狼疮性肾炎肾组织细胞胞浆内异常超微结构

对２４例狼疮性肾炎肾穿刺标本，着重在电镜下观察肾组织细胞胞浆内两种和内质网有关的异常超微结构。结果１８例发现管网状结构（ＴＲＳ），其中１０例同时发现圆柱状对合池（ＣＣＣ）。ＴＲＳ常见于肾组织毛细血管内皮细胞，该处的ＴＲＳ与疾病的活动性似无密切联系。ＣＣＣ多见于间质中的单核／巨噬细胞和淋巴细胞，和疾病活动性、肾间质免疫沉着均有密切联系。本文还对ＣＣＣ的形态变化和形成过程进行描述，指出ＴＲＳ和ＣＣＣ均     

两种蛋白在大鼠睾丸间质细胞内吞途径的研究

两种蛋白在大鼠睾丸间质细胞内吞途径的研究陈晓群，张蕙心，汤雪明（上海第二医科大学，上海２０００２５）细胞内吞是细胞从外界摄取大分子的一种重要方式。对于不同的大分子，细胞采取不同的方式内吞，并通过不同的途径对它们进行处理。本研究通过观察人绒毛膜促性腺激...     

激光扫描共聚焦显微镜和Fluo—3／AM检测细胞内游离钙

利用细胞培养技术，Ｃａ２＋敏感荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ标记细胞，激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度（〔Ｃａ２＋〕ｉ）的变化。结果显示细菌脂多糖（ＬＰＳ）可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ升高，ＬＰＳ的作用可被维拉帕米部分抑制。本实验表明激光扫描共聚焦显微镜结合Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ能准确迅速地检测单个或多个贴壁粘附细胞胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ的动态变化，并同步观察细胞的形态及其荧光分布情况。     

低强度532nm绿激光照射对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的:观察低强度532nm激光对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。方法:用不同功率和照射时间的532nm激光辐照小鼠腹腔巨噬细胞,采用中性红吞噬实验测定巨噬细胞的吞噬能力。结果:在适当的激光功率和照射时间下巨噬细胞的吞噬能力有显著性增强。结论:低强度532nm激光照射对小鼠腹腔巨噬细胞有激活作用,可增强其免疫活性。     

大鼠肺巨噬细胞iNOS电镜细胞化学定位显示法

目的;对大鼠肺泡巨噬细胞NOS进行细胞内定位显示。方法：由大鼠支气管肺泡灌洗液中获取肺泡巨噬细胞,富集制备成单层细胞爬片。在37℃,5％CO2的二氧化碳培养箱中,用LPS（1g/L）刺激24h以诱导肺泡巨噬细胞NOS表达。采用NADPH－d电镜细胞化学术对肺泡巨噬细胞NOS进行定位显示。结果：活化的AM胞浆内可见大量颗粒状电子密度沉淀。结论：NADPH－d电镜细胞化学方法所显示的AM诱导型NOS是胞浆酶。     

两种波长低强度激光照射巨噬细胞的生物效应比较

目的研究相同照射条件下的低强度532nm和650nm激光照射小鼠腹腔巨噬细胞的生物效应.方法用相同功率和照射时间的532nm和650nm激光辐照小鼠腹腔巨噬细胞,采用中性红吞噬实验测定巨噬细胞的吞噬能力.结果相同功率的两种波长激光在适当的照射时间下巨噬细胞的吞噬能力有显著性增强,巨噬细胞吞噬能力随照射时间的变化规律相似.结论相同照射条件下,低强度532nm和650nm激光照射巨噬细胞的生物效应相似,都可以激活小鼠腹腔巨噬细胞,增强其免疫活性,只是532nm激光的效应略强一些.     

510.6 nm激光对脐血造血细胞的增殖作用

介绍了５１０．６ｎｍ激光对造血细胞的刺激作用,促使颗粒－巨噬细胞集落形成单位（ＧＭ－ＣＦＵｃ）增多。从人脐带血中分离制备的有核细胞中,加入集落刺激因子（ＣＳＦ）后进行体外培养,形成的ＧＭ－ＣＦＵｃ为１８．６±１２．６／１０４;如果加入的ＣＳＦ是经激光照射后的细胞制成的,其ＧＭ－ＣＦＵｃ为４０．５±２０．２／１０４;如果先用激光照射脐带血的有核细胞,在培养时加入的ＣＳＦ是未经激光照射后的细胞制成的,也有增殖效应,ＧＭ－ＣＦＵｃ为３６．５±１８．５／１０４;如果脐带血中的有核细胞和制备ＣＳＦ的细胞都用激光照射,发现ＧＭ－ＣＦＵｃ明显增多,其值为５７．４±４１．２／１０４,是未经激光处理者的三倍多     

光动力疗法对巨噬细胞再极化的作用研究

目的:研究光动力疗法对M2巨噬细胞再极化的影响.方法:用白介素4(IL-4)和白介素13(IL-13)处理小鼠RAW264.7巨噬细胞,构建M2型巨噬细胞模型.光动力处理M2型巨噬细胞,WB、RT-PCR、免疫荧光检测M1/M2巨噬细胞标志物表达,以CD86、iNOS、TNF-α、IL-6为M1型巨噬细胞标记物,Arg...     

ALA-PDT通过NF-kB通路调节巨噬细胞极化状态

目的:探讨ALA-PDT对巨噬细胞极化的影响,并探讨相关机制。方法:采用免疫荧光、PCR、WB等试验检测巨噬细胞极化特征蛋白CD86、CD206、iNOS、ARG-1的表达水平变化,NF-kB激活-核转运检测试剂、WB试验检测NF-kB通路激活情况,WB试验检测抑制NF-kB通路后CD86、iNOS蛋白表达水平。结果:免疫荧光、PCR、WB实验结果显示,PDT处理后,巨噬细胞M1特征蛋白CD86、iNOS表达水平增高,M2特征蛋白表达水平下降(P<0.05)。NF-kB激活-核转运检测、WB实验结果表明PDT处理后,NF-kB通路被激活。给予NF-k B通路抑制剂处理,PDT处理后巨噬细胞M1特征蛋白CD86、iNOS表达水平增高现象被抑制。结论:ALA-PDT通过激活NF-kB通路促进巨噬细胞向M1极化。     

大鼠Leydig细胞中细胞内吞和自体吞噬两条途径的交汇点

目的　细胞内吞和自体吞噬是动物细胞中向溶酶体输送物质的两条主要途径 ,前者摄入细胞外物质 ,后者降解细胞内组分。对于内吞途径中早期和晚期内体的结构和功能以及内吞与自体吞噬两条途径的交汇点目前仍未清楚[1- 4] 。本研究以易于观察到自体吞噬过程的正常成年大鼠睾丸间质细胞 ( Leydig细胞 ) [5- 6 ] 为材料 ,考察细胞内吞和自体吞噬活动 ,分析这两条途径的发展过程及其相互关系 ,着重探讨两条途径交汇的位置。方法　雄性 Wistar大鼠按示踪剂和内吞时间分组。用伴刀豆球蛋白 A( Con A)、麦胚凝集素( WGA)和人绒毛膜促性腺激素 ( h…     

植物细胞膜受体胞吞及其功能的研究进展

细胞膜受体蛋白在细胞应对外部环境变化以及感知相邻细胞信号过程中发挥重要作用.当细胞膜受体蛋白受到配体刺激之后,依赖不同的胞吞机制,形成了两种主要的胞吞途径:网格蛋白介导的胞吞和不依赖网格蛋白介导的胞吞.通过不同胞吞途径进入细胞的细胞膜受体蛋白,会在不同内涵体间转运,从而引发不同的内涵体信号,然后一部分膜受体蛋白重新循环到细胞膜,另一部分则转运到溶酶体或液泡进行降解,最终影响植物的生长发育和免疫等过程.由于膜受体介导的胞吞作用和内涵体信号受到越来越多的关注,因此本文对细胞膜受体介导的胞吞机制及其在植物生长发育和抗病中的作用进行了综述,以期为今后系统开展其功能研究提供理论依据.     

低功率激光对细胞质膜通透性及细胞功能的影响

目的:探索低功率激光对细胞质膜通透性及细胞功能的影响。方法:以波长为632.8nm,功率密度为5.4mW/cm~2的氦氖激光照射人外周血淋巴细胞15、30、60分钟,并采用钙荧光指示剂Fura—2/Am定量测试法检测淋巴细胞内游离钙浓度和质膜Ca~(2+)—Mg~(2+)—ATP酶活性变化。结果:照射后淋巴细胞内游离钙浓度明显低于正常(P<0.05);同时细胞膜Ca~(2+)—Mg~(2+)—ATP酶活性增加(P<0.05);而且照射后细胞内游离钙浓度降低与质膜上Ca~(2+)—Mg~(2+)—ATP酶的激活呈负相关。结论:低功率激光照射激活细胞膜Ca~(2+)—Mg~(2+)—ATP酶活性,使细胞膜对钙通透性发生变化,且影响到细胞内Ca~(2+)贮存,造成细胞膜通透性和细胞功能的改变。     

睾丸间质细胞内体的细胞化学研究

电镜细胞化学实验结果表明，在睾丸产是质细胞中早期内体在形态上表现为一种形状不规则的低密度多泡体，其管状突起可能含有回收到细胞表面的受体。晚期内体在形态上表现为高密度多泡体，接受来自高尔基体的含有溶酶体听运输小泡，呈不同程度的ＣＭＰ酶阳性反应，最后成熟成为溶酶体。     

Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响

目的:探讨Presenilin1基因对心肌细胞肌浆网钙容量的影响.方法:本实验以AAV-9为载体构建心肌特异性PS1-shRNA重组腺相关病毒,通过尾静脉注射PS1-shRNA重组腺相关病毒干扰大鼠心肌组织中Presenilin1基因的表达,并利用激光扫描共聚焦显微镜检测并记录心肌细胞肌浆网钙容量及舒张期自发钙释放事件的变化;同时,采用western blot技术分析各组大鼠心肌组织中雷诺丁受体及钙泵表达水平的改变.结果:与对照组相比,PS1-shRNA重组腺相关病毒干预组大鼠心肌细胞肌浆网钙容量显著降低,自发钙释放事件明显增加;雷诺丁受体表达水平略降低,钙泵表达水平无显著性变化.结论:Presenilin1基因表达水平降低会引起心肌细胞钙泄漏,从而造成心肌细胞肌浆网钙容量降低.     

Application of real-time confocal laser scanning microscopy to observe living cells in tissue specimens

Fluorescence microscopy imaging has developed into an important tool for the study of cell structure and function in cell biology. This non-invasive technique permits the characterization, localization and qualitative quantification of free ions, messengers, pH, voltage and other molecules in living cells. The regulation of cytosolic Ca2+ homeostasis is essential for cells. However, most investigations have used cultured or isolated cells as an experimental model and, consequently, provide only limited insight into the mechanisms that operate in tissue in situ. More useful information could be obtained by studying intact tissue specimens. The calcium dynamics of some tissue specimens, such as arteriole smooth muscle cells, supra cervical ganglia and peripheral nerve bundles, were analysed in this study. Real-time confocal microscopy revealed that individual cells exhibited different [Ca2+]i dynamics and the responses to transmitters/modulators were heterogeneous. It is important that the confocal microscopes have good detection performances, due to the reduction of stray light. We conclude that real-time confocal microscopy is a useful tool for investigating structural and functional changes of cells in living tissues, although suitable tissue-preparation is important for these measurements.     

小鼠精子获能及顶体反应过程中Ca^2＋及Ca^2＋—ATPase的研究

利用焦锑酸钾电镜定位Ｃａ＾２＋的技术，及铅捕获法定位细胞Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ的技术，研究小鼠了获能及顶体反应过程中Ｃａ＾２＋及Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ的变化，结果表明，获能前精子顶体囊外缘有Ｃａ＾２＋分布，顶体膨胀时，Ｃａ＾２＋消失，开始顶体反应时，顶体外膜，顶体囊泡及顶体后区有Ｃａ＾２＋分布，顶体反应后，仅顶体后区有Ｃａ＾２＋分布精子尾部线粒体及轴丝始终有Ｃａ＾２＋分布。     

植物细胞钙离子检测与成像技术研究进展

钙离子是一种重要的第二信使,参与调节植物多种生理和发育过程.胞内钙离子呈现复杂的时空动态变化,只有实时捕获钙离子在植株整体水平以及亚细胞水平的变化,才能深入理解钙信号的重要功能.过去几十年中,人们在钙离子检测与成像技术方面进行了大量探索,本文总结了近年来植物科学研究中常用的钙离子检测与成像技术,着重介绍了化学荧光探针和基于荧光蛋白钙离子探针的原理、特点、浓度计算方法、在细胞质以及细胞器钙离子检测与成像中的应用等,并总结了化学荧光探针的装载方法.     

体外冲击波对肝细胞及其质膜Na^＋—K^—ATP酶活性的影响

体外冲击波碎石术对胆石症病人进行治疗的过程中对肝细胞的超微结构和功能有无不可逆的损伤是值得探讨的。用电镜酶细胞化学方法结合电镜Ｘ射线显微分析法对冲击波作用后肝细胞质膜Ｎａ＾＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活进行检测，结果显示：施冲击波１５分钟后，肝细胞质膜Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶的活性见下降，４５分钟降至最低，随后逐渐恢复，２个月时已完全恢复接近正常对照，与相同时程肝细胞微结构变化对比，酶活性受损较早，恢复亦     

兔骨骼肌ryanodine受体/钙释放通道的AFM研究

Ryanodine受体（RyR)是位于细胞内质网膜上的钙释放通道,在肌细胞的兴奋－收缩偶联中发挥重要作用。RyR难于结晶,以往主要是用电镜和计算机三维重组相结合的方法来获得其高级结构的信息。由于RyR结构庞大,易于水解,在提取的过程中需要加入外源性磷脂以保护其结构,而磷脂的存在对电镜的分辨率有影响,所以电镜研究的RyR在提 过程中一般不添加外源性磷脂,这样得到的结构信息并没有反映RyR在生理状况下的真实情况,我们用原子力显微镜（AFM）对RyR进行研究,经过了空气中RyR成像,液体中RyR成像,重组到脂双层中的RyR研究几个阶段,提供了RyR在接近生理条件下的结构信息,并为进一步研究其结构和功能的关系打下了基础。     

Extracellular Ca2+ sensitivity of mGluR1alpha associated with persistent glutamate response in transfected CHO cells

We previously reported that the metabotropic glutamate receptor 1alpha (mGluR1alpha) can be activated not only by glutamate but also by extracellular Ca2+ (Ca2+o), and that Ser 166 in the extracellular domain determines the sensitivity to Ca2+o. In the present study, we investigated by intracellular Ca2+ (Ca2+i) imaging, the effect of Ca2+o on the glutamate responses of Chinese Hamster Ovary (CHO) cells stably expressing mGluR1alpha wild-type (CHO-wt). As a negative control, we carried out similar experiments using CHO cells expressing Ser166Asp mutant of mGluR1alpha (CHO-S166D) or the substance P receptor (CHO-SPR), which were not activated by Ca2+o application. We observed a remarkable prolongation of the duration of the glutamate response in CHO-wt cells in a Ca2+o concentration dependent manner. In CHO-S166D cells and CHO-SPR cells, only a small sustained component of the glutamate response was observed in the presence of Ca2+o. These sustained components were blocked by SKF-96365, a blocker of receptor-operated Ca2+-influx. Thus, it was concluded that the Ca2+o-sensing function of mGluR1alpha-wt induced the persistent opening of the receptor-operated Ca2+-permeable channels, probably by persistent activation of the receptor by glutamate. We additionally observed that the dose-response relationship of CHO-S166D and CHO-SPR shifted significantly by changing Ca2+o concentration, i.e. Ca2+o was required to maintain the normal ligand responses of these receptors.