鳕鱼皮中硫酸皮肤素的提取工艺

以鳕鱼皮为原料,采用木瓜蛋白酶和胰酶混合酶的方法,从鳕鱼皮中提取硫酸皮肤素,并通过乙醇沉淀的方法得到最终产品。研究料液比、酶添加量、p H、时间和温度等单因素对提取率的影响,并通过正交试验法对混合酶法提取硫酸皮肤素工艺条件进行优化。结果表明,混合酶提取硫酸皮肤素的最佳工艺为:料液比1∶25 mg/m L、酶添加量0.5%、p H8.5、提取时间22 h、提取温度50℃。采用此工艺条件提取率达到4.409%。     

鮟鱇鱼皮硫酸皮肤素的提取

采用复合酶解法提取鮟鱇鱼皮中硫酸皮肤素,通过正交试验法和响应面分析法对提取过程中各个条件进行选择与优化,确定最佳提取工艺为:鮟鱇鱼皮原料加入2.5%的复合酶[m(木瓜蛋白酶)∶m(胰酶)=1∶2],按液料比(mL:g)26∶1加入蒸馏水,76℃下提取19 h,3倍体积乙醇沉淀,冷冻干燥后得到硫酸皮肤素粗品。     

草鱼鱼鳞胶原蛋白提取及活性肽制备研究

以草鱼鱼鳞为原材料,探讨其胶原蛋白酸-酶组合提取工艺,并进一步研究相应抗氧化活性肽和血管紧张素转换酶抑制(ACEI)活性肽的制备方法。结果表明,草鱼鱼鳞胶原蛋白提取的最优工艺为:乙酸浓度0.3 mol/L、乙酸提取固液比1∶15(g/m L)条件下低温下提取24 h;离心后剩余残渣再按1∶10(g/m L)的比例浸入浓度为2%的胃蛋白酶溶液中低温下提取48 h;在该条件下鱼鳞胶原蛋白提取得率可达49.58%。以草鱼胶原蛋白粗提液为原料,制备抗氧化活性肽的最优工艺为:控制胶原蛋白浓度12.5 mg/m L,按10∶1(体积比)的比例加入浓度为4%的木瓜蛋白酶,60℃下酶解75 min,所得酶解液对ABTS~+自由基的抑制率可达45.7%;制备ACEI活性肽的最优工艺为:控制胶原蛋白浓度20 mg/m L,pH值调节为4.0,每10 m L加入6 000 U的酸性蛋白酶,37℃酶解3 h,所得酶解液对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制活性可达98.8%。本研究结果,有望为水产品加工副产物的资源化利用提供参考。     

木瓜蛋白酶提取草鱼皮胶原蛋白的工艺研究

采用木瓜蛋白酶从淡水草鱼鱼皮中提取胶原蛋白,通过正交实验对草鱼皮胶原蛋白提取工艺进行优化。结果表明,料液比为1g/20ml、酶与原料比为1∶50、在pH值为6.0、酶解36h时得到胶原蛋白提取率为13.98%。     

罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白的抗原反应特性分析

目的：确定罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白的抗原性,为进一步研究罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白生物相容性提供依据。方法：采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）对分离提取的罗非鱼皮胶原蛋白进行鉴定,共免疫ICR小鼠3 次。采用酶联免疫吸附反应（enzymelinked immune sorbent assay,ELISA）分别于每次免疫后第7天测定小鼠产生的总胶原蛋白抗体,并在第21天测定小鼠血清中内免疫球蛋白G（immunoglobulin G,IgG）、免疫球蛋白A（IgA）和免疫球蛋白M（IgM）的含量。结果：罗非鱼皮胶原蛋白样品是Ⅰ型胶原蛋白。所有经罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白免疫的小鼠体内均产生抗体,3 次免疫后罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白抗体质量浓度范围为160.50～164.25 μg/L,小鼠IgG、IgA和IgM的质量浓度范围分别为424.81～437.59 ng/mL、46.86～49.53 μg/mL、1.81～1.89 ng/mL。结论：罗非鱼皮Ⅰ型胶原蛋白对ICR小鼠呈现较弱的抗原性。     

木瓜蛋白酶提取草鱼皮胶原蛋白的工艺研究

采用木瓜蛋白酶从淡水草鱼鱼皮中提取胶原蛋白,通过正交实验对草鱼皮胶原蛋白提取工艺进行优化.结果表明,料液比为1g/20ml、酶与原料比为1∶50、在pH值为6.0、酶解36h时得到胶原蛋白提取率为13.98%.     

干制大鲵皮胶原蛋白提取工艺优化

为高效利用大鲵加工副产物大鲵皮,研究干制大鲵皮制备胶原蛋白的工艺条件。以胶原蛋白提取率为评价指标,通过单因素试验法,分别研究胃蛋白酶添加量、酶解pH和酶解时间对大鲵皮胶原蛋白提取率的影响。在单因素试验基础上,通过正交试验法进一步优化大鲵皮制备胶原蛋白工艺,确定最适工艺条件,即胃蛋白酶添加量6 000 U/g、酶解pH 2.0、酶解时间6 h,在此工艺条件下,大鲵皮胶原蛋白提取率为86.7%。紫外光谱、红外光谱扫描结果分析表明,用该法提取的干制大鲵皮胶原蛋白保留胶原蛋白较为完整的三股螺旋结构。     

碱性蛋白酶水解罗非鱼皮提取胶原蛋白肽的最佳条件研究

以罗非鱼皮为原料,采用酶法提取胶原蛋白肽,用正交实验对罗非鱼皮胶原蛋白肽的提取工艺进行优化,并测定了罗非鱼皮的基本组成成分和鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸组成.结果表明,碱性蛋白酶添加量为0.5%,固液比1:3,酶解时间为3 h,酶解温度为50℃时鱼皮胶原蛋白肽的提取率最高为13.5%.     

超声波辅助酶解提取鮟鱅鱼皮胶原蛋白的工艺优化

以鮟鱇鱼皮为原料,以料液比、超声时间、加酶量、酶解时间、酶解温度、提取pH为实验因素,用超声-风味酶法和超声-碱性酶法分别提取,并利用正交试验确定鮟鱇鱼皮胶原蛋白最佳提取工艺。结果表明,超声-风味酶法提取鮟鱇鱼皮胶原蛋白的最佳提取工艺条件为:超声时间80 min,酶解时间5 h,风味蛋白酶5000 U/g,酶解温度40℃,在此条件下胶原蛋白提取率为3.54%±0.21%;超声-碱性酶法提取鮟鱇鱼皮胶原蛋白的最佳提取工艺条件为:超声时间80 min,酶解时间6 h,碱性蛋白酶4000 U/g,酶解温度45℃,在此条件下胶原蛋白提取率为3.25%±0.68%,其中酶解时间比超声-风味酶法多1 h,但胶原蛋白提取率却不及超声-风味酶法。综上,选取超声-风味酶法提取鮟鱇鱼皮胶原蛋白。     

酶法提取人工养殖鲟鱼皮中胶原蛋白的工艺研究

胶原蛋白是一种具有生物功能的结构蛋白质,广泛应用于医药、化妆品和食品工业中.研究人工养殖鲟鱼皮胶原蛋白的提取工艺.采用酶法提取胶原蛋白,对提取胶原蛋白过程中酶的选择,酶的浓度,提取温度和提取时间对胶原蛋白提取率的影响进行详细的研究.正交试验表明.酶提鲟鱼皮中胶原蛋白的最佳工艺为:以胃蛋白酶-0.5 mol/L乙酸作为提取剂,酶量4000U/g,提取温度37℃,提取时间为6 h,固液比为1:4;在此条件下得胶原蛋白的提取率为70.15%.同时,测定人工养殖的鲟鱼皮胶原蛋白的最大紫外吸收波长为235 nm.     

罗非鱼皮胶原蛋白肽在润肤霜中的应用及性能评价

本研究采用酶解法从罗非鱼皮中提取胶原蛋白肽,并对其基本成分、分子量分布、抗氧化活性、保湿性以及紫外吸收性能进行考察和分析,同时将提取到的罗非鱼皮肽与羧甲基壳聚糖按不同比例进行复配,应用到润肤霜中并进行性能评价。结果表明:酶解法所提取的罗非鱼皮肽蛋白质含量为94.75%,罗非鱼皮肽中分子量小于1000 Da的组分高达82.27%,平均分子量为614 Da,对OH-、DPPH·、O₂-·、清除率的IC₅₀值分别为5.34、5.03、7.63 mg/mL,且具有良好的保湿效果,并对UBC和UVB波段的紫外线有吸收;所制备的润肤霜具有良好的保水和体外抗氧化活性以及防晒功效,其感官和理化指标符合国家润肤霜产品质量标准规定,其中RFS-4的综合效果最佳。通过裸鼠在体皮肤刺激性实验和抗皮肤光老化实验,对比不同组别裸鼠皮肤表征情况,结果表明:自制润肤霜安全无刺激并具有较好的抗皮肤光老化作用。本研究为罗非鱼皮肽在抗光老化日化产品的开发利用提供科学的理论基础。     

高压酶解法提取硫酸皮肤素工艺优化及其抗氧化活性分析

以猪肠粘膜提取肝素过程中透过液为原料,优化硫酸皮肤素提取工艺,探讨硫酸皮肤素的抗氧化能力。以硫酸皮肤素浓度为检测指标,筛选酶解最佳用酶,在单因素基础上通过Box-Behnken响应曲面试验优化高压酶解工艺,筛选最优大孔树脂,优化动态吸附洗脱条件纯化硫酸皮肤素,探究体外抗氧化活性。结果显示:在最佳酶解条件温度56 ℃,pH9.0,时间8.4 h,压力135 MPa下实测酶解硫酸皮肤素浓度为13.05 ng/mL,接近模型值;D312树脂以1.5 BV/h流速上样,4% NaOH 1.5 BV/h流速洗脱纯化效果最好,高效凝胶渗透色谱测定纯度达73.32%;硫酸皮肤素抗氧化能力与浓度呈正相关,DPPH自由基在2.4 mg/mL时清除率为36.29%,表现出一定清除能力,对于·OH 2.4 mg/mL时清除能力较强为68.2%,总还原力于2.4 mg/mL时为0.22。该研究为分离纯化硫酸皮肤素及其在抗氧化功能方面开发利用提供理论依据。     

糖基化对罗非鱼皮胶原蛋白肽热滞活性及结构特征的影响

为提高罗非鱼皮胶原蛋白肽作为绿色抗冻剂的实用性,采用湿法糖基化反应对其热滞活性进行改良。以糖基化接枝度为指标,利用正交试验对糖基化反应进行工艺优化,并对糖基化前后胶原蛋白肽的热滞活性及结构特征进行比较分析。结果显示,罗非鱼胶原蛋白肽葡萄糖糖基化最佳工艺为温度70℃、胶原蛋白肽质量浓度90 g/L、糖肽比4∶1、反应时间90 min,该条件下糖基化接枝度达(52.06±1.50)%;与胶原蛋白肽相比,糖基化产物的热滞活性上升了1.1℃,提高47.8%,冰晶含量降低29.94%,属于“极度活跃”抗冻肽;糖基化后胶原蛋白肽的质荷比由300～700变化为400～800,二级结构的大部分β-转角转变为β-折叠,且增加了羟基的含量。葡萄糖糖基化对罗非鱼皮胶原蛋白肽的热滞活性具有显著的增强作用,葡萄糖糖基化罗非鱼皮胶原蛋白肽具有开发成新型、高效绿色抗冻剂的潜力。     

罗非鱼骨胶原蛋白质的提取及其性质

为充分利用鱼片加工废弃物鱼骨中的胶原蛋白质,采用单因素以及正交实验法,研究胃蛋白酶在酸性介质条件下提取罗非鱼骨胶原蛋白质的最佳工艺,精制后的胶原蛋白质采用SDSPAGE电泳、紫外及傅立叶变换红外扫描,圆二色检测,氨基酸分析,热变性温度测定等方法 ,分析胶原蛋白质的理化性质。结果显示:乳酸溶液p H 2.6,温度30℃,料液比1∶30(g/mL),加酶量200U/g,提取时间24h,此工艺条件下的粗胶原蛋白质提取率达到70.28%,得率为12.76%;罗非鱼骨胶原蛋白质含有2条α链和1条β链,属于典型的I型胶原蛋白质;罗非鱼骨胶原蛋白质的主要氨基酸为甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、谷氨酸和丙氨酸;罗非鱼骨胶原蛋白质的热变性温度为34.5℃。研究表明,采用胃蛋白酶提取鱼骨胶原蛋白质,提取率和纯度均较高。     

金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白的提取工艺优化及基本特性

为提高金鲳鱼加工副产物——鱼皮的利用率,本研究在前期单因素实验的基础上,以加酶量、液料比和提取时间三个单因素建立模型,采用响应面法Box-Behnken设计实验,优化了胃蛋白酶法提取金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白(PSC)的提取工艺,并与酸溶性胶原蛋白(ASC)进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶变换红外光谱和差示扫描量热仪等基本理化特性的对比研究。结果表明,金鲳鱼鱼皮胶原蛋白的最佳提取工艺为:加酶量1.5%、液料比23∶1 m L/g、酶解时间27.5 h。此条件下通过实验验证得出,金鲳鱼鱼皮胶原蛋白实际提取率为64.68%,与响应面模型理论预测值65.17%基本一致;此外,本实验提取的PSC有较高热变性温度(30.44℃),与金鲳鱼皮ASC有相似的电泳性质和红外峰型,初步鉴定为I型胶原蛋白。该实验为金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原的提取提供了理论参考。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽酶解液的制备及其抗氧化特性研究

以罗非鱼皮为原料,采用直接酶法提取胶原蛋白肽,用正交试验对罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺进行优化,并测定了罗非鱼皮的基本组成成分和鱼皮胶原蛋白肽的氨基酸组成。结果表明,碱性蛋白酶添加量为0．5％,固液比1：3,酶解时间为3h,酶解温度50℃时鱼皮胶原蛋白肽的提取率最高为13．5％。并对产品胶原蛋白肽的抗氧化特性进行了分析。     

甜橙皮渣中柠檬苦素类似物提取工艺研究

以硫酸调节的酸性水为提取剂,采用单因素实验和正交实验探讨了料液比、提取温度、时间和提取剂pH对甜橙皮渣中柠檬苦素类似物提取的影响,并确定了最佳的工艺参数为温度65℃、时间1.5h、提取剂pH为4、料液比1∶12,在该工艺路线下提取柠檬苦素类似物的得率为1.19mg/g(鲜重)。     

罗非鱼头中硫酸软骨素的提取工艺研究

利用稀碱法对广西罗非鱼头中的硫酸软骨素进行提取工艺的研究,通过比较硫酸咔唑比色法和高效液相色谱法的分析结果,确定高效液相色谱法为硫酸软骨素的检测方法,以硫酸软骨素的得率为考察对象,对影响硫酸软骨素产品粗提率的因素进行单因素试验,并通过正交试验确定罗非鱼头中硫酸软骨素的最佳提取工艺。试验结果表明:提取硫酸软骨素的最佳工艺条件为NaOH浓度1%,料液比1∶5(g/ml),提取温度40℃,提取时间20h。在此条件下硫酸软骨素粗提率为1.67±0.15%。     

淡水鱼皮胶原蛋白提取优化工艺研究(Ⅱ)

采用正交实验研究了罗非鱼、鳙鱼、草鱼和鲫鱼4种淡水鱼皮胶原蛋白提取的优化工艺,同时利用eBioService系统分析了纯化胶原蛋白的分子质量和组成。实验结果表明,4种淡水鱼皮胶原蛋白的最佳提取工艺各不相同,在最佳提取条件下,其胶原蛋白提取率依次为36.57%、30.58%、35.14%、45.17%;而得率依次为8.93%、8.52%、9.03%、6.50%。eBio Service系统分析显示4种鱼皮所提取的胶原蛋白电泳区带都与I型胶原蛋白的特征相同,分子质量范围为110～130ku,纯度约为82%～85%。     

金鲳鱼内脏酸性蛋白酶的提取及应用研究

以金鲳鱼为原料,依次通过p H7.0的磷酸钠缓冲液浸提法和0%~55%硫酸铵分级沉淀法,从内脏中初步纯化出蛋白酶。探讨了温度和p H对酶活力的影响。蛋白粗酶分别应用于罗非鱼鱼皮明胶水解产物的制备、罗非鱼鱼鳞中提取胶原蛋白和虾壳中提取虾青素,同时与猪胃蛋白酶进行了比较。结果表明,金鲳鱼内脏蛋白酶的最适温度为25℃,最适p H为4.0。该酶应用于制备罗非鱼鱼皮明胶水解产物,其酶解能力强于猪胃蛋白酶;应用于提取罗非鱼鱼鳞胶原,胶原的得率为0.65%,不及猪胃蛋白酶;应用于提取虾壳中的虾青素,得到虾青素含量为(65.41±2.51)μg/g,其DPPH自由基清除率为(84.97±2.62)%,活性强于猪胃蛋白酶提取组。因此,研究结果为金鲳鱼内脏蛋白酶进一步利用提供了理论基础。