Re/99Tcm(CO)3-EPBI与Aβ(1～40)结合能力的测定及生物分布

为发展锝-99m标记的阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)早期诊断显像药物,在荧光测定法基础上,建立了体外荧光法测定羰基铼配合物与Aβ_(1～40)淀粉样纤维结合的解离常数K_d的方法.同时,合成了配体2-(1-乙基苯并咪唑)吡啶(EPBI)及其铼的配合物Re(CO)_3Cl(EPBI),测定后者与体外缠结Aβ_(1～40)结合的解离常数Kd;采用直接标记法制备EPBI的[~(99)Tc~m(CO)_3]~+配合物,并研究配合物[~(99)Tc~m (CO)_3]~+-EPBI的理化性质及生物分布.结果表明,Re(CO)_3Cl(EPBI)与Aβ_(1～40)结合的解离常数K_d=13.3 μmol/L;正常小鼠体内生物分布研究表明,化合物[~(99)Tc~m (CO)_3]~+-EPBI的脑初始(2 min内)摄取值为(0.63±0.17)%ID/g(n=3),在脑内清除较快,120 min时,摄取值为(0.27±0.03)%ID/g(n=3).     

Re/99Tcm(CO)3+黄酮复合物的合成及其与Aβ斑块的结合特性

为研制新型⁹⁹Tc^m(CO)₃⁺标记的黄酮类Aβ显像剂,设计合成了同型Re/⁹⁹Tc^m(CO)₃⁺黄酮类衍生物,用荧光法研究了Re(CO)₃⁺黄酮类衍生物在体外与Aβ斑块的结合特性,并初步观察了其在昆明小鼠体内的生物分布。结果表明,Re(CO)₃⁺黄酮类衍生物的亲和常数(K_d=5.43 nmol/L)比放射性碘标记的黄酮类衍生物高。正常小鼠的动物分布结果表明,2 min内脑初始摄取较高（0.46±0.23 %ID/g）,且清除较快（120 min时为0.13±0.04 %ID/g)。以上结果表明,⁹⁹Tc^m(CO)₃⁺黄酮类衍生物有进一步研究的价值。     

[99TcmN(PNP)]2+标记葡萄糖硫酮类衍生物混配配合物的研究

为研究新的99TcmN核心标记的心肌和肿瘤显像药物,选用自行合成的二硫化碳-葡萄糖(硫酮类)衍生物Ln(L1～L5)制备一系列带有葡萄糖衍生物基团的新型[99Tcm (DTC)(PNP)]+类配合物,经TLC和HPLC检测,配合物的放射化学纯度均大于90%.小鼠生物分布实验表明,99TcmN(PNP)Ln(L1～L5)系列配合物在正常小鼠体内初始的放射性摄取主要分布于心肌、肝、肺、肾等脏器,并且30 min内各脏器均可迅速清除.初步的荷EMT-6鼠生物分布实验显示,99TcmN(PNP)L2在肿瘤中放射性摄取不高,30 min时为(0.39±0.03)%ID/g,其它组织的放射性摄取与正常小鼠类似.     

99Tcm(CO)3-CNRGD的制备及生物学评价

合成了含异腈基团的多肽偶联物（CNRGD）,并用［⁹⁹Tc^m(CO)₃(H₂O)₃］⁺标记,得到具有与整合素α_vβ₃受体多结合位点的⁹⁹Tc^m(CO)₃-CNRGD,并对其进行了体内外生物学评价。结果表明,在优化的标记条件下,⁹⁹Tc^m(CO)₃-CNRGD的标记率达到77%,纯化后,标记物放射化学纯度大于96%。体外稳定性实验显示其具有很高的稳定性;脂水分配系数显示其具有较好的脂溶性。正常小鼠体内分布显示,⁹⁹Tc^m(CO)₃-CNRGD在血液中清除较快,主要通过肝肾代谢。荷MCF-7人乳腺癌裸鼠体内分布显示,注射1、4h后,标记物在肿瘤部位的摄取值达(2.38±0.37)%ID/g和(1.57±0.21)%ID/g,瘤/血比分别达0.71±0.09、1.15±0.15,表明该标记物在肿瘤细胞中有一定的摄取和较长的滞留时间。     

[188Re(CO)3L]n新型配合物的小鼠体内生物分布

选择了3种三齿配体(二(2-吡啶甲基)-胺基)-乙胺(L1NH2)、(二(2-吡啶甲基)-氨基)-乙酸(L2H)和((6-胺基-N-叔丁氧基羰基-己基)-吡啶-2-甲基氨基)-乙酸(L3NH2),用于设计合成新的以 fac-[188Re(CO)3] 为核心的放射性药物.3种配体在低浓度(10-5 mol/L)的条件下,反应时间小于60 min,标记率可达90%以上,放射化学纯度大于92%;3种标记物的体外稳定性均很高,标记后24 h内基本不分解.生物分布结果表明,配合物均能较快地从血液和多数的组织器官中清除,主要通过排泄系统代谢,并初步探讨了这3个配合物在小鼠体内的生物分布行为可能与它们的脂水分配系数lg P有关.lg P值(-0.36)高的配合物[188Re(CO)3L3NH2], 24 h时在各个器官中放射性保留均高于其它2个配合物,但可能不是唯一的影响因素.总的来说,3个配基是用fac-[188Re(H2O)3(CO)3] 标记的比较理想的双功能螯合剂.     

99Tcm(CO)3-有机膦配合物的制备及其生物分布

以[99Tcm(OH2)3(CO)3] 为前体,对两种有机膦配体(PPh3和Tetrofosmin)进行了99Tcm(CO)3核配合物的制备,得到了放化纯度大于95%的99Tcm(CO)3-有机膦配合物;并进行了其电性、稳定性及小鼠生物分布的初步研究.99Tcm(I)(CO)3-tetrofosmin的小鼠体内分布结果表明,配合物主要通过肝脏系统进行代谢,血摄取量较低,血池清除较快.     

[99Tcm(CO)3(CHI)3]+的制备及其生物分布

以99TcmO4-淋洗液为起始物,在低压条件下制备了中间体[99Tcm(CO)3(H2O)3]+,并通过配体交换反应得到放化纯度大于90%的[99Tcm(CO)3(CHI)3]+配合物.该配合物在室温下放置6 h以上放化纯度无明显变化.在正常昆明小鼠体内的生物分布实验结果表明,[99Tcm(CO)3(CHI)3]+具有一定的心肌摄取,且滞留也相当好;在注射后5 min和60 min时的心肌摄取值分别为(13.59±2.12)%ID/g和(13.87±1.54)%ID/g.尽管该配合物的肝和肺本底摄取较高,但是与99TcmN-CHI和99Tcm-CHI相比,羰基锝中心核的引入还是大大改善了配合物用于心肌显像的性能,为发展新的心肌显像剂提供了一种新思路.     

99Tcm(CO)+3核心标记的邻二氮杂菲类化合物的理化性质和生物分布

确定化合物可以通过血脑屏障进入脑中并迅速从脑中清除,是判断药物能否作为阿尔茨海默病显像剂的首要条件.为发展99Tcm标记的阿尔茨海默病早期显像诊断药物,在前期研究与DNA分子结合的荧光探针钌金属配合物的基础上,设计合成了2个邻二氮杂菲类配体2-(9-蒽基)-1氢-咪唑[4, 5-f][1, 10]邻菲咯啉(2-(9-anthryl)-1H-imidazo[4, 5-f][1, 10]phenanthroline, aip)和2-(9-蒽基)-1乙基-咪唑[4, 5-f][1, 10]邻菲咯啉(2-(9-anthryl)-1ethyl-imidazo[4, 5-f][1, 10]phenanthroline, aeip),并与99Tcm (CO)+3进行标记.采用R-HPLC、纸电泳等方法研究标记产物的理化性质.正常小鼠体内生物分布研究表明,2种化合物99Tcm (CO)3+-aip和99Tcm (CO)3+-aeip均有一定的脑初始摄取,注射后2 min,前者为(1.028±0.096)%ID/g;后者为(1.191±0 197)%ID/g,因此标记物具有进一步研究的价值.     

123I和99Tcm标记的吲哚类σ2受体放射性示踪剂的设计、稳定化合物的合成及体外生物评价

设计了~(123)I和~(99)Tc~m标记的吲哚类σ_2受体肿瘤放射性示踪剂,合成了其稳定化合物 (Indole-I和Indole-MAMA-Re) 和标记前体(Indole-MAMA).体外受体结合分析结果表明,化合物Indole-I对σ1和σ_2受体的抑制常数K_i值分别为(0.574±0.355) μmol/L和(0.162±0.030) μmol/L(n=3),Indole-MAMA-Re对σ1和σ_2受体的抑制常数K_i值分别为(3.75±2.22) μmol/L和(7.83±4.87) μmol/L(n=3).成功制备了~(99)Tc~m-Indole-MAMA,纯化后经高效液相色谱法(HPLC)分析其放化纯大于90%.今后可在本文化合物的基础上通过结构优化,设计合成对σ_2受体具有高亲和力和选择性的吲哚类SPECT肿瘤显像剂.     

乏氧显像剂99Tcm-HL91衍生物的制备及其活性评价

为寻找性能优良的乏氧显像剂,设计合成了2种HL91衍生物4, 9-二氮-3, 10-二甲基十二烷-2, 11-二酮肟 (TMBAO)和4, 9-二氮-3, 10-二氧基十二烷-2, 11-二酮肟 (H2Pab),并进行99Tcm标记.与已知乏氧显像剂99Tcm-HL91进行比较,并对新标记物的体内外活性进行了评价.乏氧细胞实验结果表明:与99Tcm-HL91相比,99Tcm-TMBAO和99Tcm-H2Pab具有一定的乏氧选择性;荷瘤小鼠体内生物分布数据显示,尽管两种新的99Tcm标记物在肝脏的摄取比99Tcm-HL91低,但其乏氧选择性也同时显著降低.     

铼羰基化合物的制备及其在小鼠体内的生物分布

选择三齿配基L₁，L₂，L₃及L₄（L₁ =组氨酸, L₂ =次氮基三乙酸，L₃= 2-吡啶甲基胺 N, N-二乙酸，L₄ =二（2-吡啶甲基）-胺）作为双功能螯合剂可以连接受体、多肽、蛋白等靶向分子，用于设计合成新的以[¹⁸⁸Re(CO)₃]⁺为核心的放射性药物。标记实验表明，4个配基的浓度在1×10^-5～1×10^-4mol/L，反应时间为30min时，放射化学产率大于90％，用HPLC分离后，放射化学纯度大于95％。电泳实验表明，配合物显示不同的价态。稳定性实验表明，4种配合物在体外稳定，24h几乎不发生分解。组氨酸与半胱氨酸竞争实验说明，24h内4个配合物很难发生配基与半胱氨酸的交换反应，而在组氨酸溶液中，除L₂形成的配合物相对来说不稳定外，其它3个较稳定。是否在体内有很高的稳定性，还需实验进一步证实。小鼠动物试验表明，4个配合物均能较快地从血液和多数组织器官中清除，主要在肝和肾中浓集，是较理想的双功能螯合剂。     

99Tcm-DTPA-DG标记物的制备

为了在合成二乙三胺五乙酸-脱氧葡萄糖（DTPA-DG）基础上，制备⁹⁹Tc^m-DTPA-DG标记物，以SnCl₂·2H₂O为还原剂，还原⁹⁹Tc^mO^-₄并与DTPA-DG形成⁹⁹Tc^m-DTPA-DG标记物。进行了DTPA-DG用量、SnCl₂·2H₂O用量、反应介质pH值、反应温度等对标记率的影响实验。结果表明，25mg DTPA-DG ，500μg SnCl₂·2H₂O，pH=6，加入Na⁹⁹Tc^mO⁴淋洗液0.5~4mL，在25℃以上放置30min或沸水浴反应10min时，用9g/L NaCl和丙酮作展开剂纸层析法鉴定标记物,放射化学纯度>99%。标记物在室温放置6h，放射化学纯度仍达98.6%。⁹⁹Tc^m-DTPA-DG标记率高，标记物的体外稳定性好，操作简便，便于临床应用。     

Pu(OH)4(am)与碳酸根的配位行为研究

为了解在惰气环境Pu(OH)_4(am)与碳酸盐溶液中HCO^-₃，CO^2-₃的配位行为，考察了放置时间对Pu总浓度的影响；同时也考察了pH值、碳酸根总浓度变化对碳酸盐溶液中Pu的主要存在形态及溶解总浓度的影响。实验结果表明，HCO^-₃离子与Pu(OH)_4(am)生成[Pu(OH)₄(HCO₃)₂]^2-（lg K=-2.61±0.18, lgβ=54.25±0.18）或[Pu(OH)₂(CO₃)₂]^2-（lgK=-2.61±0.18, lgβ=46.91±0.18）；CO^2-₃离子与Pu(OH)_4(am）生成[Pu(OH)₄(CO₃)₂]^4-（lgK=-3.52±0.11, lgβ=53.33±0.11）。可能的配位反应方程式为： Pu(OH)_4(am)+2HCO^-₃ = [Pu(OH)₄(HCO₃)₂]^2-, Pu(OH)_4(am)+2HCO^-₃ =[Pu(OH)₂(CO₃)₂]^2-+2H₂O, Pu(OH)_4(am)+2CO^2-₃=[Pu(OH)₄(CO₃)₂]^4-。     

117Snm(113Sn)(Ⅳ)-四（4-磺酸苯基）卟啉的制备

为了研制对辐射增敏的、肿瘤治疗用的117Snm放射性药物，研究了117Snm(113Sn)(Ⅳ)与四（4 磺酸苯基）卟啉（TPPS4）的反应条件和该配合物的体外稳定性及其化学计量组成。研究结果表明，用天然丰度的金属锡粒作靶料，在中子注量率为4×1013cm-2·s-1的条件下，照射90h，可以获得比活度为013GBq/g的117Snm和616MBq/g的113Sn；在pH为2~4、沸水浴中反应30min时，117Snm(113Sn)(Ⅳ) TPPS4标记率大于95%。该放射性配合物有良好的稳定性和抗生理盐水稀释性能，室温下放置48h或用生理盐水稀释5~15倍，其放化纯度基本不变；该配合物中Sn(117Snm(113Sn))与TPPS4的配位比为1∶1。     

99Tcm-EGF的直接法合成及其在荷C6动物体内生物学分布

探索用⁹⁹Tc^m直接标记表皮生长因子（EGF）的方法并研究其在荷C6动物体内的生物学分布特点。巯基乙醇（20 mL/L）10 μL还原EGF（2.5 μg）;含0.5 μg SnCl2的亚甲基二膦酸盐（MDP）溶液将还原高价锝使之与还原EGF的巯基结合,放化纯度大于95%,标记物稳定性较好,在6 h内放化纯度大于95%。通过内皮细胞培养进行⁹⁹Tc^m-EGF的生物活性鉴定,显示EGF在锝标记前后生物学活性未见明显改变（P＞0.05）。⁹⁹Tc^m -EGF在荷瘤鼠体内生物学分布显示肝、脾、肾等组织放射性分布较高,瘤区放射性较高,而脑组织最低,4 h瘤与正常组织放射性摄取比值(Tumor/Normal Tissue)为2.25, SPECT全身显像显示瘤组织放射性核素浓聚。因此直接合成的⁹⁹Tc^m-EGF可望成为特异性诊断高表达EGFR肿瘤的SPECT分子显像剂。     

Study of biodistribution properties of a new myocardial imaging agent [99mTc(N)(PNP5)(DBODC)]+

^99Tc^mN DBODC5 for intravenous injection was prepared. The labelling yield was 95.0%±0.52%. Sixteen New Zealand rabbits were involved and planar gamma imaging was performed at 10 time point after injection of ⁹⁹Tc^mN DBODC5. The radioactivity channes of organs were calculated by regions of interest (ROI) analysis. The 16 rabbits were divided into 4 groups and were sacrificed at 30, 60, 120, and 180 min after injection respectively. The activity for all excised organs were measured by γ well counting for calculating radiouptake. Myocardial uptake for 99Tcm N DBODC5 is high. Though myocardial uptake was lower than 99Tcm MIBI, the liver clearance for ⁹⁹Tc^mN DBODC5 was more rapid than that of ⁹⁹Tc^m MIBI. As early as 30 min after injection, ⁹⁹Tc^mNDBODC5 heart to liver ratio is 0.98±0.52 versus 0.56±0.19 for ^99Tc^m MIBI (P<0.01). At 60 min post injection, ^99Tc^mNDBODC5 heart to liver ratio improved to the peak value (1.18±0.57), compared with 0.71±0.29 for ⁹⁹Tc^m MIBI, P<0.01. After 60 min, the heart to liver ratio of ⁹⁹Tcm N DBODC5 was keeping at a high level until 180 min. ⁹⁹Tc^m N DBODC5 exhibited rapid lung clearance, similar to that of ⁹⁹Tc^m MIBI. The biodistribution in the isolated organs demonstrated the same trend. The rapid ⁹⁹Tc^m N DBODC5 liver clearance may allow the earlier imaging, and overcome the photon scatter from the liver with high activity which interfered the inferoapical wall in myocardial images. ⁹⁹Tc^m N DBODC5 is a promising new myocardial perfusion imaging agent with superior biodistribution properties.     

N-甲基甲异羟肟酸的合成及其与Np(Ⅳ)、Pu(Ⅳ)配合物稳定常数的测定

以甲酸乙酯和N-甲基盐酸羟胺为主要原料，在乙醇-水体系中合成N-甲基甲异羟肟酸（NMFHA），并通过元素分析、红外光谱、质谱分析和核磁共振波谱等方法对其结构进行表征。TTA萃取法测定结果表明，在1.0mol/LHNO₃体系中，Np(Ⅳ)、Pu(Ⅳ)与NMFHA形成稳定的1∶2的配合物，其累积稳定常数分别为：β₁(Np(Ⅳ))＝8.83×10⁹，β₂(Np(Ⅳ))＝1.01×10¹⁹；β₁(Pu(Ⅳ))=7.78×10¹⁰，β₂(Pu(Ⅳ))＝5.80×10¹⁹。     

Ed=20keV2H(d,γ)4He反应截面测量

对E_d=20keV的氘束入射到D-Ti靶上由²H（d,γ）⁴He反应产生的γ射线及由²H（d,p）³H反应产生的质子进行测量，得到分支比Γγ/Γp为(1.06±0.42)×10^-7及²H（d,γ）⁴He反应截面σ的上限值为(2.9±1.2)×10^-39m²。     

含生物素的双功能螯合剂合成及[99Tcm(CO)3(H2O)3]+标记

设计合成了一种新的用于生物素偶联的双功能螯合剂N-α-(2-皮考基)-N-ε-D-生物素基-L- 赖氨酸甲酯( PLB )，并完成其Re(CO)3 PLB配合物的合成及化学结构的表征。[99Tc m(CO)3(H2O)3]+ 的标记条件研究表明，PLB配体浓度在10μmol/L以上，pH在正常生理值7.4左右，于95℃加热30min，标记物的放化纯度大于95％，比活度达37～55.5TBq/mmol。