苹果多酚提取物对酪氨酸酶的抑制作用

分别以L-酪氨酸和L-多巴(二羟基苯丙氨酸)为底物,在37℃,pH=6.8的磷酸盐缓冲体系中,测定了苹果多酚提取物对酪氨酸酶单酚酶活性和二酚酶活性的抑制效应。结果表明,苹果多酚提取物可有效抑制酪氨酸酶单酚酶活性,其IC50为1.96 mg·L-1。同时,苹果多酚提取物还是较强的二酚酶抑制剂,在实验质量浓度范围(0.012 5~1.75 g·L-1)内,苹果多酚提取物对酪氨酸酶二酚酶的抑制率最高可达73.66%,IC50为36.28 mg·L-1。L-多巴氧化体系动力学分析结果表明,苹果多酚提取物在低质量浓度下对酪氨酸酶表现为非竞争性抑制类型,而在高质量浓度下则表现为混合性抑制类型。     

藏荆芥提取物对酪氨酸酶活性及其动力学研究

以L-酪氨酸和L-多巴为底物,采用酶促反应动力学方法研究藏荆芥提取物对酪氨酸单酚酶和二酚酶活性的影响以及抑制动力学。结果表明,藏荆芥提取物对酪氨酸单酚酶和二酚酶均有抑制作用,单酚酶和二酚酶活力下降50%的藏荆芥提取物质量浓度(IC_(50))分别为0.1388和0.5332g/L。藏荆芥提取物对酪氨酸二酚酶的抑制作用属于可逆过程,Lineweaver-Burk图显示其作用类型表现为竞争性抑制,抑制常数为504.846mg/L。藏荆芥提取物对酪氨酸酶有明显的抑制作用,具有开发成天然酪氨酸酶抑制剂的潜力。     

葛根黄酮类物质美白作用的研究

通过研究葛根黄酮类物质对酪氨酸酶的抑制作用和抗氧化作用探索葛根黄酮类物质的美白作用机理。实验结果表明,葛根黄酮类物质对酪氨酸酶的抑制作用明显强于熊果苷,其半抑制浓度(IC50)为1.72 g·L-1。葛根黄酮类物质的总还原能力较强,对超氧阴离子自由基、.OH和DPPH.均有一定的清除作用,对超氧阴离子自由基和DPPH.的IC50分别为0.98和0.81 g·L-1。     

牡丹花水提液清除羟自由基及抑制酪氨酸酶活性的研究

采用水提法提取牡丹花制得牡丹花水提液,以Fenton反应产生羟自由基,比色法检测牡丹花水提液清除羟自由基的能力,分别以L-酪氨酸和L-多巴为底物,在30℃,p H=6.8的磷酸盐缓冲体系中测定牡丹花水提液对酪氨酸酶单酚酶活性和二酚酶活性的抑制效应。实验结果表明,牡丹花水提液可有效清除羟自由基,牡丹花水提液质量浓度为1.00 g·L-1时,自由基清除率达91.67%;牡丹花水提液对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有良好抑制作用,其IC50分别为0.015和0.210 g·L-1。牡丹花水提液对二酚酶的抑制作用表现为非竞争性抑制,米氏常数(Km)为0.4 mmol·L-1。     

薰衣草花提取物对酪氨酸酶的抑制作用研究

以薰衣草花为原料,经体积分数为70%乙醇提取,将提取物浓缩成浸膏后用水分散,再依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取。以L-DOPA为底物测定石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取部分及萃取后水相部分对酪氨酸酶的抑制作用。实验结果表明,薰衣草花水相萃取物对酪氨酸酶有较强的抑制作用,IC50为0.96 g/L,动力学研究表明,薰衣草花水相萃取物对酪氨酸酶的抑制作用是可逆的,其抑制类型为线性混合型抑制,对游离酶和酶-底物络合物的抑制常数分别为3.00和12.00 g/L。     

肉桂酸抑制酪氨酸酶催化反应的动力学研究

在30℃,pH=6.8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中,采用酶动力学方法研究了肉桂酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制动力学.实验结果表明,肉桂酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有良好抑制作用,对单酚酶和二酚酶活力的相对抑制率达到50%的肉桂酸浓度(IC50)约分别为0.37 mmol.L-1和0.61 mmol.L-1,比熊果苷抑制二酚酶活性的IC50值5.3 mmol.L-1小得多.肉桂酸能明显延长单酚酶的迟滞时间,0.4 mmol.L-1肉桂酸能使迟滞时间由1.1 min延长至2.3 min.Lineweaver-Burk图显示肉桂酸对二酚酶的抑制作用表现为非竞争性抑制,表观米氏常数(Km)为0.68 mmol.L-1,抑制常数(Kl)为058 mmol.L-1.     

睡莲花提取物对酪氨酸酶的抑制作用及其动力学研究

采用紫外分光光度计测定多巴醌,得到了睡莲花提取物对酪氨酸酶的抑制率;以L-酪氨酸为底物,采用酶动力学的方法研究了睡莲花提取物对酪氨酸酶单酚酶活性的抑制作用及抑制机制。结果表明,睡莲花提取物对酪氨酸酶具有明显抑制作用,其中30%乙醇洗脱部位抑制效果最好,其对酪氨酸酶单酚酶活性的抑制作用表现为可逆反竞争型抑制;50%乙醇洗脱部位对酪氨酸酶单酚酶活性的抑制作用表现为可逆性抑制,低浓度时为混合型,高浓度时为竞争型。     

羟基甲氧基苯甲醛在化妆品中起增白作用的研究

采用酶学动力学方法研究2-羟基-4-甲氧基苯甲醛(HMB)对酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力的抑制效应.结果表明,HMB对酪氨酸酶单酚酶的效应只表现对稳态活力有明显的抑制作用,但对酶作用的迟滞时间没有影响;随着抑制剂浓度增大,单酚酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)为0.352 mmol·L-1.HMB对二酚酶的抑制作用表现为可逆过程,IC50为0.164 mmol·L-1;抑制作用机理研究表明HMB是一种混合型抑制剂,其抑制常数KI和KIS分别为0.131 mmol·L-1和0.253 mmol·L-1.通过对HMB抑制酪氨酸酶机理的研究,阐明HMB作为化妆品添加剂的增白作用机理.     

当归提取物对酪氨酸酶的抑制作用

以乙醇为提取剂,用高压均质技术提取当归,采用酶动力学方法研究了当归提取物对酪氨酸酶活力的抑制效应。结果表明,当归提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,相对抑制率达到50%的当归提取物质量浓度(IC50)分别约为0.32 g/L和0.58 g/L,比熊果苷抑制二酚酶活性的IC50值1.44 g/L有效得多。Lineweaver-Burk图显示当归提取物对二酚酶的抑制作用表现为竞争性抑制,对酪氨酸酶的抑制常数(KI)为0.24 g/L。     

奥扎格雷对蘑菇酪氨酸酶的抑制机理研究

以L-DOPA为底物,抗血小板凝聚药奥扎格雷对酪氨酸酶具有很强抑制性,导致酶活力下降50%的奥扎格雷浓度(IC50)为3.45 mmol/L。奥扎格雷对酪氨酸酶抑制作用表现为可逆的竞争性和反竞争性混合型的抑制。按邹承鲁[1]所介绍的酶失活过程中的底物反应动力学方法测定奥扎格雷对酪氨酸酶的抑制作用动力学,1.0 mmol/L的奥扎格雷对酪氨酸酶和酪氨酸酶-底物复合物的抑制作用动力学常数分别为87.28和66.07μmol/L。     

二葡糖基没食子酸的合成及其性能研究

以没食子酸甲酯和五乙酰基葡萄糖为原料,经过乙酰化反应、成盐、酸化等过程合成了美白剂二葡糖基没食子酸,并通过IR,MS,¹H NMR和¹³C NMR确认了最终产物的结构。同时考察了美白剂二葡糖基没食子酸对酪氨酸酶活性的影响、酪氨酸二酚酶的抑制作用机制以及抗氧化能力。研究表明:以L-酪氨酸为底物时,二葡糖基没食子酸对酪氨酸单酚酶的半抑制浓度IC₅₀为1.46 mg/mL,以L-多巴为底物时,二葡糖基没食子酸对酪氨酸二酚酶的半抑制浓度IC₅₀为2.68 mg/mL,而且从Lineweaver-Burk图获得的抑制机理表明二葡糖基没食子酸对酪氨酸二酚酶的抑制作用表现为竞争性抑制,抑制常数K_m为2.43 mg/mL。没食子酸相比于同质量浓度下的V_max对DPPH自由基的清除效果更好,而二葡糖基没食子酸相比于同质量浓度下的V_c,其对DPPH自由基仍存在一定的清除作用。     

毛豆提取物的体外抗衰老活性研究

以毛豆为研究对象,采用超声波辅助水提取法对其进行提取,通过ABTS+·清除能力测试、DPPH·清除能力测试、胶原蛋白酶抑制能力测试、弹性蛋白酶抑制能力测试和晚期糖基化终产物AGEs的清除能力测试等方法,对毛豆提取物的体外抗衰老活性进行考察评估。结果显示,毛豆提取物具有良好的体外抗氧化和抗糖化活性:清除ABTS+·的IC50值为11.16 mg/mL,清除DPPH·的IC50值为11.77 mg/mL,清除AGEs的IC50值为3.21 mg/mL;对与皮肤衰老紧密相关的多种蛋白酶显示出很好的体外抑制活性:抑制胶原蛋白酶的IC50值为12.91 mg/mL,50mg/mL的毛豆提取物具有与阳性对照药物西维来司钠(50μmol/L)相当的抑制弹性蛋白酶的能力。以上结果表明,毛豆提取物具有较好的体外抗衰老活性。     

中药白芨提取物对酪氨酸酶的抑制作用

通过从水和乙醇中选取一种有效的提取剂,用回流法和超声波提取法提取中药白芨中的有效成分,分别以左旋多巴(L-DOPA)、邻苯二酚为底物,研究了白芨提取物对酪氨酸酶活性的影响。结果表明,白芨提取物对酪氨酸酶活性有抑制作用,66.7 mg/mL的超声波水提取物比醇提取物对酪氨酸酶有更为明显的抑制作用,其对酪氨酸酶的抑制率为62%,IC50值为28 mg/mL。     

香水莲花醇提取物对酪氨酸酶抑制作用的研究

以L-酪氨酸为底物,从马铃薯中提取酪氨酸酶,以熊果苷为阳性对照,采用比色法测定了香水莲花醇提取物对酪氨酸酶的抑制率。结果：香水莲花花托醇提取物、雄蕊醇提取物及总醇提取物的半数抑制浓度分别为0．12mg／mL、0．13mg／mL和0．48mg／mL,而阳性对照品熊果苷的半数抑制浓度为0．42mg／mL。表明,香水莲花花托醇、雄蕊醇提取物具有良好的抑制酪氨酸酶的作用,其效果优于熊果苷。香水莲花总醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用与熊果苷相当。     

火焰子生物碱对酪氨酸酶的抑制作用

以磷酸缓冲溶液为反应体系、以左旋多巴为底物,采用分光光度法研究了火焰子生物碱对马铃薯酪氨酸酶活性的影响.结果表明,火焰子生物碱对马铃薯酪氨酸酶有抑制作用,抑制作用随着浓度的增大而增强,当火焰子生物碱浓度为1.25 mg·mL-1时,抑制率达最大,为29.27%,导致酶活力下降一半所需的抑制剂浓度(IC50)为0.93 ...     

香草酸对酪氨酸酶催化活性的抑制作用

采用酶动力学方法研究了香草酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制效应。结果表明,香草酸对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的香草酸浓度(IC50)约分别为1.3 mmol/L和2.6 mmol/L。香草酸能明显延长单酚酶的迟滞时间,2 mmol/L香草酸能使迟滞时间由1.1 m in延长至4.7 m in。香草酸对二酚酶的抑制作用表现为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为1.76 mmol/L和8.57 mmol/L。     

荔枝壳提取物对酪氨酸酶的抑制作用

通过对酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率的测定,研究了荔枝壳粉的乙醇萃取液对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,酶抑制率达到50%(酪氨酸酶活力下降50%)时所需的澄清液中多酚的质量浓度为0.052 mg/mL。复合抑制剂的酶抑制作用的Lineweaver-Burk线特点的分析结果显示,荔枝壳粉提取物对酪氨酸酶的抑制作用不是单一成分的抑制作用,而可能是多种抑制成分共同作用的结果。     

苯乙基间苯二酚抑制黑色素形成的机理研究

采用药物替代法,分别阻断黑色素生成过程中的酶催化和非酶催化两个阶段,探究苯乙基间苯二酚抑制黑色素形成的作用机理。在p H=6.8的磷酸盐缓冲溶液中,分别以L-酪氨酸和L-多巴为底物,37℃反应后在475 nm处测定吸光度,研究苯乙基间苯二酚对酪氨酸酶催化反应进程的影响,计算抑制动力学参数;通过分子对接技术分析苯乙基间苯二酚抑制酪氨酸酶作用的分子机制。结果表明,苯乙基间苯二酚对黑色素生成过程中的酶催化反应具有抑制作用,是酪氨酸酶抑制剂;对非酶催化过程无影响;对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的半抑制浓度IC_(50)分别为0.28和31μmol/L;对酪氨酸酶二酚酶的抑制作用表现为非竞争性抑制,抑制常数K_m=1.1;分子对接结果显示,苯乙基间苯二酚与酪氨酸酶活性中心的MET A:280形成氢键,并伴有疏水作用。     

曲酸金属配合物的合成与酪氨酸酶抑制性能研究

曲酸(KA)与4种金属离子配位反应得到相应的曲酸金属配合物KA-Fe(Ⅲ),KA-Cu(Ⅱ),KA-Mn(Ⅱ)和KA-Zn(Ⅱ),采用红外光谱、差热-热重分析和紫外光谱对其金属配合物进行了结构表征,并进行了对酪氨酸酶的抑制作用研究。结果表明,KA-Fe(Ⅲ),KA-Zn(Ⅱ)和KA-Mn(Ⅱ)对酪氨酸酶的抑制效果显著,对应的IC50为25,18和62μmol·L-1(曲酸IC50为70μmol·L-1),根据抑制机理分析,该系列金属配合物的抑制类型属于非竞争性抑制。     

硫脲在酪氨酸酶催化中的抑制动力学

研究了硫脲对蘑菇酪氨酸酶活力的抑制效应。实验结果表明,硫脲与酪氨酸酶催化氧化产物醌反应,形成了无色的L-DOPA衍生物,从而阻断了多巴色素的形成。硫脲导致酪氨酸酶活力下降50%时的浓度(IC50)为1.37 mmol·L-1,在降低酶活的同时,硫脲能明显延长该酶的延滞时间,表现为不可逆反竞争性抑制。