。     

儿科抗生素使用及常见的细菌耐药监测

目的:研究与分析儿科抗生素使用及常见的细菌耐药监测情况。方法:选取本院2015年1月-2017年11月收治的58例感染性疾病患儿为对象进行研究,回顾性分析其全部的临床资料,统计分析其抗生素使用情况,并对常见细菌耐药情况进行监测。结果:58例患儿对抗生素的使用率为100%,常见细菌分离出50株,其中革兰阴性杆菌26株(52.0%)、革兰阳性球菌24株(48.0%)。常见细菌中,革兰阳性球菌耐药性:对多数抗生素的耐药性,金黄色葡萄球菌>40.0%左右,且其对苯唑西林、复方新诺明、氯霉素等均为>65.0%;对于青霉素的耐药性,金黄色葡萄球菌为94.0%、表皮葡萄球菌为96.0%,其他球菌为51.0%;对于氨苄青霉素耐药性,表皮葡萄球菌>86.0%,且其对四环素为50.0%,而其他则>18.5%;对于头孢他啶的耐药性,乙型溶血性链球菌为11.0%,其他>27.0%。革兰阴性杆菌耐药性:对于头孢唑林、氨苄西林、哌拉西林等所有细菌耐药性均>79.0%;且对氨曲南为27.5%、对头孢吡肟和亚胺培南为7.5%、对头孢噻肟钠为26.0%、对头孢他啶为51.0%;对于氨曲南的耐药性,铜绿假单胞菌和不动杆菌为46.0%,且两者对复方新诺明为64.0%,对氯霉素、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星为27.0%。结论:在临床儿科中应用抗生素的频率较高,而抗生素耐药性较强的主要为呼吸道中分离的革兰阳性/阴性球菌等。     

虹鳟肠炎红嘴病病原菌的确定及其生长特性研究

为了确定虹鳟Oncorhynchus mykiss肠炎红嘴病的病原菌,采用分离纯化的方法从患病虹鳟肝脏和脾脏内分离到一种细菌(BH1206),通过人工感染试验并且采用常规生化鉴定、API 20E试剂盒、Biolog鉴定系统和分子测序方法对该菌进行判断,采用纸片法对该菌进行药敏试验。结果表明:BH1206菌株为患病虹鳟的致病菌,感染该菌后虹鳟体表呈现出血点,吻端红肿及溃烂,有红色脓状物包裹肛门,肠道出血,内部脏器均有不同程度的病变;该菌为革兰阴性、氧化酶阴性的非发酵型需氧杆菌;根据生理特征及分子鉴定结果分析,BH1206菌株为鲁氏耶尔森菌Yersini ruckeri;BH1206菌株在温度为28³0℃时生长状态最佳,在p H为6.530℃时生长状态最佳,在p H为6.5⁷.5范围内生长状态最佳,在Na Cl浓度为3%内的培养基中能生长并且Na Cl含量为0时生长状态最佳;BH1206菌株对利福平、多黏菌素、阿莫西林完全耐药,对复方新诺明、庆大霉素、卡那霉素、羧苄青霉素、强力霉素、诺氟沙星、氨苄西林、青霉素、链霉素、四环素、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素、氧氟沙星、恩诺沙星、氯霉素、呋喃唑酮、新霉素均有不同程度的敏感。研究表明,虹鳟肠炎红嘴病病原菌为鲁氏耶尔森菌,药敏试验结果可以为该病的防治提供参考。     

地图鱼迟钝爱德华氏菌病病原菌的鉴定及毒力基因的检测

从患病地图鱼Astronotus ocellatus肝脏组织中分离到菌株AO1,经人工感染试验证实其为致病菌。通过ATB Expression半自动细菌鉴定仪和常规生理生化特性的分析,初步鉴定该菌株为迟钝爱德华氏菌Ed-wardsiella tarda。测定菌株AO1的16S rRNA基因序列并进行分析,结果显示,该菌株与迟钝爱德华氏菌的同源性最高,达99.9%。因此,可鉴定该菌株为迟钝爱德华氏菌。根据迟钝爱德华氏菌的毒力基因菌毛亚基(fimA)基因序列设计引物,进行PCR扩增,得到383 bp序列,该序列与迟钝爱德华氏菌的fimA基因序列相似性达99.0%,进一步说明菌株AO1具有fimA基因,有一定的致病力。药物敏感试验结果表明,菌株AO1对阿米卡星、氧氟沙星、庆大霉素、新生霉素、氨苄西林、氨曲南、卡那霉素、头孢咪啉、诺氟沙星、环丙沙星、呋喃妥因、妥布霉素、氨苄青霉素13种抗生素较为敏感。     

细鳞鱼气单胞茵的分离、鉴定及药敏试验

从患病细鳞鱼Brachymystax lenok体内分离出两种菌株(记为BAS和BAH),均属于革兰氏阴性短杆菌,无芽孢,无荚膜,多数呈单个排列,极端有单鞭毛。对两种菌株的菌落形态鉴定结果表明:BAS的菌落呈圆形,为浅黄色,半透明,无水溶性色素;BAH的菌落也呈圆形,中央微高,为灰白色。经API20NE细菌生化鉴定,BAS和BAH菌株分别为温和气单胞菌Aeromonas sobria和嗜水气单胞菌A.hydrophila,其鉴定率分别为98.1%和99.3%。注射剂量为1×10⁷CFU/mL时表现出较强的致病性,感染12 d时,细鳞鱼的死亡率为100%。药物敏感试验结果表明:两种菌株对妥布霉素(TOB)、四环素(TET)、庆大霉素(GEN)、卡那霉素(KAN)、氟哌酸(NOR)、环丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LVX)高度敏感;对呋喃唑酮(FUR)、呋喃那斯、氯霉素(CHL)、复方新诺明(TST)中度敏感;对阿奇霉素(AZI)、红霉素(ERY)不敏感。     

黑暗培养环境下紫外线对压载水中海藻的灭活效果

按照《国际船舶压载水及沉积物控制和管理公约》对岸基测试试验的要求,采用准平行光束仪对8种海藻进行紫外线辐射后黑暗环境培养5 d,研究紫外线对它们的灭活效果。结果表明,紫外线对三角褐指藻、中肋骨条藻、盐生杜氏藻和赤潮异弯藻具有一定的灭活效果,灭活率随着紫外线剂量的增加而提高,在剂量为400 mJ/cm2时灭活率分别为48.5%、86.8%、98.2%和100%;小剂量的紫外线辐射会刺激青岛大扁藻的生长,当剂量200 mJ/cm2时藻细胞数量开始缓慢减少,在剂量为400 mJ/cm2时灭活率为15.9%;小剂量的紫外线辐射对小新月菱形藻和塔胞藻具有一定的灭活效果,在剂量300 mJ/cm2时灭活效果开始降低,在剂量为400 mJ/cm2时灭活率分别为42.2%和18.1%;紫外线剂量≤400 mJ/cm2时对利玛原甲藻没有灭活效果。总体来看,紫外线对海藻的灭活效果较差。藻细胞个体大小不是影响紫外线灭活效果的因素,藻的种类、藻细胞壁的有无及其成分的不同可能是造成灭活效果不同的原因。     

超声预处理强化紫外线消毒效果的研究

采用超声预处理强化紫外线消毒效果,并从分子生物学的角度探讨了其强化机理.结果表明,无论是单独紫外辐照还是超声预处理/紫外辐照,紫外辐照剂量与大肠杆菌灭活率之间均具有良好的线性关系;进行超声灭活时,超声功率、作用时间及菌悬液体积对灭活率均无显著意义(P>0.05),按影响大小排序为:菌悬液体积>超声功率>作用时间;当单独超声处理200 mL大肠杆菌悬液时,超声功率为200 W、作用时间为20 S条件下的灭活率最高(0.22-1g),该条件下继续进行紫外辐照,灭活率最高达到2.75-1g,1 h光复活后灭活率仍高达1.72-1g,超声/紫外协同作用的灭活率大于二者单独作用的灭活率之和,表明该条件下超声预处理起到了强化紫外线消毒的作用;超声处理只能改变细胞的结构,不能破坏其DNA;酶敏感位点数量与大肠杆菌的灭活率具有较强的相关性,相关系数约为0.88.     

L-苏糖酸阿奇霉素抗菌效应及急性毒性研究

目的观察L-苏糖酸阿奇霉素的抗菌效应及其急性毒性。方法肉汤稀释法检测药物对临床分离的常见致病菌最小抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）以评价其体外抗菌作用。以金黄色葡菌球菌及耐甲氧西林金黄色葡菌球菌感染小鼠建立动物模型,阿奇霉素灌胃给药对感染动物进行治疗评价其体内抗菌作用并测定小鼠LD50评价其急性毒性。结果体外实验显示L-苏糖酸阿奇霉素和乳糖酸阿奇霉素对革兰阳性球菌、革兰阴性球菌和革兰阴性杆菌的MIC50、MIC90、MBC50和MBC 90基本一致,均对耐药菌无效;低剂量（37.5mg.kg-1）L-阿苏糖酸阿奇霉素和乳糖酸阿奇霉素对金黄色葡萄球菌敏感株感染小鼠的保护率分别为55%和15%,经χ2检验差异有统计学意义（P〈0.05）;小鼠腹腔注射L-苏糖酸阿奇霉素和乳糖酸阿奇霉素的LD50分别为（1 308.6±203.2）mg.kg-1和（1 193.1±161.4）mg.kg-1,经t检验差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 L-苏糖酸阿奇霉素和乳糖酸阿奇霉素体外抗菌活性相似,低剂量L-苏糖酸阿奇霉素对金葡菌感染小鼠有更强的保护作用且对小鼠的急性毒性小于乳糖酸阿奇霉素。     

紫外线强度及剂量对大肠杆菌光复活的影响

以水中大肠杆菌为研究对象,考察了不同紫外线强度及剂量对大肠杆菌的灭活效果以及对其光复活的影响.结果表明:大肠杆菌的灭活率随着紫外线剂量的增加而增加,而相同剂量下高强度的紫外线对大肠杆菌的灭活效果要好于低强度的,且高紫外线强度有利于控制大肠杆菌的光复活程度.当紫外线强度为0.153 mW/cm2、紫外线剂量为60 mJ/cm2时,其对大肠杆菌的灭活率高达5个对数级.高剂量紫外线照射下大肠杆菌发生光复活的能力明显弱于低剂量下的,紫外线剂量为120 mJ/cm2时的大肠杆菌光复活率较5 mJ/cm2时的低了3个对数级.     

紫外线辐照对四环素耐药细菌及基因的消毒特性

采用紫外线辐射处理市政污水,考察紫外消毒对市政污水厂中耐四环素的总异养菌、粪大肠菌群和单一大肠杆菌以及tetA和tetO两种耐药基因的消毒特性。结果表明:随紫外线剂量的提高,对耐四环素总异养菌的杀灭效果显著增强,当消毒剂量为10 m J/cm~2时,灭活率高于99%;紫外线对耐四环素粪大肠菌群和大肠杆菌K12的杀灭趋势和总异养菌类似;耐药基因tetA随消毒剂量的增加而不断降低,在消毒剂量为5 m J/cm~2时已基本被完全灭活;低消毒剂量下(5m J/cm~2)耐四环素细菌尤其是某些革兰氏阴性耐药细菌,一定程度上对紫外消毒具有耐受性,它们对水体的生态风险需要引起重视。     

海湾扇贝幼体期流行性弧菌病的研究

从辽宁兴城育苗场和辽宁省海洋水产研究所育苗室患面盘解体的海湾扇贝ArgopectenirradiansLamarck幼体中分离出6株菌,经感染试验表明,其中3株菌B01、Y01和Y02为病原菌。根据菌体形态及生理、生化测试,B01鉴定为需钠弧菌Vibrionatriegen,Y01和Y02具有相同的形态、生理、生化特征,鉴定为弧菌属Vibrio。需钠弧菌对庆大霉素、痢特灵、菌必治、诺氟沙星、氯霉素、环丙沙星、多粘菌素B敏感;Y01和Y02菌对诺氟沙星、菌必治、氯霉素、复方新诺明、环丙沙星、磺胺异唑敏感。对海湾扇贝育苗水体中细菌总数和弧菌数量的监测结果表明,幼体发生病变之前的水体中,细菌和弧菌的密度高于正常育苗水体的。文中还对病原菌的传播途径等问题进行了讨论。     

长丝鲈“突眼病”病原菌的分离鉴定及药敏试验

从患"突眼病"长丝鲈Osphronemas goramy肾脏中分离到1株优势菌CSL1,分别以腹腔注射、划伤浸泡和直接浸泡3种方式进行人工回归感染试验。结果表明:CSL1菌株能感染长丝鲈,且毒力较强,腹腔注射0.2 m L菌液(菌浓度为1×108cfu/m L)可导致受试长丝鲈66.7%死亡,划伤浸泡感染(菌浓度为1×108cfu/m L)死亡率达100%,直接浸泡感染(菌浓度为1×108cfu/m L)无死亡,被感染长丝鲈出现与自然感染相同的症状;对菌株CSL1进行形态特征观察和主要理化特性分析,初步鉴定为豚鼠气单胞菌Aeromonas caviae;进一步选用16S rRNA对该菌进行分子鉴定,将序列结果进行Blast分析并构建进化树,结果显示,16S rRNA基因与Gen Bank上登录的豚鼠气单胞菌的相应序列具有很高的同源性,进化树聚为一支;综合生理生化与分子鉴定结果,判定所分离的菌株为豚鼠气单胞菌;药敏试验显示,该菌株对左氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、吡哌酸8种药物高度敏感,对阿齐霉素、新霉素和强力霉素3种药物中度敏感,对新生霉素、萘啶酸、氨卞青霉素、青霉素、阿莫西林、甲氧卞啶、链霉素、复方新诺明8种药物具有耐药性。研究表明,长丝鲈"突眼病"的病原菌为豚鼠气单胞菌,其药敏结果可为防治该病提供用药参考,庆大霉素是治疗由豚鼠气单胞菌引起的各种养殖鱼类相关疾病的普适药物。     

草鱼铜绿假单胞菌的鉴定及药物敏感性分析

从患病草鱼C tenopharyngodon idella体表病灶上分离到一株优势菌,经分离纯化培养制成细菌悬液,分别以腹腔注射和浸泡两种方式感染草鱼。结果表明:该菌株能感染草鱼,且具较强毒力,腹腔注射0.2mL该菌液(3×109cfu/mL),可导致受试草鱼100%死亡;创伤浸泡感染(3×108cfu/mL),死亡率也达100%,受感染鱼出现与自然感染相似的类似赤皮病症状。对该病菌进行形态特征观察和主要理化特性分析,初步鉴定为铜绿假单胞菌Pseudom onas aeruginosa。进一步对该菌进行分子鉴定,共选用16S rRNA、RNA聚合酶β亚单位(rpoB)和促旋酶亚单位蛋白(gyrB)3个基因进行鉴定分析。序列克隆与BLAST分析结果显示,这3个基因均与GenBank上登录的铜绿假单胞菌的相应序列具有很高的同源性,16S rRNA、rpoB和gyrB基因与已知铜绿假单胞菌相应序列的同源性分别在99%、98%和93%以上。综合生理生化与分子鉴定结果,可判定所分离的菌株为铜绿假单胞菌。药敏试验结果显示:该菌对阿米卡星、菌必治、氟哌酸和妥布霉素等11种药物高度敏感,对链霉素和庆大霉素中度敏感,对罗红霉素、红霉素、四环素、苯唑青霉素、新霉素和头孢氨苄等16种药物具有耐药性。     

成都市武侯区动物性食品源大肠杆菌耐药表型的检测与分析

采用K-B纸片扩散法对36株从2011年到2013年期间分离的携带有毒力基因的动物性食品源大肠杆菌进行氨苄西林、四环素、头孢曲松、环丙沙星等12种抗菌药物的药敏试验.结果表明受试菌株对头孢噻肟、四环素、氨苄西林、诺氟沙星、阿米卡星、氯霉素和环丙沙星有较高耐药率,分别为88.89%、77.78%、69.44%、61.11%、58.33%、47.22%和47.22%.大部分受试菌株普遍存在多重耐药性,耐药谱集中在3耐、5耐、6耐和7耐,特别是5耐以上的耐药菌株占到72.1%.菌株对氯霉素、庆大霉素、四环素和氨苄西林的耐药性随时间推移有上升趋势,并推测携带eae A毒力基因型的大肠杆菌与AMK、CTX、AZT、TET和AMP耐药性之间具有一定关联性,携带aggR毒力基因型的大肠杆菌与TET、CTX、NOR、AMP和CIP耐药性之间具有一定关联性.研究结果揭示了成都市动物性食品源大肠杆菌耐药性普遍和严重,为成都市大肠杆菌耐药性的安全评价提供依据.     

斑鳢内脏白点病病原的分离鉴定

从患内脏白点病的斑鳢Channa maculata肝、脾、肾组织中分离并筛选出一株致病菌GC1,对该病菌的形态学及生理生化特性进行了测定,结果均符合舒氏气单胞菌Aeromonas schubertii的特性。以细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增,得到该菌的部分16S rRNA基因序列,长约1 502 bp。将所测序列与GenBank中序列进行Blast比对并构建系统进化树,结果表明,该序列与舒氏气单胞菌的同源性高达99%。人工感染试验证明,该菌株具有极强的致病力,LD50为104.5CFU/mL。29种药物筛选结果显示:该菌对菌必治、先锋必、头孢氨苄、头孢噻吩、先锋V、萘啶酸、四环素、氧氟沙星、氟罗沙星等18种药物高度敏感;对阿莫西林、红霉素、克拉霉素等7种药物中度敏感;对青霉素G、杆菌肽、苯唑青霉素等不敏感。     

感染性心内膜炎患者血培养病原菌及其耐药性分析

目的:分析感染性心内膜炎患者血培养病原菌及其耐药性,为临床提供参考。方法:通过对52例2003年9月-2013年9月本院收治的感染性心内膜炎患者进行血培养实验和病原菌耐药性实验,分析感染性心内膜炎患者血培养病原菌及其耐药性。结果:52例患者共筛选出32株病原菌,感染率为61.54%,其中革兰阳性菌株28株,占87.50%,主要为金黄色葡萄球菌、草绿色链球菌、粪肠球菌、牛链球菌、口腔链球菌和表皮葡萄球菌,革兰阳性菌对环丙沙星和庆大霉素耐药性较强,对万古霉素耐药性较差;革兰阴性菌4株,占12.50%,主要为铜绿假单胞、产气肠杆菌和大肠埃希菌,革兰阴性菌对庆大霉素耐药性较强,对头孢哌酮和环丙沙星耐药性较差。结论:金黄色葡萄球菌和草绿色链球菌是感染性心内膜炎的主要致病菌,而这两株菌对万古霉素的耐药性均较差,所以临床上可以用万古霉素作为预防和治疗感染性心内膜炎的主要抗生素,这对临床治疗感染性心内膜炎有重要的指导意义。     

液相色谱串联质谱法测定饮用水体中抗生素残留

采用固相萃取技术(solid phase extraction,SPE )对饮用水体样品中的7类30种抗生素药物残留(包括青霉素类1种、林可胺类1种、氯霉素类3种、喹诺酮类3种、四环素类4种、大环内酯类5种、磺胺类抗生素13种)进行富集,使用液相色谱/串联质谱仪(LC-MS/MS)的多反应监测模式(multiple reaction monitor,MRM)进行定性定量分析.该方法的平均回收率为61.89%～152.66%,相对标准偏差为1.60%～14.97%,方法最低检出浓度为1.5 ng/L,表明该方法完全适用于饮用水体中杭生素残留的监测分析.     

福建红罗非鱼源无乳链球菌的分离鉴定及其分子特征

为探讨2017年福建省漳州市某养殖场红罗非鱼出现疾病的发病原因,并为该病的有效防治提供理论基础,以常规方法从患病红罗非鱼Oreochromis mossambicus×O.niloticus脑组织中分离优势菌株,采用形态观察和16S rRNA基因序列分析等方法对该优势菌进行鉴定,通过分子血清型、MLST和毒力基因等分型方法对分离株进行了分子特征分析,并采用K-B纸片扩散法检测分离株对26种抗生素的敏感性。结果表明:从病鱼脑组织中分离获得1株具致病力的不溶血(即γ溶血)无乳链球菌,该分离株是Ⅰa-ST7型,其毒力基因型为bac~+-bca~+-cfb~+-hylB~+-fbsA~+-fbsB~+-lmb~--scpB~--cpsE~+-sip~+,且对头孢类药物、强力霉素、氨苄青霉素等13种药物敏感,对氟罗沙星、青霉素G、多粘菌素B等4种药物中度敏感,而对新霉素、庆大霉素、卡那霉素等9种药物耐药。本研究结果可为福建红罗非鱼无乳链球菌病的疫病监测、疫苗研制和药物防治等研究提供基础数据。     

肺炎支原体265株耐药结果分析

目的:为了了解本地区肺炎支原体的对抗生素的耐药情况,为临床医师治疗用药提供依据。方法:采用口痰或咽拭子进行肺炎支原体半定量培养鉴定加药敏试验,并对培养阳性的265株肺炎支原体对14种抗生素的耐药情况进行统计分析。结果:265株肺炎支原体对14种抗生素的耐药率分别为:强力霉素(63.40%)、乙酰螺旋霉素(44.91%)、美满霉素(43.02%)、莫西沙星(43.02%)、克林霉素(34.72%)、交沙霉素(34.34%)、依托红霉素(28.68%)、环丙沙星(28.68%)、阿奇霉素(28.68%)、左氧氟沙星(27.17%)、克拉霉素(26.79%)、加替沙星(26.79%)、罗红霉素(25.66%)、红霉素(24.53%)。结论:本地区肺炎支原体耐药性已经日趋严重,临床医师在治疗支原体肺炎时应该重视药敏结果,选择合理有效的抗生素,是减少耐药菌株的重要手段。     

219株铜绿假单胞菌感染分布与耐药性分析

目的:了解铜绿假单胞菌的感染情况及其耐药性,为临床合理应用抗生素提供科学依据。方法:收集本院临床分离铜绿假单胞菌,分析其科室分布、标本来源及耐药情况。结果:铜绿假单胞菌主要分布于干诊三病房(53.9%),主要以痰液分离最多(91.3%);其耐药率分别为:复方新诺明(100%)、头孢噻肟(83.94%)、庆大霉素(53.42%)、头孢他啶(51.83%)、氨曲南(50.55%)、头孢西林(50.27%)、环丙沙星(48.62%)、左氧氟沙星(44.95%)、妥布霉素(43.38%)、头孢吡肟(42.66%)、阿米卡星(26.30%)、哌拉西林/他唑巴坦(22.57%)、美罗培南(16.90%)、亚胺培南(14.39%)。结论:铜绿假单胞菌的耐药机制复杂,应加强医院耐药菌株的监测,指导临床合理使用抗生素,采取有效的防范措施最大限度减少铜绿假单胞菌感染。