一种新型载光敏剂的微泡制备及其基本物理特性研究

目的:制备一种包封率及载药量较高的载光敏剂微泡,并测定其物理参数。方法:制备加入大豆油载竹红菌素微泡,观察载微泡的形态、结构、观察苏丹黑对微泡的染色,以及超声辐照后苏丹黑的释放情况,测定微泡的包封率、载药量、粒径、电位分布,体外显影效果,兔肝内显影效果。结果:载竹红菌素微泡的浓度为1.4×109/ml至4.5×109/ml,粒径范围为90%以上在1μm至5μm,平均粒径为1.95μm。大豆油微泡竹红菌素的包封率大于95%,载药量为2.38±0.023 mg/ml;Zeta电位为20.3±1.6 mV;苏丹黑染色后光镜下可见大豆油及微泡壁被染成黑色,超声辐照后微泡稀释液变黑加深。结论:采用机械振荡法制备的加入大豆油载竹红菌素微泡,包封率较高,稳定性好,粒径分布好,体内外显像效果尚可,超声辐照能促使微泡中的药物释放,大豆油载药微泡作为一种光敏剂的运载体,有望实现实时监控下的体内定点靶向给药。     

激光爆破脂质体微泡对视网膜母细胞瘤细胞增殖影响

目的:首次探讨激光爆破脂质体微泡造影剂的可行性,并研究其对视网膜母细胞瘤细胞增殖的影响.方法:利用激光在液体中的光声效应,采用Nd-YAG激光.将激光聚焦于脂质体微泡,按照不同的能量参数分组照射,通过DFY-Ⅱ型超声定量分析诊断仪检测微泡爆破率;台盼蓝染色及MTT法研究其对视网膜母细胞瘤细胞增殖影响.结果:激光可成功爆破微泡,不同单脉冲能量(5mJ、10mJ、15mJ)、照射总能量(125mJ、250mJ、500rnJ、750mJ)之间相比有统计学意义(P<0.05);不同激光微泡参数对视网膜母细胞瘤细胞增殖影响亦具统计学意义(P<0.05);结论:Nd:YAG激光能够成功爆破脂质体微泡,在合适的参数下,对视网膜母细胞瘤细胞增殖无明显影响.     

超声微泡介导野生型P53基因转染鼠视网膜母细胞瘤的实验研究

目的:探讨超声微泡造影剂在一定强度的超声波照射下介导野生型p53(wtp53)基因转染荷瘤小鼠的可行性,为实现外源基因高效,定向的转移目的奠定基础。方法:将12只BAlB/C(nu/nu)裸小鼠双眼玻璃体腔接种HXO-Rb44细胞,造模成功后,将动物随机分为2组,第1组于尾静脉注入含质粒的微泡造影剂;第2组尾静脉注射质粒与微泡的混合液,并立即以0.5W/cm2〔1〕的超声波辐照小鼠眼球60s,工作时间控制为20%。转染7天后,处死动物,摘除眼球,RT-PCR检测wtp53基因的表达情况。结果:超声照射组动物的肿瘤组织中均检测到wtp53的mRNA表达,而未照射组动物肿瘤组织中未检测到mRNA的表达。结论:超声微泡能使外源基因wtp53高效的转染小鼠RB肿瘤组织。     

超声辐照载Fcy：：Fur自杀基因微泡治疗卵巢癌移植瘤的实验研究

目的:探讨超声定位辐照载roy::Fur自杀基因微泡对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤的抑瘤效应.方法:将荷瘤鼠随机分成5组,超声辐照载基因微泡组、超声辐照基因组、超声辐照微泡组、载基因微泡组和对照组.处理后剖取瘤块测体积、重量.计算抑瘤率;TUNEL检测肿瘤细胞凋亡.结果:各组肿瘤体积、重量、抑瘤率及凋亡均不同,超声辐照载基因微泡组的肿瘤体积、莺最最小,抑瘤率最大,凋亡率最高,与其他组比较有显著性差异(P<0.05).结论:载自杀基因微泡在超声定位辐照下,抑瘤效果好,有望成为卵巢癌新的治疗模式.     

微球化骺板细胞构建兔异位骺软骨实验

目的探讨海藻酸钙-多聚赖氨酸微球复合骺板细胞，在兔体内异位构建组织工程化骺软骨的可行性。方法将兔异体骺板软骨细胞接种于海藻酸钙-赖氨酸凝胶微球中，体外培养后植入兔背部皮下，分别于2、4、8周取材进行大体及组织学观察。结果体外培养时微球中骺板细胞生长、增殖情况良好；移植皮下后第4周取材可见外形呈类骺软骨样组织块，行HE、甲苯胺蓝、番红“O”及Ⅱ型胶原等染色，镜下观察可见大量软骨细胞及类软骨陷窝样结构，植入的海藻酸钙微球周围组织无明显炎症反应。结论海藻酸钙-赖氨酸具有良好的组织相容性，复合异体骺板细胞形成微球，植入同种异体动物体内可以构建类骺软骨样组织。     

连续微浮雕面形控制的新方法

建立了抗蚀剂表面曝光量分布与抗蚀剂内部PAC浓度分布之间的关系,通过分析抗蚀剂内部PAC浓度分布特点,发现了抗蚀剂显影过程中的壁垒效应。在此基础上,提出一种新颖的微浮雕面形控制方法——等PAC浓度曲线面形控制技术。该方法克服了抗蚀剂显影模型精度以及显影不稳定性对浮雕面形的影响,使光刻胶上微结构浮雕深度超过100μm,面形均方根误差小于1μm。     

肝癌介入治疗患者的整体护理

1.治疗方法 我院从2001年1月-7月对20例肝癌患者进行了护理,方法如下:1.1血管插管灌注治疗（TAI）采用选择性或超选择性动脉插管,导管进入供应肿瘤动脉血的肝动脉后,造影并移动导管进入预定位置,然后固定导管,经导管内灌注化疗药物、放射性核素微球、或细胞毒性物质。常联合1-3种药物一次性大剂量灌注,灌注时间一般为15-20分钟。1.2血管插管栓塞治疗（TAE）经肝动脉血管以适当速度注入适量的栓塞剂,引起动脉闭塞,肿瘤组织缺血坏死。1.3肝癌介入治疗穿刺的常用途径是经股动脉。常见的穿刺合并症有:血管内膜剥离、血肿、血管痉挛、血管栓塞、假性动脉瘤、动静脉漏、血管破裂、造影剂注入血管外等。     

自体骨膜体内培养移植修复成年后关节软骨缺损的超微结构观察

滑膜关节软骨缺损的修复迄今仍属骨科领域的难题。尤其是机体成年后 ,其修复效果不佳。我们在实验中采用了自体骨膜局部剥离 ,原位激活 ,体内培养和延迟游离移植的方法 ,修复成年机体的关节软骨缺损 ,并与目前常用的直接游离移植法进行超微结构比较 ,观察其修复效果。材料与方法选用健康中国白兔 30只 ,成年兔 (月龄 2 8～ 32月 ,为成年期 ) 2 0只 ,幼兔 (月龄 4～ 6月 ,为生长发育期 ) 1 0只 ,以单侧膝关节为单位分三组。Ａ组 :成年兔骨膜直接游离移植组 2 0侧 (左膝 )。Ｂ组 :成年兔骨膜体内培养移植组 2 0侧 (右膝 )。Ｃ组 :幼兔骨膜直接…     

竹红菌素修饰纳米脂质微泡联合LED光源照射对人舌癌细胞Tca8113的作用的实验研究

目的:本实验自制竹红菌素修饰的脂质微泡,联合LED光源对人舌癌细胞Tca8113进行光动力处理后观察细胞.方法:常规培养,取对数生长期的舌癌细胞Tca8113,机械振荡法制备竹红菌素修饰的脂质微泡,联合LED光源对细胞进行光动力治疗,MTT法检测细胞存活率,并用流式分析仪分析其促凋亡作用.结果:MTT法和流式细胞仪显示竹红菌素修饰的脂质微泡联合LED光源照射对Tca8113人舌癌细胞有明显凋亡现象,且在一定浓度范围和光照能量密度范围内,其凋亡作用与HB微泡浓度和能量密度呈正相关.结论:竹红菌素修饰的纳米脂质微泡联合LED光源光动力疗法对人舌癌细胞Tca8113有促凋亡抑制作用.     

激光——血卟啉实验性治疗眼视网膜母细胞瘤

激光-血卟啉对眼部浅表肿瘤已显示出其一定的疗效,并便于观察。对占眼内肿瘤第一位的视网膜母细胞瘤,国外已在实验及临床方面获得了某些成功,我院在1983年对5例视网膜母细胞瘤进行了激光-血卟啉治疗,并详细观察了其临床反应及病理改变。现将初步结果报告如下: (一)、材料及方法采用国产血卟啉,系北京制药工业研究所产品,按每公斤体重2.5毫克计算,注射前行皮肤划痕试验阴性后,再行静脉注射,注射后     

调脏舒秘合剂小鼠急性毒性实验研究*

摘 要:目的 探讨调脏舒秘合剂口服给予对小鼠的急性毒性。方法 将昆明小鼠随机均分成对照组、常量组和极量组3组。灌胃给药,药物剂量按照小鼠体重20.8 g·kg-1和104 g·kg-1灌胃。于24 h内重复给药2次。观察记录14 d内小鼠体重、精神状态、活动情况、饮食量、排泄物的变化。Elisa检测肝功指标谷丙转氨酶（glutamic-pyruvic transaminase,ALT）和谷草转氨酶（glutamic-oxalacetic transaminase,AST）,肾功指标尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）和肌酐（creatinine,CRE）。HE染色法观测小鼠肝、肾、脾组织、结肠病理变化。结果 与对照组相比,常量组和极量组小鼠体重无明显变化,外观、精神状态、饮食、排泄物、一般情况均正常。解剖肉眼观小鼠肝、肾、结肠、脾,均未见明显改变,HE染色显示各组织无明显病理改变。肝功和肾功检测发现与对照组相比常量组和极量组无明显变化。结论 调脏舒秘合剂在极量104 g·kg-1的情况下未引起小鼠中毒性损伤。     

骨髓间充质干细胞在特定微环境中自然分组向成骨细胞和内皮细胞分别分化的可行性研究

目的:观察骨髓间充质于细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在特定的微环境中是否具有自然分组向成骨细胞和内皮细胞(endothelial cell,EC)两种不同细胞同时分化的可能.方法:将BMSCs采用成骨诱导剂和成内皮细胞诱导剂以1:1的比例混合培养12天.倒置显微镜和HE染色观...     

FTY720抑制小鼠植骨气囊模型中聚乙烯磨损颗粒诱导的骨溶解效应

目的：在小鼠植骨气囊动物模型中,观察外源性FTY720（Hngolimod,芬戈莫德）对骨溶解的抑制作用。方法：构建小鼠植骨气囊模型,将构建好气囊模型的小鼠分成4组：空白组（气囊内注人生理盐水、腹腔注射DMSO）,FTY720组（气囊内注入生理盐水、腹腔注射FTY720）,聚乙烯颗粒组（气囊内注入聚乙烯颗粒、腹腔注射DMSO）,聚乙烯颗粒＋FTY720组（气囊内注入聚乙烯颗粒、腹腔注射FTY720）。4周后处死小鼠后取气囊组织进行HE染色观察炎症反应和炎症细胞渗出情况,取组织匀浆行Elisa法检测气囊组织中IL-6和TNF-α浓度、取骨组织行电镜扫描观察骨片吸收情况,取组织匀浆行RT—PCR检测破骨细胞相关基因抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）mRNA表达水平。结果：①HE染色后炎症细胞渗出量,聚乙烯颗粒＋FTY720组（4892±457）与聚乙烯颗粒组（4931±572）比较无统计学差异（P〉0．05）,[TY720组（2013±375）与空白组（2151±310）比较无统计学差异（P〉0,05）;含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组（P〈0．05）。②Elisa法检测炎症因子（IL-6、TNF-α）浓度,聚乙烯颗粒＋FTY720组[（130．13±3．22）、（129．22±5．02）]与聚乙烯颗粒组[（149．22±6．09）、（140．52±2．68）]比较无统计学差异（P〉0．05）;FTY720组[（68．24±2．83）、（82．88±5．34）]与空白组[（69．51±2．31）、（74．15±4．64）]比较没有统计学差异（P〉0．05）;含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组（P〈0．05）。③扫描电镜检测骨片吸收面积与视野面积百分比,聚乙烯颗粒＋FTY720组[（10．21±1．78）％]低于聚乙烯颗粒组[（17．79±2．56）％],FRY720组[（1．82±1．37）％]低于空白组[（6．27±2．11）％];并且含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组（P〈0．05）。④破骨细胞相关基因TRAPmRNA表达量,聚乙烯颗粒＋FTY720组（0．53±0．04）低于聚乙烯颗粒组（0．74±0．05）,FTY720组（．22±0．03）低于空白组（0．38±0．04）;而含有聚乙烯颗粒组高于无聚乙烯颗粒组（P〈0．05）。结论：在小鼠植骨气囊动物模型中,FTY720能有效抑制聚乙烯颗粒诱导的局部骨溶解作用。     

超声微泡对pEGFP质粒转染小鼠损伤面神经的促进作用

目的：探讨超声微泡介导基因转染面神经的可行性及有效性。方法：建立小鼠面神经损伤模型,以增强型绿色荧光蛋白质粒（pEGFP）为标记基因。将48只小鼠随机分为6组：空白组（A组）、脂质体＋质粒组（B组）、微泡＋质粒＋超声组（C组）、微泡＋质粒组（D组）、超声＋质粒组（E组）、单纯质粒组（F组）。将小鼠面神经损伤后,局部注射...     

Liver‐Specific and Echogenic Hyaluronic Acid Nanoparticles Facilitating Liver Cancer Discrimination

With the increasing demand for instant real‐time ultrasound (US) imaging of a specific organ, target‐specific and long‐circulating ultrasound contrast agents are of special interest. A new species of echogenic hyaluronic acid nanoparticles is presented as an ultralong‐acting, liver‐specific, US contrast agent that is distinct from conventional gas‐filled microbubbles. Using an oil‐in‐water (O/W) emulsification method, bioinert and hydrophobic perfluoropentane (PFP) is encapsulated as an ultrasound gas precursor into hyaluronic acid nanoparticles (HANPs) using hydrophobic interactions. HANPs are formulated by self‐assembly, with amphiphilic hyaluronic acid‐5β‐cholanic acid (HA‐CA) conjugating in aqueous conditions. The resulting echogenic PFP‐encapsulated HANPs (Echo‐NPs) show solid nanostructures, differentiated from core‐empty conventional microbubbles, and exhibiting outstanding physical properties as an ultrasound contrast agent. They are more stable and robust echogenic solid bodies with an in vivo favorable hydrodynamic size and because PFPs vaporize gradually, their expansion process is very slow in body conditions. After several systemic circulations, echo‐NPs generated intense and ultralong echo signals for US imaging at the target site. The echogenic properties of Echo‐NPs show a significantly increased half‐life and echo persistence, compared with conventional microbubbles. The results clearly show that echo‐NPs outperform conventional microbubbles in terms of both physical and echogenic in vitro and in vivo properties.     

Lipoplex‐Loaded Microbubbles for Gene Delivery: A Trojan Horse Controlled by Ultrasound

Cationic poly(ethylene glycol)ylated (PEGylated) liposomes are one of the most important gene transfer reagents in non‐viral gene therapy. However, the low transfection efficiencies of highly PEGylated lipoplexes currently hamper their clinical use. Recently, ultrasound has been used in combination with microbubbles to enhance the uptake of genes in different cell types. However, the gene transfer efficiency still remains low in these experiments. To overcome the limitations of both techniques, we present the attachment of PEGylated lipoplexes to microbubbles via biotin–avidin–biotin linkages. Exposure of these lipoplex‐loaded microbubbles to ultrasound results in the release of unaltered lipoplexes. Furthermore, these lipoplex‐loaded microbubbles exhibit much higher transfection efficiencies than “free” PEGylated lipoplexes or naked plasmid DNA (pDNA) when combined with microbubbles and ultrasound. Interestingly, the lipoplex‐loaded microbubbles only transfect cells when exposed to ultrasound, which is promising for space‐ and time‐controlled gene transfer. Finally, this novel Trojan‐horse‐like concept can also be exploited to achieve the ultrasound‐triggered release of nanoparticles containing other therapeutic agents such as anticancer drugs.     

地塞米松与血管内皮生长因子共同促进骨髓间充质干细胞形成毛细血管样结构的研究

目的：观察骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells,BMSCs）在地塞米松（dexamethasone,DEX）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）组成的培养液中是否能形成毛细血管样结构。方法：将BMSCs在加入DEX（10^-8mol／L）和VEGF（10m）形成的微环境中培养12天,采用光镜和透射电镜观察血管样结构的形成情况;将BMSCs培养12天后与海藻酸钠凝胶混合后移植入Wistar大鼠体内让其继续生长,10天后取材,采用组织切片HE染色观察血管的生成情况。结果：透射电镜可观察到数个细胞通过紧密连接围成一个环状、类似于血管样结构;组织切片HE染色显示生成了原始血管腔。结论：DEX和VEGF形成的微环境可以使BMSCs分化后形成毛细血管样结构,并在活体动物体内进一步形成原始血管腔。为骨组织工程化血管形成提供了一条新的途径。     

Nanosonosensitizer-Augmented Sono-Immunotherapy for Glioblastoma by Non-Invasive Opening of the Blood–Brain Barrier

The presence of blood–brain barrier (BBB) that limits effective penetration of therapeutics is the main reason for poor outcomes of glioblastoma (GBM) treatment. Ultrasound (US) combined with microbubbles (MBs) can precisely disrupt the tight junctions of brain endothelial cells, thus creating “acoustic pores” and non-invasive opening the BBB. Here, chitosan oligosaccharide (COS) is conjugated with a sonosensitizer protoporphyrin IX (PpIX) and an immune-enhancing adjuvant Poly(I:C) via electrostatic adsorption, and cross-linked with a tumor-targeting molecule hyaluronic acid (HA) affording nanosonosensitizers HA-Poly(I:C)/COS-PpIX (abbreviated as “HP/CP” NSs). HP/CP NSs can target and penetrate GBMs, and trigger reactive oxygen species production upon US, simultaneously causing mitochondrial dysfunction and DNA damage. Tumor-associated antigens released by sonodynamic therapy-induced immunogenic cell death and loaded Poly(I:C) form an in situ vaccine together to potentiate antitumor immune responses. In orthotopic GBM mice models, the HP/CP+US treatments prolong mice survival, enhance cytotoxic T-lymphocytes infiltration, and activate peripheral immune circulation. Besides, HP/CP NSs possess favorable biosafety profiles. Collectively, this study sheds light on the application of HP/CP NSs for synergistic sono-immunotherapy of GBMs after non-invasive opening of the BBB.     

脂肪肝超声诊断与胆囊结石的相关性分析

目的:分析研究脂肪肝与胆囊结石的相互关系.方法:超声检查3459名到本院体检中心的事业单位人员,按脂肪肝及结石的诊断标准检查其发病情况并进行研究分析.结果:受检的3459名人员中,脂肪肝患病率为26.63%,胆囊结石患病率为8.44%,脂肪肝男性患病率明显高于女性(P<0.01).根据超声检查结果将受检者分为脂肪肝组和...