人参根腐病拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌活性

目的：从人参根际土壤中筛选出拮抗人参根腐病的菌株,初步研究其抑菌作用。方法：采用平板稀释法从人参根际土壤中分离获得菌株,以人参根腐病菌为靶标菌采用平板对峙法筛选出拮抗菌;通过形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析对筛选出的拮抗菌进行鉴定;检测拮抗菌无菌发酵液对根腐病菌菌丝生长、孢子萌发的影响,同时测定拮抗菌的抑菌谱。结果：分离获得一株对人参根腐病原菌拮抗作用较强的菌株HB-3,经鉴定菌株HB-3为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。菌株无菌发酵液对人参根腐病菌菌丝生长和孢子萌发均有显著抑制作用;菌株HB-3的抑菌谱较广,对根腐病菌、疫霉病菌、锈腐病菌、菌核病菌、灰霉病菌均有一定的抑菌活性。结论：筛选得到一株解淀粉芽孢杆菌HB-3,能显著抑制人参根腐病菌的生长,对人参根腐病有较强的生物防治效果。     

防治十字花科作物根肿病的油菜内生细菌分离与鉴定

为探寻对十字花科根肿病有生防作用的菌株,从油菜根内组织分离内生细菌,通过根肿菌孢子裂解、盆栽防病试验证明其功能,并经形态学、生理生化和16S RNA基因序列鉴定其分类地位。研究结果表明,从油菜品种KTl004和Y05-84-5-1根部分离出51株内生菌,其中YN201305和YN201310对十字花科根肿病菌有明显裂解和抑制作用。盆栽试验表明,应用浓度10^7 CFU／mL的菌液,在播种时和播种后每间隔5d浇灌1次,共浇灌4次。45d苗龄调查结果,二者对大白菜品种鸿源83的根肿病防治效果分别达65．12％和77．92％。经鉴定,YN201305为短小芽孢杆菌,YN201310为枯草芽孢杆菌。     

烟草几种重要病害拮抗菌的筛选

从山东滕州,临沂等县（市）的烟草,番茄和辣椒根际采集土壤样本１５份,经内分离纯化获得细菌１０２株,放线菌５５株。以烟草赤星病菌,野火病菌和青枯病菌等为力,对１５７个菌株进行平板对峙培养法抑菌测定,分别筛选出和对１种病原真菌和病原细菌有拮抗活性的细菌３３株和放线菌２２株。     

烟草黑胫病拮抗放线菌的分离与筛选

从堆沤过圈肥的土壤中采集样品,用平板法对所采样品进行菌株分离、纯化培养,共获得原始放线菌101株,再通过室内拮抗试验,从随机28株试验菌株中初步获得16株具有一定拮抗作用的菌株。对拮抗效果较好的6株菌株以及抑菌圈较小、但其菌落较大的A15菌株进一步做盆栽防治试验。结果表明,A6的防治效果最好,达到55.26%,其它菌株效果一般。     

烟草叶围细菌的分离及其对Alternaria alternata的拮抗作用

分离到烟草叶围细菌136株,通过对峙培养实验筛选出对烟草赤星病菌A.alternata有较强拮抗活性的9个菌株.离体叶片生防测定实验表明,9株细菌均能不同程度地减轻烟草赤星病的发生.其中菌株Tpb88具有较强和稳定的拮抗作用,无菌滤液实验表明,叶围细菌Tpb88在一定浓度范围内能有效抑制A.alternata菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长,且浓度越高,抑制能力越强,结果表明Tpb88对烟草赤星病菌的拮抗机制可能为抗菌物质的产生.     

抑制油菜菌核萌发的真菌分离及其生防研究初报

从武汉地区种植油菜的灰潮土土壤中分离得到三种真菌,分别是短帚霉（Scopulariopsis brevicaulis）、哈茨木霉菌（Trichoderma harzianum）和棘孢曲霉（Aspergillus aculeatus）。25℃共培养2周后发现,三种真菌的菌株对油菜核盘菌菌核的致死率分别为95.6%、78.9%和83.3%。用哈茨木霉菌Tri-1和棘孢曲霉Asp-1制作而成的生防制剂用于盆栽试验,结果表明盆栽芝麻（旱地作物）和水稻（水田作物）种植60d后,土壤中埋植的菌核萌发率分别下降27.3%和38.0%;继而后作油菜60d后,重新埋植的菌核萌发率分别下降16.1%和18.3%。     

胡麻枯萎病生防芽孢杆菌筛选及抑菌效果研究

为筛选拮抗胡麻枯萎病菌的生防微生物,对采自我国不同省份胡麻根围土壤进行了细菌分离和拮抗菌筛选。根据土样中151株病原菌尖孢镰刀菌[Fusarium oxysporum f.sp.lini（FOL）]对峙培养获得21株拮抗芽孢杆菌,其中XJ2-20拮抗效果最好,盆栽实验的胡麻枯萎病防效可达56.3%,经鉴定为枯草芽孢杆菌。菌株XJ2-20对151株镰刀菌株的抑菌率最高可达64.5%,其发酵滤液可抑制尖孢镰刀菌生长及抑制分生孢子萌发。菌株XJ2-20的抑菌活性物质的最佳硫酸铵沉淀浓度为70%,活性物质对热和胰蛋白酶敏感,最适pH为7。其最佳发酵条件为LB液体培养基（初始pH 7.2）、每300mL三角瓶装液量50～100mL,29℃培养5d。     

一株海洋梅久兰链霉菌的分离鉴定及其抗真菌作用研究

采用梯度稀释分离法从连云港海域海水、海泥、近海土壤、海洋动物以及海洋植物样品中,分离出海洋放线菌22株,采用平板对峙培养法测定不同放线菌菌株的抑菌作用,有9个放线菌菌株有抑菌作用。其中ZW-1菌株的抑制活性最强,该菌株及其发酵液对供试的小麦雪腐镰刀菌(Fusarium nivale)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、斑点落叶病菌(Alternaria alternata)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、菠菜早疫病菌(Alternaria solani)、玉米圆斑病菌(Helminthosporium carbonum)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum)等8种植物病原真菌都有较强的抑制作用,可导致病原真菌菌丝细胞壁膨大,原生质体收缩,同时可抑制菠菜早疫病菌(A. solani)分生孢子的萌发和芽管的伸长。通过培养特性、细胞形态观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析,将海洋放线菌ZW-1菌株鉴定为梅久兰链霉菌(Streptomyces mediolani)。     

云南省烟草赤星病菌致病力分化及生物防治研究

从省内烟草种植区分离到烟草赤星病菌39株,利用离体叶片悬滴法,在感病品种RG17上进行致病力分化测定。结果表明,上述病菌的致病力按照病情指数可分为4种类型：即强、中、弱、不致病。从上述代表不同致病力的菌株中选取7株菌,采用对峙法与18株木霉菌对峙培养,从中筛选出一株对赤星病菌具极强拮抗作用的菌株TV-1。TV-1与赤星病菌的孢子混和液在PDA平板上的孢子萌发试验表明,TV-1不能抑制病菌孢子的萌发但能抑制其芽管的伸长。用TV-1制成的菌剂进行离体叶片、烟草苗期、大田期防效测定。结果表明：该菌剂为10^5个／mL时,具有抑制离体叶片病斑扩展的作用;浓度达10^7个／mL时,可明显防止病斑出现;同时它还能促进烟苗生长,其中苗期施用量,TV-1菌剂：营养土=1：15,促生效果显;苗期防猝倒病与对照相比防效达86．5％;大田营养袋亩施颗粒剂31kg、62kg,叶面喷施孢子液剂10^4个／mL4次,与对照相比对赤星病的防效分别高达60．57％、70．53％。     

荧光假单胞菌YG-1对烟草根黑腐病菌的体外拮抗

为丰富烟草根黑腐病菌高效拮抗菌资源,从玉溪烟草种植区根际土壤中分离烟草根黑腐病高效拮抗菌,结合生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定高效拮抗菌,测定菌株发酵液挥发性物质及发酵液粗提物对根黑腐病菌的拮抗活性。结果表明,筛选得到的12株拮抗菌中YG-1表现出最强的拮抗活性,经生理生化特性和16S rDNA序列分析鉴定为荧光假单胞菌（Pseudomonas fluroescens）。菌株YG-1发酵液挥发性物质可有效抑制烟草根黑腐病菌的生长,使菌丝扭曲畸形,并且降低产孢量,经GC-TOF-MS测定,YG-1发酵液含有酸、醛、酯以及一些含硫化合物,其中酸类物质和含硫化合物抑菌效果强。菌株YG-1发酵液粗提物能破坏烟草根黑腐病菌孢子质膜,当粗提物质浓度为0.25 mg/mL时,孢子失膜率达55.42%,同时检测到有明显的离子和核酸渗漏。拮抗菌YG-1具备开发为生防菌剂的潜力。     

湖南省油菜品种的种传链格孢菌检测

2012年在湖南醴陵市油菜黑霉病果上经镜检和病种分离检出链格孢（Alternaria spp．）,其后检测了36个品种的种子带菌情况,华湘油12号带菌率最高（51％）。镜检结果发现链格孢菌有2种,rDNA-ITS序列分析表明,它们分别是芸薹生链格孢（A．brassicicola）和芸薹链格孢（A．brassicae）;未检测到萝卜链格孢（A．raphani）。36个品种中芸薹生链格孢分离频率最高的是华湘油12号（66％）,且全为芸薹生链格孢,而芸薹链格孢以常油杂61为最高（15％）,且全为芸薹链格孢。禾盛油868种子上未检测到链格孢菌。     

芸薹根肿菌生理小种鉴别方法研究进展

本文综述了芸薹根肿菌生理小种鉴别方法和国际通用的根肿病生理小种鉴别系统及鉴别寄主,详细介绍了＂Williams＂和＂ECD＂根肿病鉴别系统的优缺点及适用范围,分析了分子生物学鉴定根肿病生理小种的技术,以期为抗病品种选育和持续控制根肿病提供准确的抗病鉴定方法。     

外源ABA和BR在提高油菜幼苗耐渍性中的作用

以甘蓝型油菜中双9号为植物材料,应用外源脱落酸（ABA）和油菜素内酯（BR）处理渍水胁迫的油菜幼苗,研究其在缓解油菜幼苗渍水伤害中的作用。结果显示,短期（0～12d）渍水处理可促进油菜生长,长期（18d）渍水处理则抑制油菜生长;叶面喷施ABA（75.67μmol/L）和BR（0.21μmol/L）可有效缓解长期渍水胁迫对油菜幼苗的伤害作用,干物质积累量较单纯渍水处理增加19.52%和26.22%;外源ABA和BR处理还可延缓叶绿素含量的降低,提高叶片光合能力;提高抗氧化酶（SOD、POD和CAT）活性,降低膜脂过氧化（MDA含量降低）;增加叶片可溶性糖含量。说明外源ABA和BR处理通过促进渍水胁迫下油菜幼苗光合作用,提高抗氧化酶活性,提高渗透调节物质含量来增强植株抗渍能力。     

氮素形态对冬油菜幼苗生长的影响

通过营养液培养试验研究了硝态氮（NO3-）和铵态氮（NH4＋）不同搭配比例对甘蓝型油菜中双9号幼苗生长的影响。试验设5个处理：NO3-∶NH4＋分别为100∶0（N1）、75∶25（N2）、50∶50（N3）、25∶75（N4）和0∶100（N5）。结果发现,与N1处理相比,油菜幼苗干重、根长、根表面积、根体积、氮（N）含量及N积累量、硝酸还原酶活性等指标均以N2处理最高,之后随着营养液中NH4＋比例的升高而显著降低。而光合色素含量、铁（Fe）和锌（Zn）浓度却随营养液中NH4＋的添加而显著升高,锰（Mn）浓度随NH4＋的添加而显著降低。说明中双9号属于喜硝态氮的作物,在供应NO3-时搭配适量的NH4＋更有利于其生长,但是当NH4＋比例超过50%时,则会显著抑制其生长。     

甘蓝型油菜EMS突变体库构建及抗除草剂突变体筛选

为了利用诱变技术快速创造变异类型丰富的油菜新材料用于油菜遗传改良，分别用0．4％、0．8％、1．O％和1．2％的EMS（甲基磺酸乙酯）溶液对甘蓝型油菜中双9号种子进行诱变处理。结果发现：（1）1．0％的EMS溶液是处理中双9号干种子的最适浓度，4种不同浓度处理M：表型变异率依次为11．26％、14．82％、27．19％和12．38％；（2）EMS诱变具有器官特异性；（3）M：突变体库中筛选到3株苯磺隆抗性突变体，突变率约为10^-4。现已创建了包括子叶、叶片、花器、株型、角果等多器官变异类型的突变体库，为油菜遗传研究提供了丰富的种质资源。     

棉田免耕套栽油菜施肥效果及肥料适宜用量研究

在棉田免耕套栽条件下,研究了油菜氮磷钾（NPK）肥施用效果及肥料适宜用量。结果表明,合理施用氮磷钾肥促进了油菜的营养生长和生殖生长,从而显著提高了油菜的产量和经济效益,N、P、K三要素增产效果依次为：N〉P〉K。通过对肥料效应模型的筛选,得出在试验条件下,油菜氮（N）、磷（P2O5）、钾（K2O）的适宜推荐用量分别为205kg／hm^2、76kg／hm^2、35kg／hm^2。