高分辨质谱库和特征组分诊断比值法快速筛查鉴别食品中非法添加黄芪

目的：建立了一种基于高分辨质谱库和特征组分诊断比值法筛查鉴别食品中非法添加黄芪的方法。方法：采用高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱仪构建黄芪4种特征组分高分辨质谱库进行初步筛查,结合特征组分诊断比值法,对不同产地和采摘时间的黄芪中药材模拟的配制酒、代用茶和饮料样品进行特征组分分析,以不同基质组间无显著性差异的特征组分峰面积诊断比值作为确证指标。结果：建立了黄芪4种特征组分高分辨质谱库,确定了黄芪中不同基质组间无显著性差异的1组特征组分峰面积诊断比值DR1 (毛蕊异黄酮苷/芒柄花苷),诊断比值非异常值范围分别1.86-2.71;并对实际样品配制酒、代用茶及饮料进行分析,1批次配制酒样品与黄芪4种特征组分高分辨质谱库匹配一致,且特征组分诊断比值DR1为1.98,在规定区间内,推断该配制酒样品中加入了黄芪中药材。结论：该方法准确、快捷、稳定性好,可快速鉴别食品中非法添加黄芪,为打击食品中非法添加黄芪违法行为提供技术支撑。     

基于高分辨质谱库和特征组分诊断比值法鉴别配制酒和代用茶中非法添加补骨脂

目的:建立一种基于高分辨质谱库筛查和特征比值法确证配制酒和代用茶中非法添加补骨脂的高效液相色谱检测方法。方法:采用高效液相色谱—四极杆—飞行时间质谱仪建立补骨脂中药材特征组分筛查库,结合液相特征组分诊断比值法,对不同采摘时间和产地的共20批次补骨脂模拟的补骨脂配制酒、代用茶样品进行特征组分分析,从13种特征成分中选出2组受产地、采摘时间、加工工艺等影响较小,不同基质组间无显著性差异的特征组分峰面积诊断比值作为确证指标。结果:建立了补骨脂中药材特征组分筛查库,选定出2组特征组分CoryliA/补骨脂酚和补骨脂素/异补骨脂素,绘制箱图确定CoryliA/补骨脂酚的非异常值范围为0.061~0.115,补骨脂素/异补骨脂非异常值范围为1.14~1.68。通过市售样品对建立的筛查和确证方法进行验证。结论:该方法简单高效,适用于配制酒和代用茶中非法添加补骨脂的检测。     

基于特征组分诊断比值法的饮料与炮制酒中刺五加中药材的鉴定

目的 建立基于特征组分诊断比值法的饮料与炮制酒中非法添加刺五加中药材的分析鉴定方法。方法 优化刺五加中药材的特征组分的高效液相色谱测定条件,对不同产地刺五加中药材模拟的刺五加配制酒、代用茶、饮料样品进行检测分析,选取样品中的4种特征组分原儿茶酸、绿原酸、刺五加苷B和刺五加苷E,并对各组分间的峰面积比值进行比较分析。结果 3种基质模拟样品中刺五加苷E和刺五加苷B的峰面积比值在一定范围内恒定,且比值稳定,重现性良好。对诊断比值进行箱线图分析,刺五加的诊断比值鉴别区间为1.19～2.71。对市售含刺五加的保健食品进行检测,其诊断比值与我们的结论一致。结论 建立的特征组分比值法简单、高效,可用于饮料与炮制酒中非法添加刺五加中药材的鉴别。     

配制酒中非法添加淫羊藿的鉴别及含量测定

目的 采用高效液相色谱仪建立配制酒中非法添加淫羊藿的鉴别及淫羊藿7种特征组分的测定方法。方法 样品经水浴蒸干后,用甲醇溶液溶解残渣,提取液离心,过滤,上机测定,Waters Symmetry Shield C18 (250mm×4.6mm,5μm)色谱柱进行分离,乙腈和20mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%乙酸)为流动相梯度洗脱,外标法定量。结果 7种化合物的线性检测范围最高浓度为100 μg/mL,相关系数R_²＞0.99,定量限为0.05～0.08 μg/g,于1倍定量限、2倍定量限、10倍定量限3个添加水平下进行加标回收试验,7种化合物平均回收率为92.64%-107.21%,相对标准偏差(RSD%)为0.75%-3.00%。结论 该方法操作方便、简单、灵敏度高、重复性好,满足配制酒中非法添加淫羊藿中药材的鉴别需求,为配制酒的科学监管提供有效的技术支撑。     

不同地区商品淫羊藿中朝藿定、淫羊藿苷、总黄酮含量变异及抗氧化活性分析

为了了解我国商品淫羊藿的质量现状,为淫羊藿功能性食品的生产提供依据,采用高效液相色谱法测定了33批市售淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C与淫羊藿苷的含量,采用紫外分光光度法测定了总黄酮的含量,采用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)与ABTS(2,2’-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐)方法分析了淫羊藿醇提物的抗氧化活性。结果发现,朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷与总黄酮的含量分别在0.37~3.01、0.25~5.22、0.46~19.27、0.41~13.40、18.29~68.73mg/g范围内,淫羊藿醇提物清除DPPH自由基与ABTS+自由基的EC50值分别在0.27~3.51、4.71~21.96μg/mL范围内,所有淫羊藿样品的DPPH自由基清除率均高于抗坏血酸(VC)。不同地区商品淫羊藿中黄酮类化合物含量及抗氧化活性差异较大。淫羊藿醇提物的抗氧化活性与朝藿定C、总黄酮之间具有较高的相关性(相关系数在0.5648~0.8626之间),与朝藿定A、朝藿定B、淫羊藿苷的相关性较低(相关系数在0.3550~0.6395之间)。     

淫羊藿保健面包的研制及功能成分分析

淫羊藿是我国特有的药食两用植物,其功能成分主要为黄酮类化合物.为了科学利用淫羊藿资源,采用二次发酵法,以感官评价为指标,研制出一种含有淫羊藿功能成分的保健面包.通过正交实验确定了淫羊藿保健面包的最佳配方,即当淫羊藿粉添加量为2.5％、白砂糖添加量12.0％、酵母添加量1.5％、面包改良剂添加量2.0％时,面包的风味和口感最好.质构特性分析表明,采用最佳工艺制作的淫羊藿保健面包具有较好的弹性、硬度、咀嚼度和黏稠性.功能成分分析表明淫羊藿黄酮类化合物在面包制作过程中损失率低于21％,淫羊藿保健面包中总黄酮、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C含量分别为0.929、0.089、0.065、0.103、0.027mg/g.     

仙灵脾改善小鼠睡眠功效成分的分离鉴定

仙灵脾提取物经大孔树脂粗分,利用小鼠助眠及自主活动模型进行筛选。活性分离组分经MCI、ODS层析柱进一步筛选分离有效组分得4个单体成分。经核磁共振结构鉴定,4个单体分别为:朝藿定C、朝藿定、淫羊藿苷、淫羊藿次苷。经动物试验筛选得出朝藿定C和淫羊藿苷有效提高小鼠入睡率、延长睡眠时间及减少活动次数和站立次数,并且朝藿定C效果更优。结果表明:仙灵脾具有改善睡眠作用的主要功效成分为朝藿定C,淫羊藿苷也具有较好助眠功能。     

高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱联用技术筛选中国和俄罗斯人参中的差异成分

摘 要：目的 建立高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱联用技术筛选中国和俄 罗斯人参中人参皂苷差异化合物的分析方法。方法 采用高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱联用技术(High-Performance Liquid Chromatography Tandem Triple-Time-of-Flight Mass Spectrometry/Mass Spectrometry,HPLC-Triple-TOF MS/MS)技术对来源于中国和俄罗斯的48例人参样品进行测定,通过高分辨飞行时间质谱分析(Triple-Time-of-Flight Mass Spectrometry/Mass Spectrometry, Triple-TOF MS/MS),对48例样品的特征峰质谱信息进行提取,通过得到的一级质谱精确质荷比和二级质谱碎片信息,结合软件数据库进行成分鉴别后,采用主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析 (Partial Least Squares Discriminant Analysis,PLS-DA)对得到的数据进行处理,筛选差异组分。结果 经上述方法进行处理和分析后,中国和俄罗斯人参样品间的组分得到明显区分,初步筛选并鉴定出了中国和俄罗斯人参间14种差异显著的人参皂苷类化学成分。结论 本研究成功建立了基于高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱联用技术鉴别中国和俄罗斯人参的分析方法,建立的方法准确、可靠, 可用于中国和俄罗斯人参的产地鉴别和溯源。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定保健食品中淫羊藿苷、金丝桃苷、补骨脂素

目的建立高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)测定保健食品中淫羊藿苷、金丝桃苷、补骨脂素的分析方法。方法样品经70%甲醇提取后,采用0.1%甲酸(A)和乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,质谱离子源选用电喷雾离子(electron spray ionization,ESI+)源,采用多离子检测模式(multiple reaction monitoring,MRM)对定量离子和定性离子进行监测,在液相色谱-串联质谱仪上测定。结果在15 min内完成3种目标化合物的分离分析。3种功能成分在0.25、0.5和5 mg/kg添加水平的回收率为84.3%~95.0%,相对标准偏差为0.67%~2.11%(n=7),方法检出限分别为0.05、25、10μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,适合保健食品中淫羊藿苷、金丝桃苷、补骨脂素的同时检测。     

超高效液相色谱-三重四级杆质谱法测定保健食品中六种功能成分

建立一种保健食品中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甜菜碱、补骨脂素、异补骨脂素和淫羊藿苷的检测方法。样品经甲醇40℃超声提取60 min,采用水（A）和0.1%甲酸乙腈（B）作为流动相,利用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪,选用电喷雾离子（electron spray ionization,ESI+）源、正离子检测模式（positive mode,MRM）进行测定。结果表明,6种功能成分的回收率为85.7%～108.5%,该方法实验室内变异系数为0.91%～4.32%(n=7),方法检出限为0.02～0.60μg/kg。该方法准确、灵敏、高效,适合于中药类保健食品中特征成分黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甜菜碱、补骨脂素、异补骨脂素和淫羊藿苷的分析检测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定白酒、配制酒中58种解热镇痛类非法添加化学药物

目的：建立一种高效液相色谱-串联质谱法测定白酒、配制酒中58种解热镇痛类非法添加化学药物的方法。方法：样品经甲醇超声提取后,以甲酸铵溶液-甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,外标法定量。结果：58种待测化合物在相应的线性范围内呈良好的线性关系,相关系数大于0.995;定量限范围为0.1～2.5mg/kg;在3个添加水平下,58种待测物的平均回收率基本为85.0%～131%,进样精密度和重复性的相对标准偏差为＜12.31%(n=6)。结论：该方法简单、快速、重复性好、稳定性强,适用于白酒、配制酒中清热镇痛类非法添加化学药物的检测。     

减肥保健食品中非法添加酚酞和西布曲明的同时检测

目的：建立测定减肥保健食品中非法添加酚酞和西布曲明的高效液相色谱- 串联质谱分析方法,并通过研究其质谱特征,推测其裂解途径。方法：减肥咖啡、减肥茶、减肥胶囊、苹果醋咀嚼片、减肥蛋白素等不同类型的减肥保健食品经超声波辅助提取15min,以Waters Atlantis T3 柱(150mm × 2.1mm,3μm)分离后,进行HPLCMS/MS 多反应监测模式下的定性及定量分析。结果：酚酞在2.5～500μg/L 的范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9992;西布曲明在0.15～500μg/L 的范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9996。在低、中、高3 个添加水平范围内的平均回收率为82.3%～103.6%;日内精密度均小于5%,日间精密度均小于8%。在检测的20 种样品中,检出含有西布曲明的样品13 个,检出率为65%;含有酚酞的样品9 个,检出率为45%。结论：本方法分析速度快、灵敏度高、回收率好,可用于不同减肥保健食品中非法添加酚酞和西布曲明的同时检测。     

超高效液相色谱-四极杆/轨道阱高分辨质谱法快速筛查功能性保健食品中19种特征性成分

目的 建立超高效液相色谱-四极杆/轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q/ORBITRAP HRMS)快速筛查功能性保健食品中19种特征性成分的分析方法。方法 以甲醇为提取液,经超声、高速离心、过滤,通过XDB-C₁₈色谱柱分离,以0.1%甲酸溶液(含0.02 mol/L醋酸铵)和甲醇作为流动相洗脱,选择正负离子实时切换和一级离子/自动触发二级离子扫描模式,利用保留时间、一级离子和二级离子信息建立质谱数据库,完成定性分析,利用一级分子离子峰完成定量测定。结果 19种特征性成分的实测离子质荷比与理论值相对偏差均小于8.10×10^_-6,19种特征性成分在其相应的线性范围内存在线性关系,相关系数均大于0.99,检出限为0.25 ~ 1.00 mg/kg,加标回收率为75.16% ~ 97.93%,精密度为1.09% ~ 4.86%。结论 该方法抗干扰能力强,准确度高,可用于保健食品中19种特征性成分的快速筛查,同时结合产品标签标识,鉴别其使用原料的真伪性。     

液质联用法同时检测保健食品中非法添加的13种壮阳类化学品

目的建立同时检测保健食品中非法掺入13种壮阳类化学品的液质联用方法,并对100批市售样品进行检测。方法采用液相色谱-离子阱质谱法对样品进行检测,样品经甲醇超声提取、C18色谱柱分离,以甲醇-乙腈-20 mmol/L乙酸铵溶液为流动相,进行梯度洗脱。在电喷雾离子化正离子和负离子模式下,以一级全扫描和二级全扫描模式检测,扫描范围为50~1000 u。结果 13种化合物的检出限为0.1~5 ng,在100批样品中,5批检测出西地那非,2批检测出他达拉非,1批检测出硫代西地那非。结论该法选择性强,灵敏度高,可以用于分析检测保健食品中是否掺入壮阳类化学品。     

高效液相色谱法测定纸质食品包装材料中的荧光增白剂

目的使用高效液相色谱法检测云南省纸质食品包装材料11种荧光增白剂的添加情况。方法样品采集自云南省16个州市118份纸质包装材料,粉碎后经用40%乙腈-水超声提取3次,合并提取液,离心,上清液经正己烷脱脂。脱脂后的溶液在C_(18)色谱柱上,用带有离子对试剂的流动相梯度洗脱分离后,采用紫外检测,外标法定量。结果本方法在22 min内完成11种目标化合物的分离分析,线性关系良好,相关系数(R~2)均大于0.99。在低、中和高3个添加水平的回收率为85.1%～104.6%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)小于8.2%(n=6),方法定量限(limits of quantitation,LOQ)为3.2～6.0 mg/kg,阳性样品检出率达到7.62%,含量最高达38.6 mg/kg。结论云南省纸制品存在添加荧光增白剂,部分样品中检测出多种荧光增白剂非法添加,相关部门应该予以重视,加强对纸质食品包装材料的监督管理。     

3 种名优绿茶的特征滋味成分研究及种类判别

采用高效液相色谱与高分辨质谱相结合的方法对西湖龙井、黄山毛峰和信阳毛尖3 种名优绿茶茶汤中的共有特征滋味成分进行研究,并据此进行种类判别分析。通过研究,确定了以表没食子儿茶素没食子酸酯、咖啡因、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素等为主的15 种共有特征滋味成分,并建立了其相应的特征指纹图谱。利用15 种共有特征成分峰的相对峰面积,建立了多元化典型判别函数,采用逐步判别分析技术对31 个绿茶样品进行了很好的种类判别,判别正确率为100%。     

超高效液相色谱－四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法快速筛查及定量分析减肥类保健品中20种非法添加药物

目的建立超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法(ultra performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap HRMS)快速筛查及定量分析减肥类保健品中常见20种非法添加药物。方法保健品样品以甲醇为提取溶剂进行超声提取,然后使用UPLC-Q-Orbitrap HRMS进行测定,采用全扫描/数据依赖的二级扫描(Full MS/dd-MS~2)扫描模式。通过比较样品与标准品的色谱保留时间、一级质谱和二级质谱,确定样品中是否掺杂了减肥药物,并对阳性样品进行定量分析。结果建立的Q-Orbitrap方法简便快捷、定性能力强,非常适合高通量非法添加筛查。20种减肥药物在0.1～300 ng/mL范围内具有良好的线性,线性相关系数均大于0.995,各类药物的检出限为0.03～10 ng/mL,回收率为78.5%～98.6%,相对标准偏差为2.11%～9.21%。结论该方法操作简单,分析时间短,灵敏度高,准确可靠,为打击日益猖獗的非法添加行为提供了新的手段。