鮟鱇鱼皮胶原蛋白酶提取最优工艺研究与结构表征

为了研究提取鮟鱇鱼皮胶原蛋白的最优工艺,以鮟鱇鱼皮为研究对象,通过选取液料比、加酶量和酶解时间3个变量进行单因素试验,再根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,在单因素基础上采用三因素三水平响应面分析法(RSM),制备胃蛋白酶酶促溶性胶原蛋白(PSC)并对其进行理化性质分析。结果表明：鮟鱇鱼皮胶原蛋白最优提取工艺条件是4℃、液料比18:1、加酶量3%、提取时间48h,此条件下鮟鱇鱼皮胶原蛋白提取率为2.11%;氨基酸分析得鱼皮中Arg和Tyr含量分别为16%和18%;差示扫描量热仪(DSC)测定PSC的热收缩温度为48.9℃;SDS-PAGE电泳显示胶原蛋白基本保留了三股螺旋结构;电子显微镜(SEM)扫描显示PSC呈多孔网状结构。     

正交试验优化黄河鲤鱼鳞酶促溶性胶原蛋白提取工艺

为提高黄河鲤鱼鳞胶原蛋白提取率,在4 ℃条件下,采用胃蛋白酶和0.5 mol/L乙酸溶液对其提取工艺进行研究,在单因素试验的基础上,采用正交试验设计方法探索了提取时间、加酶量和料液比3 个因素对黄河鲤鱼鳞酶促溶性胶原蛋白（pepsin soluble collagen,PSC）提取率的影响。结果表明,黄河鲤鱼鳞PSC的最适提取工艺参数为提取时间60 h、加酶量40 kU/g和料液比1∶10（g/mL）,在此条件下,PSC提取率达到（17.7±0.7）%。所提取的产品与酸溶性胶原蛋白（acid soluble collagen,ASC）有相似的电泳性质和氨基酸组成,表明其可能与ASC具有相似的分子结构。     

酸酶复合法提取鲢鱼鱼鳞胶原蛋白的工艺研究

以鲢鱼鱼鳞为研究对象,采用酸酶复合法提取鱼鳞胶原蛋白,并对酶法提取工艺中的酶量、时间、料液比等因素进行单因素试验和正交优化。使用氨基酸自动分析仪、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和圆二色谱(CD)对酸溶胶原蛋白(ASC)和酶溶胶原蛋白(PSC)的性质进行研究。试验表明,酸提取后的残渣进行酶提取,其最佳工艺条件为:酶量4%,料液比1∶25,提取时间60 h。ASC提取率达到5.09%,PSC提取率最高达到12.06%,胶原蛋白总提取率为17.15%。氨基酸组成结果表明,ASC和PSC均为典型的I型胶原蛋白;SDS-PAGE电泳分析显示,ASC和PSC的电泳区带与I型胶原蛋白标准品基本一致;CD显示ASC和PSC均保持三股螺旋结构。     

响应面法优化鲟鱼皮胶原蛋白多肽的酶解工艺

为了解决胶原蛋白多肽制备得率低的问题,以鲟鱼-甲骨板皮胶原蛋白多肽得率为主要指标,在单因素试验基础上,进一步利用响应面模型试验确定加酶量、提取时间、液料比3个因素的最优条件,并建立了关系模型。试验结果表明:影响鲟鱼鱼皮胶原蛋白多肽得率的3个因素主次顺序为:液料比酶解时间加酶量,最优提取工艺为:0.5 mol/L的乙酸与原料之间的液料比为14.02,加酶量为1.69%,提取时间为8.51 h。在此条件下胶原蛋白多肽得率为78.86%,且产物主要为小分子胶原蛋白,峰值分子量为3719 u。     

响应面优化超声波辅助提取马面鱼皮胶原蛋白工艺研究

为了优化马面鱼皮胶原蛋白的提取工艺,引入超声波辅助提取技术。在单因素试验基础上结合响应面分析法对乙酸浓度、液料比值、超声波功率3个因素进行优化。结果表明,最佳提取条件为乙酸浓度0.5 mol/L、液料比值30 m L/g、加酶量2 000 U/g、超声波功率700 W、超声波提取时间10 min,马面鱼皮胶原蛋白提取率达到15.31%,而传统酶法提取率为3.89%,提取率提高了11.42%,说明超声波对胃蛋白酶水解鱼皮胶原蛋白有一定的促进作用,有效提高了胶原蛋白的提取率。     

斑点叉尾鮰鱼皮胶原蛋白的理化特征研究

选用斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)鱼皮为材料,用乙酸和乙酸-胃蛋白酶,分别提取鱼皮中的酸溶性胶原蛋白(acid-solubilise collagen,ASC)和酶溶性胶原蛋白(pepsin-solubilise collagen,PSC),并对其理化性质特征进行研究研究发现,提取得到的ASC纯度高达93.11％,PSC纯度高达93.46％;紫外吸收分析表明,ASC和PSC的吸收峰值均在233nm处;蛋白图谱中两种胶原蛋白均由两种不同的α链(α1) 2α2组成,具备Ⅰ型胶原蛋白的特征;ASC和PSC的傅里叶红外图谱相似,具有完整的三螺旋结构;ASC的变性温度为34.2℃,PSC的变性温度为33.9℃.     

草鱼皮酸溶性和酶溶性胶原蛋白的提取及性质

本文研究了从草鱼皮中提取酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC)及其部分性质。草鱼皮中ASC和PSC的提取得率以干基计分别为8.0%和18.6%;对草鱼皮ASC和PSC的紫外光谱分析,最大吸收峰都接近223nm;SDS-PAGE电泳图谱显示草鱼皮胶原蛋白是由两条不同的α链组成,分子量都在100kDa以上,与猪皮I型胶原蛋白相似;草鱼皮ASC和PSC热变性温度分别为33.8、34.5℃,只比猪皮的热变性温度(37℃)低3℃左右。结果表明草鱼皮胶原蛋白在功能食品、医药、化妆品、制药等方面有潜在的应用。     

胃蛋白酶提取马面鱼皮胶原蛋白及结构分析

以马面鱼皮为原料,优化胃蛋白酶提取马面鱼皮胶原蛋白工艺,并对所提胶原蛋白进行结构分析,为马面鱼皮胶原蛋白的制备提供实验基础。得到提取最优条件为胃蛋白酶加酶量16?800?U/g、缓冲液pH?3.0、料液比1∶30（g/mL）、提取时间21.5?h,马面鱼皮胶原蛋白提取率为27.6%。氨基酸分析、紫外光谱分析、傅里叶变换红外光谱分析、垂直电泳分析表明,所提胶原蛋白符合I型胶原蛋白特征,保持胶原蛋白的三螺旋结构。     

不同提取方法对鲽鱼皮胶原蛋白结构特征和功能性质的影响

为揭示不同提取方法对鲽鱼皮胶原蛋白结构特征和功能性质的影响,以新鲜鲽鱼皮为研究对象,采用酸法和酶法从其中提取胶原蛋白,得到酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶促溶性胶原蛋白(PSC),并对这2种胶原蛋白的结构特征和功能性质进行比较研究。紫外光谱扫描结果表明,ASC和PSC在230 nm处均有强吸收峰,在280 nm处无明显的吸收峰,均符合胶原蛋白的结构特征;傅里叶红外光谱扫描结果显示ASC和PSC都存在酰胺A、酰胺B、酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ、酰胺Ⅲ,均保持了胶原蛋白三维螺旋结构的完整性;SDS-PAGE凝胶电泳证实了ASC和PSC均为Ⅰ型胶原蛋白。吸湿性和保湿性结果表明,随着时间的变化,ASC和PSC的吸湿率呈现逐渐增大的趋势,而其保湿率呈现下降的趋势;浊度及聚集特性结果表明,ASC和PSC溶液的聚集动力学曲线均呈现S型趋势,且在整个过程中ASC的聚集能力大于PSC的聚集能力;吸水性和吸油性结果显示,ASC和PSC均有一定的吸水性和吸油性,且两者的吸油性均大于各自的吸水性。以上结果表明,不同提取方法对鲽鱼皮胶原蛋白结构特征和功能性质有一定的影响。     

乙酸提取齐口裂腹鱼皮胶原蛋白工艺优化

以齐口裂腹鱼皮为实验材料,选用乙酸提取其中的胶原蛋白。通过单因素实验设计分别从温度、时间、液料比和乙酸浓度4个因素对胶原蛋白提取率的影响进行研究,然后在单因素实验基础上进行响应面优化实验设计,对乙酸提取齐口裂腹鱼皮胶原蛋白的提取参数进行优化。实验结果表明,乙酸提取齐口裂腹鱼皮胶原蛋白的优化工艺条件为温度36.4℃,时间36h,液料比51:1 mL/g,乙酸浓度0.54 mol/L,在此条件下得到的胶原蛋白提取率为67.26%。     

响应面优化草鱼鱼鳔酶溶胶原蛋白的提取工艺

为提高草鱼下脚料鱼鳔中胶原蛋白的提取率,采用响应面法优化胃蛋白酶提取草鱼鱼鳔胶原蛋白。探讨加酶量、提取时间和液料比3个因素对提取率的影响;在单因素试验的基础上进行响应面优化试验。结果表明：胃蛋白酶提取草鱼鱼鳔胶原蛋白的最佳工艺条件为加酶量40mg/g、提取时间48h、液料比80:1(mL/g),在此工艺条件下胶原蛋白实际提取率为17.82%,与模型预测值(18.04%)接近。方差分析显示,模型可靠,3个因素均对草鱼鱼鳔胶原蛋白的提取率影响显著。     

草鱼鱼鳞中活性胶原蛋白提取工艺及参数优化

以草鱼鱼鳞为原料,在低于蛋白变性温度的条件下提取酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并对鱼鳞原料的前处理方法、胶原蛋白提取工艺进行优化。结果表明,在鱼鳞原料的前处理工艺中,以0.1mol/L 的Na2CO3 溶液为试剂脱除原料中杂蛋白的最佳工艺条件为室温、料液比1:40(g/mL),300r/min 搅拌处理3 次,每次6h;以0.3mol/L 的EDTA 为试剂脱除原料中矿物质杂质的最佳工艺条件为室温、料液比1:60,搅拌处理3 次,每次12h;ASC 的最佳提取工艺条件为：提取温度不高于25℃,料液比1:60,醋酸浓度0.8mol/L,提取3 次,每次24h;PSC 的最佳提取工艺条件为：胃蛋白酶用量为鱼鳞原料质量的3.0%、醋酸浓度0.8mol/L、料液比1:30、提取温度4 ℃、提取2 次,每次24h。     

鱼皮胶原蛋白中透明质酸酶抑制肽的制备工艺优化

目的：高效提取胶原蛋白中的透明质酸酶抑制肽。方法：以剑鱼（Xiphias gladius）鱼皮为原料，使用胃蛋白酶提取酶溶性胶原蛋白并使用盐析法进行纯化，经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定胶原蛋白种类；通过单因素和响应面法优化透明质酸酶抑制肽的提取工艺。结果：使用胃蛋白酶提取的胶原蛋白为I型胶原，透明质酸酶抑制性胶原蛋白肽的优化提取条件为复合酶比（m_{胶原蛋白酶}∶m_蛋白酶）8∶2，酶解温度32 ℃，酶解时间6 h，加酶量6%。在此条件下胶原蛋白肽的透明质酸酶抑制率为42.35%，响应面模型拟合性好，透明质酸酶抑制率的预测值与实际值无显著差异（P>0.05）。结论：该工艺可应用于对剑鱼鱼皮中具有透明质酸酶抑制性的胶原蛋白肽的提取。     

响应面优化马鲛鱼鱼皮胶原蛋白的提取工艺

以马鲛鱼废弃鱼皮为材料,采用热水浸提法和酸提法进行胶原蛋白提取工艺的研究。热水浸提法以料液比、温度、时间为单因素,酸提法以料液比、酸浓度、时间为单因素,通过单因素试验和响应面分析对马鲛鱼鱼皮胶原蛋白提取进行最佳优化。结果显示,热水浸提法的最优条件为:料液比1∶75、浸提温度55℃、浸提时间6.5h,胶原蛋白提取率达到90.5%;酸提法最优条件为:料液比1∶70、乙酸浓度0.5mol/L、时间13.5h,胶原蛋白提取率达到68.0%。     

鲤鱼鱼皮和鱼骨酶溶性胶原蛋白的性质比较

以鲤鱼鱼皮和鱼骨为原料提取得到酶溶性胶原蛋白(PSC),对鱼皮PSC和鱼骨PSC的性质进行比较。电泳结果表明,鱼皮PSC和鱼骨PSC都属于Ⅰ型胶原;2种胶原蛋白中,脯氨酸和羟脯氨酸含量均低于牛皮酸溶性胶原蛋白;粘度测定的结果显示,鱼皮PSC的变性温度为28.1℃,鱼骨PSC的变性温度为30.0℃;差热分析的结果说明,鱼骨PSC的热稳定性高于鱼皮PSC,这与氨基酸分析和粘度分析的结果相一致;傅立叶红外光谱分析结果显示,鱼皮PSC和鱼骨PSC结构具有很大的相似性。     

鲢鱼鱼皮中酸溶性胶原蛋白提取工艺研究

以鲢鱼鱼皮为原料,通过单因素试验和正交试验对鲢鱼鱼皮中酸溶性胶原蛋白的提取工艺参数进行分析,并用AR-500动态流变仪对鲢鱼鱼皮中酸溶性胶原蛋白的热变性温度进行分析。结果表明:鲢鱼鱼皮原料中酸溶性胶原蛋白提取的最佳工艺条件为:以乙酸作为提取剂,乙酸浓度0.3 mol/L,料液比1∶60(g/m L),提取时间96 h;此胶原蛋白的热变性起始温度为32.31℃,峰值温度为34.82℃。     

鳕鱼皮胶原蛋白热水提取及其酶促水解的研究

以鳕鱼加工副产物鱼皮为原料,优化研究热水提取胶原蛋白的工艺条件。通过响应面得到最佳提取条件为温度80℃、时间9 h、料液比1∶17(mg/mL),响应面模型预测该条件下胶原蛋白得率为41.95%,验证实验得率为41.78%,与预测值接近。以热水提取的鳕鱼皮胶原蛋白为原料,通过响应面优化胶原酶水解胶原蛋白的工艺,得到最佳水解条件为酶底物比50.0 U/mg、底物浓度8.0 mg/mL、pH 5.5、水解温度33℃,响应面模型预测该条件下水解度为59.55%,验证实验实际水解度为58.32%,与预测值接近。     

响应面法优化鲫鱼鱼鳞酸溶性胶原蛋白提取工艺

在单因素实验基础上,采用响应面法对影响酸溶性胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)提取效果的3个因素即乙酸浓度、液料比和提取时间进行了优化,建立并分析了各因素与ASC得率关系的数学模型.结果表明:ASC最佳提取工艺条件为:乙酸浓度0.41mol/L,液料比12mL/g,提取时间54.81h,在此工艺条件下,ASC最高得率(以干基计)理论值为20.97%,而实测值可达20.68%,与理论预测值相比,相对误差为1.38%.ASC的相对溶解度在pH4时最大,当NaCl浓度低于3%(mg/mL)时,ASC的相对溶解度基本不变,当NaCl浓度大于3%(ms/mL)时,相对溶解度迅速降低,但都在40%以上.     

响应面法优化鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取工艺

为了提高鳕鱼皮中酸溶性胶原蛋白的提取率,选取提取液浓度、提取时间和料液比为影响因素,以胶原蛋白提取率为响应值,在单因素实验基础上,根据中心组合(Box-Behnken)实验设计原理,对鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取工艺进行优化。结果表明酸法提取胶原蛋白最佳工艺条件:醋酸浓度为0.47 mol/L、料液比为1∶33、提取时间为90.2 h。在此条件下提取所得酸溶性胶原蛋白提取率的理论值为37.92%,实验验证值为37.36%。相对误差为1.49%,说明采用响应面法优化得到的酸法提取鳕鱼皮胶原蛋白的工艺参数准确可靠,为鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取提供了一定的技术参考。     

罗非鱼皮硫酸皮肤素与胶原蛋白同时提取工艺优化及初步鉴定

针对鱼皮单独提取硫酸皮肤素造成资源利用率不高的问题,该研究以罗非鱼皮为原料,采用低温酶提酸促溶法同时提取硫酸皮肤素与胶原蛋白,通过单因素试验及响应面优化提取工艺,并利用醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶变换红外光谱等对罗非鱼皮硫酸皮肤素与胶原蛋白进行初步鉴定。结果表明,最佳提取工艺为中性蛋白酶加酶量5 930 U/g,提取时间25.8 h,提取温度28.5℃,料液比1∶40(g∶mL),在此条件下罗非鱼皮硫酸皮肤素得率为132.12 mg/100 g,胶原蛋白提取率为53.14%,二者分别具有典型的硫酸皮肤素及胶原蛋白特征。该研究为同时提取罗非鱼皮硫酸皮肤素与胶原蛋白提供了理论依据,为罗非鱼皮下脚料的高效利用提供了一种新途径。