甘参复方对大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的影响

目的:观察甘参复方对大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成的影响,并分析甘参复方抗肝纤维化的分子机制。方法:采用体外培养的永生化细胞株大鼠肝星状细胞(hepatic sellate cell-T6,HSC-T6)。将甘参复方稀释成6个不同的浓度梯度,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,筛选出甘参复方对HSC-T6的有效作用浓度。之后将细胞分为阴性对照组,甘参复方低浓度组、中浓度组、高浓度组。采用ELISA法检测各组细胞上清液中的Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)水平。然后,应用转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)(1 mg·L~(-1))刺激HSC-T6,观察甘参复方对刺激后细胞的增殖和胶原合成的影响。结果:甘参复方的6个不同浓度对HSC-T6的增殖有明显抑制作用,且浓度为0.5μmol·L~(-1)时抑制作用最明显(P<0.01)。ELISA结果显示,甘参复方能够降低细胞上清中的ColⅠ含量,且与CCK-8结果相吻合,在0.5μmol·L~(-1)时ColⅠ分泌最少。甘参复方能够抑制TGF-β1刺激后的HSC-T6增殖和胶原合成。结论:甘参复方能够显著抑制星状细胞的增殖以及ColⅠ的表达,这是甘参复方抗肝纤维化的作用机制之一。     

积雪草诱导人卵巢癌细胞A2780凋亡机制研究

目的:观察积雪草对人卵巢癌细胞A2780凋亡的影响并探讨相关机制。方法:用10μmol·L~(-1)、25μmol·L~(-1)、50μmol·L~(-1)、75μmol·L~(-1)的积雪草处理人卵巢癌细胞A2780 24 h,用MTT法检测细胞活性;用流式细胞术检测卵巢癌细胞A2780凋亡;用qRT-PCR检测卵巢癌细胞A2780中Bax、Bcl-2 mRNA的表达;用western blot法检测卵巢癌细胞A2780中Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:50μmol·L~(-1)、75μmol·L~(-1)的积雪草作用于细胞后,乳腺癌细胞A2780细胞形态发生明显改变,细胞皱缩、变圆。与对照组比较,75μmol·L~(-1)积雪草对卵巢癌细胞A2780抑制效果最明显。与对照组比较,50μmol·L~(-1)、75μmol·L~(-1)积雪草能够有效升高Bcl-2 mRNA的表达,降低Bax mRNA的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。不同浓度积雪草均能有效升高Bax的表达并降低Bcl-2的表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:积雪草可抑制肿瘤的生长,其作用可能是通过诱导卵巢癌细胞A2780凋亡来实现的。     

鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠软骨终板细胞增殖和CollagenⅠ、CollagenⅡ、IL-6 mRNA表达的影响

目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL~(-1)β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖和Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,CollagenⅠ)、CollagenⅡ、白细胞介素(interleukin-6,IL-6) mRNA表达的影响。方法:选取健康SD大鼠(1个月龄),取其脊柱椎间盘软骨终板细胞,并培养至第3代软骨终板细胞进行实验。空白对照组不做任何处理,诱导组只加入10μg·L~(-1)的IL~(-1)β,给药组在培养基中加入10μg·L~(-1)的IL~(-1)β和不同质量浓度的鹿茸多肽(分别为10 mg·L~(-1)、30 mg·L~(-1)、50 mg·L~(-1))。用MTT比色法检测3个时间点(24 h、48 h、72 h)各组椎间盘软骨终板细胞的增殖情况; qP CR法检测CollagenⅠ、CollagenⅡ及IL-6 mRNA的表达。结果:MTT法检测结果:鹿茸多肽10 mg·L~(-1)组的软骨终板细胞增殖与诱导组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);鹿茸多肽30 mg·L~(-1)组和鹿茸多肽50 mg·L~(-1)组能促进软骨终板细胞的增殖,与诱导组比较,差异有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01)。qP CR检测结果:IL~(-1)β诱导组的CollagenⅡmRNA的表达降低,CollagenⅠ、CollagenⅡ、IL-6的mRNA的表达升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P <0. 05);不同质量浓度的鹿茸多肽均能增强CollagenⅡmRNA的表达,降低CollagenⅠ和IL-6 mRNA的表达,差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01),30 mg·L~(-1)、50 mg·L~(-1)鹿茸多肽效果更加显著(P <0. 01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽能减轻IL~(-1)β对软骨终板细胞增殖的抑制,升高CollagenⅡmRNA的表达,降低CollaoenⅠ、IL-6 mRNA的表达,从而延缓椎间盘的退变。     

白藜芦醇对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究白藜芦醇抑制人上皮性卵巢癌细胞增殖并促进其凋亡的作用及机制。方法:将人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3细胞随机分为5组,即正常对照组、白藜芦醇高剂量组(40 mg·L~(-1))、白藜芦醇中剂量组(20 mg·L~(-1))、白藜芦醇低剂量组(10 mg·L~(-1))和顺铂组(40 mg·L~(-1))。干预48 h后,通过光学显微镜观察各组细胞形态,MTT比色法检测各组细胞增值抑制率。通过流式细胞仪分析细胞周期的改变、流式细胞术检测细胞凋亡并计算细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测细胞Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达并计算Bax/Bcl-2比值,Western blot法检测细胞caspase-3蛋白表达。结果:与正常对照组比较,白藜芦醇高、中剂量组细胞出现变圆、脱壁、细胞间接触松散等状态,细胞抑制作用明显、增殖抑制率显著升高(P<0.01);白藜芦醇各剂量组细胞周期被阻滞于G2/M期,白藜芦醇高、中剂量组细胞凋亡率显著升高(P<0.01),同时可明显下调Bcl-2 mRNA而上调Bax mRNA表达,显著提高Bax/Bcl-2值(P<0.05,P<0.01),上调caspase-3蛋白表达(P<0.01)。结论:白藜芦醇能够通过抑制增殖并促进凋亡对人上皮性卵巢癌SKOV3细胞生长起到一定的抑制作用,其机制可能与白藜芦醇调节凋亡相关基因蛋白表达有关。     

黄芪多糖对小鼠肾小球足细胞Nephrin、Desmin表达的影响

目的:观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对阿霉素(adriacin doxorubicin,ADR)诱导的肾小球足细胞损伤中足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin及骨架蛋白Desmin表达的影响。方法:通过体外培养小鼠肾小球足细胞,以ADR诱导制作足细胞损伤模型,分为对照组、ADR损伤组(0.5 mg·L~(-1) ADR)、APS干预组(0.5 mg·L~(-1) ADR+0.8 g·L~(-1)APS)。MTT比色法检测3组细胞活力;免疫荧光染色观察3组Nephrin、Desmin表达;Western blot检测Nephrin、Desmin蛋白表达;RT-PCR检测Nephrin、Desmin mRNA水平。结果:APS干预组、对照组细胞活力[(87.25±11.14)%、(97.05±12.67)%]高于ADR损伤组[(58.62±7.93)%](P<0.05)。免疫荧光显示:APS干预组足细胞Nephrin表达少于对照组,但明显强于ADR损伤组(P<0.05);而足细胞Desmin少量表达,且明显少于ADR损伤组(P<0.05)。对照组、APS干预组足细胞Nephrin蛋白含量及Nephrin mRNA水平高于ADR损伤组(P<0.05),Desmin蛋白含量及Nephrin mRNA水平低于ADR损伤组,差异有统计学意义(P<0.05);而APS干预组与对照组足细胞Nephrin、Desmin蛋白及Nephrin、Desmin mRNA表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芪多糖对ADR诱导的肾小球足细胞损伤具有保护作用,其机制可能与上调Nephrin表达、下调Desmin表达有关。     

山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖、迁移的影响。方法:利用细胞培养技术对人乳腺癌T-47D细胞进行培养;利用MTT法比较不同浓度山慈菇水煎剂组和对照组对T-47D细胞生长增殖情况的影响;利用细胞划痕实验,检测不同浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞迁移的影响。结果:不同浓度的山慈菇水煎剂(50 g·L~(-1)、100 g·L~(-1)、200 g·L~(-1),400 g·L~(-1)、600 g·L~(-1)、800 g·L~(-1))对T-47D细胞的生长抑制率分别为-0.60%、-17.10%、-0.60%、65.08%、81.15%、82.80%,400~800 g·L~(-1)质量浓度山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D细胞的增殖有明显抑制作用;划痕实验结果显示200 g·L~(-1)、300g·L~(-1)山慈菇水煎剂作用24h和48h后,与对照组比较,乳腺癌T-47D细胞的划痕距离较大,划痕未见明显愈合,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞生长增殖具有抑制作用,低浓度(<200 g·L~(-1))的山慈菇水煎剂对T-47D细胞的生长增殖无影响,即无细胞毒性;高浓度(>200 g·L~(-1))的山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D的增殖有明显的抑制作用;一定浓度的山慈菇水煎剂可以抑制T-47D细胞的迁移运动。     

郁金含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制作用的影响

目的:观察郁金含药血清对肝星状细胞-T6(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)细胞增殖抑制的研究。方法:25只SD大鼠随机分5组:郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组(16.2 g·kg-1、8.1 g·kg-1、4.0 g·kg-1),秋水仙碱组(5g·kg-1)以及空白组(给予等体积生理盐水),连续灌胃给药4 d后,于第4天一次性给药1 h后,乙醚麻醉腹主动脉取血制备含药血清;将HSC-T6细胞分为6组,郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组,空白组、秋水仙碱组、阴性对照组(加入等体积的PBS代替大鼠血清),分别取用体积分数5%、10%、20%的含药血清,同时作用于各组HSC-T6细胞24 h、48 h、72 h后,采用四氮噻唑蓝法在酶标仪(490 nm波长)上检测各组OD值,分别计算其增殖率和抑制率。结果:与阴性对照组比较,除作用24 h、体积分数5%组外,大鼠血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖速度,其增殖率与大鼠血清含量呈正相关。与空白组比较,除作用24 h、体积分数5%含药血清各剂量组、低剂量20%组以及秋水仙碱20%组没有明显抑制作用外,其余各郁金剂量组均有增殖抑制作用,其中体积分数10%组的抑制效果明显高于体积分数20%组(P<0.05)。作用48 h后,各干预含药血清的3个浓度组均有明显抑制作用,其中郁金体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P<0.05);作用72 h后,除秋水仙碱组外,各郁金剂量组均有明显抑制作用,其中含药血清体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P<0.01)。结论:大鼠郁金含药血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖;郁金含药血清在体外可以有效抑制HSC-T6细胞的增殖,但抑制率与含药血清体积分数、作用时间呈非线性关系,抑制率最为显著的是含药血清体积分数10%,作用时间48 h。     

三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞损伤后活性的影响

目的:检测三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞损伤后的影响,探索三七总皂苷对内皮细胞的保护作用。方法:把体外培养的人脐静脉内皮细胞株传代培养,共分为6组,即正常组,模型组,三七总皂苷4个浓度组,用10μg·L~(-1)的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)造成细胞损伤模型,三七总皂苷组分别加入不同浓度的三七总皂苷2.5 mg·L~(-1)、5 mg·L~(-1)、10 mg·L~(-1)、20 mg·L~(-1),用CCK-8方法检测各组细胞活性。结果:CCK-8检测结果显示,人脐静脉内皮细胞在TNF-α诱导损伤后,用4个浓度的三七总皂苷干预,随着时间的延长,细胞存活率逐渐降低,组间差异具有统计学意义,其中6 h的细胞存活率最高,24 h的细胞活性最差,差异无统计学意义;和模型组相比,三七总皂苷4个浓度组细胞活性明显较高(P<0.01或P<0.05),其中5 mg·L~(-1)三七总皂苷组细胞活性最高,与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:三七总皂苷能提高人脐静脉内皮细胞损伤后的活性。     

槟榔碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响

目的探讨槟榔碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和油红O染色检测不同浓度(10、30、50、100μmol/L)的槟榔碱对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响,荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和CAA T/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达。结果 10～100μmol/L槟榔碱作用3T3-L1前脂肪细胞12 h和24 h能促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,且呈一定的量效关系。到分化的第9天,与对照组相比,50μmol/L槟榔碱组胞浆中的脂滴明显减少,同时PPARγ和C/EBPαmRNA表达水平显著降低。结论槟榔碱能促进3T3-L1前脂肪细胞的增殖、抑制其分化,其机制可能与PPARγ和C/EBPα的表达降低有关。     

优化姜黄素纳米脂质体及其体外抗瘤作用的考察

目的优化姜黄素纳米脂质体(Cur-np)的制备,以提高姜黄素的包封率与稳定性,探讨Cur-np对LO2细胞、HepG2细胞与SGC7901细胞增殖的影响。方法通过正交试验优化Cur-np的制备,以包封率、粒径为指标对Cur-np性状进行考察。MTT法检测姜黄素与Cur-np对LO2细胞、HepG2细胞、SGC7901细胞的抑制效果。结果优化处方制备的Cur-np包封率(91.64±1.35)%,粒径(114.57±18.57)nm,zeta电位(-8.76±0.38)mV。Cur-np对HepG2细胞与SGC7901细胞均具有抑制作用,作用24 h后半数致死量(IC_(50))分别为(39.31±4.25)μmol·L~(-1)和(36.89±1.68)μmol·L~(-1);作用48 h后IC_(50)分别为(15.94±0.97)μmol·L~(-1)和(24.74±1.96)μmol·L~(-1)。结论经处方优化制备的Cur-np包封率高,具有缓释效果。Cur-np对肿瘤细胞的抑制作用存在时间、剂量依赖性,具有良好的抑瘤效果。此研究为姜黄素纳米脂质体的研究提供进一步的理论指导。     

机动化对历史文化街区的影响及应对策略研究

介绍了历史文化街区与机动化的形成与发展特点,基于机动化蚕食历史文化街区的隐蔽性与危害性,通过深入研究,揭示了机动化蚕食历史文化街区的机理,并制定了相应的应对策略。     

Impact of paint and wall-paper on mould growth on plasterboards and aluminum

Biocide-free and biocide-treated plasterboards as well as aluminum plate as a reference material normally considered as being insensitive to mould growth have been used as substrate to check the influence of different common wall coverings, i.e. paints and wall papers, on fungal growth. The results described in this paper show that any non-biodegradable material (such as aluminum) can become a substrate to fungal infestation once painted or wall paper applied, depending on the type of paint or wall paper used. Moreover, a biodegradable material treated with a biocide (biocide-treated plasterboard) offers partial resistance to fungal growth at a biodegradable surface covering.     

The effect of phosphate and temperature on growth of activated sludge and on biodegradation of surfactants

Occasional inconsistent and low removals of readily biodegradable surfactants and poor growths of sludge have been traced to sub-optimal concentrations of phosphate in the synthetic sewage used in the EEC method of assessment. The variable concentration of phosphate in this sewage was probably the result of variable amounts present in the organic components, peptone and meat extract. Reduced removal of alkylphenol ethoxylate surfactants at low temperature has been shown not to be related to a phosphate deficiency.     

考虑降水的基坑开挖卸荷对坑底桩的影响

降水与深基坑开挖卸荷是影响坑底工程桩工作性状的重要因素,应用有限元分析软件ABAQUS建立基坑开挖二维模型,综合考虑了降水及卸荷对坑底工程桩的影响,得出如下结论：降水能有效减少开挖引起的工程桩回弹及坑底土体回弹;前期降水增大了桩身轴向压应力而开挖卸荷使桩身拉应力逐渐增大;降水导致地基固结沉降从而使桩侧产生负摩阻力,降水...     

浅析校舍抗震加固技术现状及发展趋势

为贯彻执行《中华人民共和国防震减灾法》,特别是汶川、玉树大地震后,我国中小学校舍抗震设防标准随之大幅度提高.校舍抗震加固工程体量浩大、情况复杂、时间紧、要求高.文章针对校舍抗震加固工程的现状,存在问题及发展趋势,进行了分析并提出对策和建议.     

基于ArcScene+SketchUp的小区三维可视化研究与实现

三维GIS是当今的发展趋势之一.小区三维可视化是构建数字城市的前提和基础.本文分析了目前三维GIS的发展情况.结合小区三维可视化的特殊性,以及兼顾二、三维GIS平台数据一致性,本文选择以Google SketchUp+ArcScene的方法,实现小区三维可视化,特别对日常不易观察的地下管网也实现了三维可视化.     

高速公路桥头跳车及桥梁养护

叙述了高速公路桥头跳车的可能性,分析了桥头跳车的现象、原因、危害与对策,同时还探讨了桥梁养护、检测、计算、承载力评价、维修加固与钢筋混凝土及预应力混凝土桥梁的耐久性.     

浙江省山地乡村规划建设探讨

浙江北部的多数城市和乡镇都地处或靠近山地丘陵地带,且现存“平原资源”开发趋于饱和状态,政府和设计师逐渐把目光转移到如何合理、有效、可持续地开发建设“山地丘陵”的资源。文章结合浙江省大学生创新学分改革的教学实践,整合社会学、城市规划学、建筑学、人居环境科学等多种方法,从理论层面和实践调研两方面进行探索,建立符合浙北山地特征的“城镇-乡镇-村镇”分层规划和设计模型,为城市郊区和农村的规划与建筑设计提供科学可靠的辅助手段。     

某高速公路桥涵台背回填材料选择及特性研究

着重探讨了高速公路桥涵台背回填材料的选择及回填材料的级配、密实度及强度等工程特性，并通过试验进行了分析，从而降低台背填土和桥涵构造物的不均匀沉降以及“桥头”跳车的危害。     

木材和混凝土横向钉连接效果讨论分析

讨论采用欧洲标准评估钉连接木材混凝土的连接方法的准确性。首先,对采用欧洲规范提出的销型紧固件方法的充分性进行了分析和讨论,利用木材元素,研究钉的单和双剪切销式连接的效果分析。然后,一个类似的载荷试验在木材—混凝土连接上进行,使用相同的紧固件(钉),在单剪,木材种类和实验程序上进行分别讨论分析。