用镧作细胞外间隙示踪剂的方法探讨

镧盐溶液在硷性PH时形成的氢氧化镧,一般认为它不能通过完整的细胞膜而沉积在细胞外,在电镜技术中可用它作为示踪剂,以显示细胞外间隙及细胞间连接结构,以及作为探测某些生物屏障通透性改变的标志物。我们取小白鼠肝及人的肝穿标本,用加有1％硝酸镧的固定液及漂洗液处理后,在靠近组织表面的细胞间,可看到     

心肌保护的超微结构研究与镧示踪

胶体镧颗粒约40A,与细胞内钙结合部位有高度亲和性,并与钙离子有许多相似的特征。正常情况下镧不能透过细胞膜而集聚在细胞外间质和细胞连接处。当细胞膜损伤时镧即进入细胞内呈现高电子密度染色。我们按Hoffstein法,以国产硝酸镧作为示踪剂,对28℃缺血60分钟再灌注30分钟的离体兔心肌,缺血60分钟后用低钙血灌注5分钟以及缺血120分钟用钙阻断剂-钾停跳液保护的离体兔心肌,进行镧示踪超微结构观察,同时测定心肌组织含钙量。结果,缺血心肌细胞膜破损,呈空泡样变。心肌细胞显著水肿,肌原纤维断裂,肌节缩短,收缩带形成。线粒体严重损伤,出现无定形致密体。胞核染色质凝聚、边化。镧大量集聚在细胞内肌原纤维间,胞浆中,     

肾小管上皮细胞缺血性损伤的细胞化学观察

本次实验采用Ca~(2+)细胞化学定位法(用草酸——焦锑酸钾法对细胞内Ca~(2+)进行选择性定位)、膜通透性细胞化学示踪法(用硝酸镧作示踪剂显示质膜通透性)与EDX电镜分析技术及超微结构相结合,观察了肾近端小管上皮细胞缺血损伤情况(钳夹大白鼠肾血管造成缺血模型)以及肌苷、种芎对其的影响,探讨了细胞缺血损伤后Ca~(2+)、质膜的变化以及药物对细胞缺血损伤起保护作用的机理。结果显示:(1)缺血60分钟,细胞严重肿胀,线粒体水肿,微绒毛变形、脱落。缺血60分钟复流24小时,不给药组大部分细胞坏死,质膜严重损伤,参照keith对细胞损伤的分期标准进行分类、统计,Ⅲ、Ⅳ期细胞占89％,而用药组缺血损伤明显改善,质膜损伤减轻,Ⅲ、Ⅳ期细胞分别占33％(肌苷组)和23％(川芎组)。(2)正常肾近端小管上皮细胞,Ca~(2+)以细小颗粒状形态分布于细胞核、线粒体及胞浆中,镧以细颗粒形式沿基底膜、细胞间隙及基侧褶间隙均匀沉淀;缺血60分钟,胞浆中、核内及线     

石英对大鼠肺巨噬细胞质膜通透性的影响

石英对肺泡巨噬细胞 ( alveolar macrophage,AM)的损伤是矽肺发生发展的关键环节之一。在 AM细胞质膜损伤的研究中 ,对质膜通透性的研究尚少报道 ,而且主要集中在某些特异性通道如钙离子通道的开闭 [1]。关于镧标技术用于检测细胞膜通透性的改变已有报道 ,但通常以整块组织进行镧示踪标记[2 ] 。本课题将镧标示踪技术运用于体外培养细胞的质膜通透性检测 ,拓宽了镧标技术的应用范围 ,同时也为培养的单个细胞质膜通透性的检测提供了形态学技术。材料和方法( 1 )镧标的实验步骤　选用雄性 Wistar大鼠 ,以支气管肺泡灌洗技术获取并富集 AM,…     

镧示踪法在表皮屏障功能研究中的应用

金属镧是电子显微学中使用的最小的示踪元素之一。它是正三价离子 ,其原子的直径为 0 .11nm ,常用的化合物为硝酸镧 ,是一种水溶性物质。在生物学和电子显微学中主要利用镧在电镜下产生电子致密的特性来描述细胞间隙和细胞连接结构。本实验用硝酸镧作为示踪剂来揭示表皮的屏障功能。1　材料与方法本实验用裸鼠作为实验动物。将 0 .0 5mol L的Tris缓冲液配制的含有 8%蔗糖、8%硝酸镧溶液 ,pH 7.6 ,与 2 %多聚甲醛、2 %戊二醛、0 .0 6 %氯化钙 ,用 0 .1mol L二甲砷酸钠缓冲的固定液按 1∶1混合 ,将裸鼠的表皮样品在此混合液中室温下固定 1h …     

肉鸡腹水症发病机理研究:低温处理后肉鸡肺脏超微结构的病理学变化

利用扫描电镜和透射电镜观察低温处理对肉鸡肺动脉和肺组织超微结构影响，以了解低温处理后是否形成肺脏结构性阻力增加。结果显示：①扫描电镜观察发现肺血管内皮嵴消失，附着相当数量的红细胞和血小板。延长低温处理后血管内皮细胞损伤严重，基膜裸露，附着血小板增多。②透射电镜观察发现低温处理后的19日龄血管内皮细胞肿大，细胞核向血管腔突入，毛细血管腔狭窄。低温延长后内皮细胞下基膜出现弥漫性水肿及淋巴细胞浸润。③硝酸镧示踪观察发现低温处理后肺泡上发、肺泡间隔间质内也出现数量不等的镧颗粒，毛细血管通透性增加，肺泡膜水肿。研究提示低温处理后肉鸡肺组织超微结构的损伤、造成肺脏顺应性降低，从而会诱导肺组织器质性阻力升高和产生肺动脉高压。     

微波辐射对细胞膜通透性的影响

本实验通过电镜镧细胞化学方法，观察了微波辐射对生物样品细胞膜通透性的影响。在常规化学固定的情况下，镧颗粒沿细胞间隙密集分布而不能进入细胞内。生物样品经微波辐射后，在细胞内甚至在线粒体等细胞器内可观察到较多的镧颗粒。提示：微波辐射使生物膜的通透性发生了改变。     

用硝酸镧追踪心肌细胞膜通透性改变

硝酸镧是重金属电子密度高,能溶解在二甲砷酸钠缓冲液,可以用它作为示踪剂,尤其心肌细胞可以作为缺氧或其它损害或药物影响的标志。正常心肌细胞膜是天然屏障,镧离子不能透过细胞膜,只能在心肌细胞膜外侧、闰盘、T管,而不能进入胞质内。当心肌细胞缺氧时,我们利用大白鼠的离体心脏进行有氧灌注和无氧灌注。在无氧灌注20分钟时,即见到心     

急进高原个体胆汁返流与急性胃肠粘膜损伤的关系探讨

目的：对急进高原个体胆汁返流与急性胃肠粘膜损伤的关系进行探讨。方法：对20例由平原急进高原个体进入高原前、进入高原第3天和第7天进行胃镜检查,对其胆汁返流、胃黏膜损伤及其消化系统的症状发生情况进行调查。结果：20例急进高原个体进入高原后胆汁返流及胃粘膜损伤与进入高原前比较,除进入高原第7天胆汁返流无显著差异外,其余均有显著差异（分别为P〈0.01和P〈0.05）,其中胆汁返流进入高原前、进入高原第3天及第7天分别为0例（0%）1、0例（50%）、5例（25%）;粘膜损伤分别为2例（10%）1、7例（85%）、10例（50%）;其中13例有不同程度的消化系统症状（占65%）。结论：高原急性缺氧可引发急进高原个体胆汁返流的高发生率,并因此而导致急性胃肠粘膜损伤。     

健脾灵对慢性溃疡性结肠炎疗效的电子显微镜观察

本实验对34例用健脾料治疗的慢性溃疡性结肠炎病人治疗前后的结肠粘膜进行了对比观察。主要采用扫描电子显微镜对结肠粘膜表面的病变特点及治疗后修复期膜后形态进行了细致观察。并用透射电子显微镜观察了病变及修复期粘膜上皮超微形态特点。结果表明:34例治疗前结肠粘膜均呈较典型的縻烂、溃疡及隐窝脓肿改变。应用健脾灵片治疗后的结肠粘膜24例(大约70％)病灶已消失,由新生上皮覆盖,接近正常状态。个别病例已呈正常状态。10例(大约30％)病灶基本修复,有新生上皮增生,但仍有部分病变残留。根据上述观察,我们认为健脾灵对病人结肠粘膜的病变具有限制,清除和修复的作用。本实验为健脾灵对慢性溃疡性结肠炎的疗效提供了可靠的形态学依据。     

肝细胞凋亡的超微结构观察

通过对肝细胞凋亡动态变化过程的电镜观察,揭示细胞凋亡与肝脏疾病的关系。选择２８例肝脏病变标本及６例正常肝脏标本,应用透射电镜观察细胞凋亡的超微结构变化。结果显示肝细胞凋亡具有一般细胞凋亡的超微结构变化,又具有其特殊形态学特征。应用电镜手段进行细胞凋亡研究有助于从更深的层次对细胞凋亡的形态学的认识。肝细胞凋亡的动态平衡失调与肝脏疾病的发生发展有密切的关系。     

实验性慢性缺氧与肺血管结构的重建

目的：主要研究慢性缺氧与肺血管结构重建的关系,利用常压缺氧舱建立大鼠缺氧性肺动脉高压模型。实验动物分为3组：缺氧3天组、7天组、14天组。通过免疫组化的方法检测一氧化氮合成酶(NOS)的表达和含量,部分标本通过电镜观察。结果：在缺氧过程中,肺血管的胶原纤维明显增生,超微结构观察显示血管在早期可见内皮细胞损伤并伴有血小板性血栓形成;到后期出现肌纤维母细胞和胶原纤维增生。实验显示随缺氧时间的延长内皮细胞NOS的含量逐渐升高,而肺血管内源性的舒张反应反而降低,管腔狭窄,血流阻力加大。文中讨论了慢性缺氧与肺血管结构重建的关系,肺缺氧性肺动脉高压的机理,内皮细胞形态及功能的改变在肺动脉高压形成中的意义。     

毛细胆管发育不良致先天性阻塞性黄疸的超微结构观察

用电子显微镜观察了一例先天性阻塞性黄疸病例的肝脏超微结构,结果显示肝细胞内有不同程度的淤胆,大部分肝细胞间未见毛细胆管结构或毛细胆管发育不良,提示本例患者的阻塞性黄疸由先天性毛细胆管发育不良引起,电镜检查有利于判断患儿的预后。     

空心莲子草对钉螺神经节及足肌超微结构的影响

研究空心莲子草（Alternanthera philoxeroides）杀灭钉螺的作用机理。将空心莲子草水浸液（1g／100ml）及去氯水分别浸泡钉螺24h后,用透射电镜观察两组钉螺神经节及足肌超微结构的变化。结果显示：钉螺经空心莲子草水浸液浸泡24h后,神经节细胞明显破坏,其细胞膜消失,细胞核固缩,胞质内细胞器变性坏死,次级溶酶体增多,神经纤维断裂;足肌纤维内细胞核肿胀,肌丝排列紊乱甚至溶解,细胞间隙明显增宽。结果提示：空心莲子草水浸液对钉螺神经节细胞有明显破坏作用,同时可引起足肌细胞变性及细胞间隙水肿。     

低强度中频超声杀伤卵巢癌细胞的初步研究

目的:观察低强度中频超声时人卵巢癌细胞的杀伤作用.方法:取对数乍长期的H08910细胞,分成实验组和假辐照组,以低强度中频超声(频率1.7MHz)辐照用MTT法计算细胞抑制率;光镜观察细胞形态,Hoechst33258荧光染色法检测凋亡细胞.结果:低强度中频超声照射各组间细胞抑制率工对照组相比有统计学差异,光镜下可见细...     

Thermotropic Liquid Crystals as Substrates for Imaging the Reorganization of Matrigel by Human Embryonic Stem Cells

We have investigated the culture of human embryonic stem cells (hESCs) on interfaces of the thermotropic liquid crystal, TL205, that are decorated with thin films of the extracellular matrix, Matrigel. hESCs seeded at the liquid‐crystal/Matrigel interface survive for weeks, and cell colonies grow over this time. The cells show levels of differentiation comparable to that observed for cells on Matrigel‐coated glass controls. Polarized and fluorescence microscopy reveal that the orientational order of the liquid crystal is coupled to the presence and organization of Matrigel. This enables straightforward imaging of the reorganization of Matrigel by the hESCs through changes in the appearance of the liquid crystal when observed using polarized light microscopy. The coupling between Matrigel and TL205 thus provides a simple tool for monitoring the reorganization of the Matrigel film over time. Our results suggest new approaches to the culture of cells and measurements of cell–extracellular‐matrix interactions.     

Changes occurring on the cell surface during KSHV reactivation

Following an infection, Kaposi's sarcoma-associated herpes virus (KSHV) exists predominantly in its latent state, with only 1-2% of infected cells undergoing lytic reactivation. We have previously demonstrated along with others a relationship between lytic reactivation and cell cycle progression (Bryan et al., 2006. J. Gen. Virol. 87: 519; McAllister et al., 2005. J. Virol. 79: 2626). Infected cells in the S phase are much more likely to undergo lytic reactivation when compared to those in G(0)/G(1) phase. Through the use of scanning electron microscopy (SEM), we analyzed changes occurring on the surface of cells undergoing KSHV reactivation. KSHV reactivation was observed predominantly in cells with smoother surface topology; a hallmark of cells derived from S phase. Interestingly, during the late stages of the reactivation process, we observed KSHV particles to egress cells through budding. Taken together, based on scanning electron microscopy and transmission electron microscopy evidences, we demonstrate for the first time the existence of a direct link between cell surface topology, cell cycle progression and KSHV reactivation.     

激光消融对角膜细胞的影响

本文用计算机图像定量分析308nm准分子,193nm准分子和2.94μm Er∶YAG激光分别照射角膜后,角膜上皮细胞和内皮细胞的形态变化。结果表明:308nm激光对角膜上皮细胞有明显损伤;193nm对再生的上皮细胞无明显影响,而2.94μm对上皮细胞无影响。但若使用2.94μm激光能量密度过高或切削过深,则对内皮细胞有影响。     

Electron microscopic, serological and hematological research on lambs infected with the bovine leukemia virus

A complex study on experimental oncornavirus infection in sheep was carried out. Fast development of infectious process, production of virus-specific precipitating antibodies, presence of BLV reproduction in cultivated leucocytes were found. Terms of antibody appearance ranged between 20-30 days after infection. Stable antibody carriage remained during the whole observation period (36 months). Moreover, no expressed specific changes were observed in the hemogram of tested animals. Use of electron microscopy in oncornavirus infection allows revealing cells with pathologic changes in organelles and nucleus which are characteristic of the leucosis.     

The effect of castanospermine on embryonic mouse cerebellar neurons in culture.

This study examines ultrastructural changes in explants of fetal mouse cerebellum following exposure to castanospermine, an inhibitor of N-linked glycosylation and therefore likely to interfere with cell-cell interactions in the developing nervous system. Explants were grown in castanospermine enriched medium for a period of 10 days and compared with identical explants maintained in control culture medium. Both control and treated explants contained many neurons and numerous synaptic profiles. A detailed analysis of 75 thin sections from each group of explants did however reveal highly significant differences between the two. The castanospermine-treated cells contained smaller numbers of cisternae in each Golgi stack; much larger numbers of secretory vesicles which were also substantially larger in size and four times as many coated vesicles per section as control cells. In addition, at 10 days in culture the first changes in the rough endoplasmic reticulum were observed, with individual profiles of reticulum occasionally associated with large vacuoles. Thus, although cerebellar neurons in culture are able to survive prolonged exposure to castanospermine, there are marked ultrastructural changes in subcellular organelles associated with glycoprotein synthesis, packaging and secretion.