咳嗽变异性哮喘与肺炎支原体感染的关系研究

目的分析咳嗽变异性哮喘(CVA)与肺炎支原体(MP)感染的关系。方法选择明确诊断的CVA患者50例为实验组,同时选择同期50例岁数相当的急性上呼吸道感染的患者为对照组。采用颗粒凝集法检测2组患者的MP-lgM。结果实验组MP-lgM的阳率为34.0%;对照组MP-lgM的阳性率为12.0%,2组比较差异有显著性意义(χ2=6.975,P<0.05)。实验组MP-lgM的滴度显著高于对照组(P<0.01)。结论 CVA与MP感染有高度关联性,建议CVA患者临床上应首先测定MP-lgM来除外MP的感染,阳性者给予抗MP治疗。     

ROC曲线分析人附睾蛋白4在卵巢癌的诊断价值

目的通过ROC曲线分析人附睾蛋白4(human epididymal protein 4,HE4)在卵巢癌的诊断价值。方法将107例卵巢疾病患者分为正常对照组(21例)、良性卵巢肿瘤组(20例)、Ⅰ-Ⅱ期卵巢癌组(14例)、Ⅲ期卵巢癌组(30例)、Ⅳ期卵巢癌组(22例)。分别对5组受试患者进行血清HE4水平测定和影像学检测,在灵敏性和特异性方面比较两者在卵巢癌诊断的价值;对各组患者血清HE4水平进行ROC曲线分析,评价血清HE4在卵巢癌诊断方面的价值。结果血清HE4水平检测在灵敏性上明显高于影像学检查,差异有统计学意义(P0.05),而特异性差异无统计学意义(P0.05),且血清HE4水平随着癌症恶性程度的增加而升高;ROC曲线线下面积AUG为0.912,具有较高的诊断价值。结论血清HE4水平检测在灵敏性上明显高于影像学检查,并且具有较好的特异性,可作为卵巢癌辅助检查手段,具有较高的临床诊断价值。     

肺功能分析及支气管舒张试验对早期诊断咳嗽变异型哮喘的临床意义

目的探讨肺功能分析及支气管舒张试验对早期诊断咳嗽变异型哮喘(CVA)的临床意义。方法对100例CVA病人进行肺功能监测及支气管舒张试验,监测试验前后肺功能的改善程度,所得数据进行统计学分析。结果将支气管舒张试验前后病人的肺功能测定值进行配对比较t检验,显示定量资料间的差异有显著性。结论 CVA病人的肺功能均有一定程度损伤,并可通过支气管舒张试验检测到肺功能的改善程度,对咳嗽变异型哮喘的早期诊断具有较大的临床意义。     

白三烯受体拮抗剂治疗咳嗽变异性哮喘临床观察

目的观察白三烯(LTs)受体拮抗剂治疗咳嗽变异性哮喘的临床疗效。方法将来我院就诊的80例咳嗽变异性哮喘病例分为治疗组和对照组各40例,对照组采用基础治疗,治疗组在基础治疗上加用白三烯(LTs)受体拮抗剂孟鲁司特钠(商品名:顺尔宁)进行治疗,对比其疗效。结果顺尔宁治疗组的治疗有效率达95%,对照组有效率仅为87.5%,治疗组治疗效果明显优于对照组(P<0.05)。结论白三烯受体拮抗剂治疗咳嗽变异性哮喘疗效确切,无明显副作用,值得推广使用。     

VEGF、CA125和HE4联合检测对子宫内膜异位症的诊断价值

目的:探讨VEGF、CA125和HE4在子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)患者血清中的表达及其临床诊断价值。方法:应用酶联免疫吸附法检测研究组35例EMT患者和对照组35例正常健康女性血清VEGF、CA125和HE4浓度,并对两组数值进行统计学分析。结果:研究组患者血清VEGF、CA125和HE4浓度明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);VEGF、CA125、HE4以及三种指标联合对EMT诊断的灵敏度分别为94.29%、68.57%、69.97%、84.29%,特异度分别为60.00%、82.86%、91.43%、97.14%,在ROC曲线下的面积分别为0.813、0.822、0.612和0.909。结论:EMT患者血清VEGF、CA-125和HE4具有显著变化,联合检测VEGF、CA-125和HE4对EMT的诊断有很高的敏感度和特异度,具有重要的临床价值。     

柯萨奇病毒A组16型实壳病毒颗粒与空壳病毒颗粒免疫原性的比较

目的比较柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CVA16)实壳病毒颗粒(full particle,FP)和空壳病毒颗粒(empty particle,EP)的免疫原性。方法以CVA16病毒株CVA16-L731感染Vero细胞,采用10层细胞工厂培养工艺培养病毒,收获液经离心纯化后,用甲醛灭活,获得灭活纯化的CVA16-L731 FP和EP。采用BCA法检测CVA16-L731 FP和EP的蛋白浓度,4%~12%SDS-PAGE、Western blot及透射电镜对CVA16-L731 FP和EP进行鉴定。以氢氧化铝为佐剂,分别以EP、FP、EP/FP为抗原,于第0、14、28天经后肢肌肉注射免疫BALB/c雌性小鼠,于0、7、21、35、49、63、77、91 d对小鼠进行眼眶采血。采用微量中和试验法检测免疫小鼠血清中和抗体滴度,ELISA法检测免疫小鼠血清特异性Ig G抗体滴度,母传抗体保护试验检测CVA16-L731 FP和EP的垂直保护效果。结果纯化后的CVA16-L731 FP和EP的蛋白浓度分别达到420和150μg/ml;CVA16-L731 FP可见4条相对分子质量分别约为34 000(VP1)、26 000(VP2)、24 000(VP3)和8 000(VP4)的条带,CVA16-L731 EP可见3条相对分子质量分别约为36 000(VP0)、34 000(VP1)和24 000(VP3)的条带;CVA16-L731 FP和EP的纯度均可达95%;CVA16-L731 VP1兔多抗可与FP及EP的VP1、CVA16-L731 VP2兔多抗可与FP-VP2及EP-VP0发生特异性免疫反应;CVA16-L731FP和EP分别为内部不可被磷钨酸负染的FP致密圆形颗粒和内部可被磷钨酸负染的黑色EP圆型颗粒。小鼠免疫试验结果显示,第1次免疫后各抗原免疫组小鼠血清中和抗体阳性率均为100%;第2次免疫后血清中和抗体滴度和血清特异性Ig G水平均显著升高;第3次免疫后血清中和抗体滴度均无明显变化,但血清特异性Ig G水平均明显升高;第3次免疫后的63 d内,血清中和抗体滴度均无显著变化。各抗原免疫组乳鼠存活率均为100%。结论CVA16-L731 FP和EP均能诱导小鼠持续产生较高水平的血清中和抗体和特异性Ig G抗体,且母传抗体可保护2日龄乳鼠抵抗CVA16-S315的致死性攻击,为CVA16疫苗的研制提供了实验依据。     

Al(OH)_3佐剂对不同抗原含量肠道病毒71型灭活疫苗免疫效果的影响

目的分析Al(OH)3佐剂对不同抗原含量肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗免疫效果的影响。方法将ICR小鼠随机分为9组,每组8只:常规剂量(160 EU/0.1 ml EV71)、1/2剂量(80 EU/0.1 ml EV71)、1/5剂量(32 EU/0.1 ml EV71)无佐剂及佐剂[Al(OH)31.0 mg/ml]疫苗组,并设佐剂、生理盐水及空白对照组,分别于0、28 d经肌肉免疫小鼠,分别于初免及加强免疫后28 d,经尾静脉采血,分离血清,采用体外微量中和试验法检测小鼠血清中和抗体效价,流式细胞仪检测IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A、IL-10、IFNγ及TNF水平。结果初免后28 d,1/2剂量疫苗组中佐剂组小鼠血清抗体阳性率明显高于无佐剂疫苗组,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组间差异无统计学意义(P>0.05);加强免疫后28 d,常规剂量疫苗组中,佐剂及无佐剂组小鼠血清抗体阳性率均为100%,抗体GMT分别为1∶152.2和1∶139.6,1/2剂量疫苗组中,佐剂组小鼠血清中抗体GMT与无佐剂组相比,差异有统计学意义(P<0.05),其余组间抗体阳性率及抗体GMT差异均无统计学意义(P>0.05)。常规剂量、1/2剂量、1/5剂量疫苗组,均诱导产生IL-6、IL-10、IFNγ及TNF 4种细胞因子,与佐剂对照组和生理盐水对照组相比,差异有统计学意义(P﹤0.05),未检测到IL-2、IL-4、IL-17A。结论 EV71灭活疫苗可诱导小鼠产生IL-6、IL-10、IFNγ、TNF 4种细胞因子及特异性的抗EV71抗体,加入佐剂后免疫效果更好。     

CpG ODN、氢氧化铝和大肠埃希菌不耐热肠毒素无毒突变体联合佐剂对猪轮状病毒△VP8亚蛋白免疫效果的影响

目的评价Cp G ODN、氢氧化铝[Al(OH)3]和大肠埃希菌不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT)无毒突变体联合佐剂对猪轮状病毒(porcine rotavirus,PRV)△VP8*亚蛋白免疫效果的影响。方法将LT A亚基上63位丝氨酸突变为赖氨酸,构建LT的无毒突变体重组表达质粒p ET-30a(+)-LTK63,于E.coli表达重组蛋白LTK63,并进行纯化。将小鼠随机分为LTK63+Al(OH)3组、Cp G ODN+Al(OH)3组、Cp G ODN+LTK63+Al(OH)3组及Al(OH)3对照组,将P2-SB-1AΔVP8*抗原蛋白分别与各组相应佐剂共同免疫小鼠,均经颈部皮下注射,隔2周免疫1次,共3次,于每次免疫后14 d采血,分离血清,间接ELISA法检测血清抗体效价及Ig G亚型;末次免疫2周后,MTT法检测小鼠特异性淋巴细胞的增殖。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒p ET-30a(+)-LTK63构建正确;表达和纯化产物经SDS-PAGE及Western blot分析,均可见相对分子质量约33 000(A亚基)和13 000(B亚基)的目的蛋白条带。二免后,Cp G ODN+LTK63+Al(OH)3组的抗体滴度显著高于LTK63+Al(OH)3组、Cp G ODN+Al(OH)3组和Al(OH)3对照组(P0.05);末次免疫后2周,Cp G ODN+Al(OH)3组抗体滴度显著高于Al(OH)3对照组、Cp G ODN+LTK63+Al(OH)3组和LTK63+Al(OH)3组(P0.001);Cp G ODN+LTK63+Al(OH)3和LTK63+Al(OH)3组小鼠血清中Ig G2a和Ig G1水平相当,Cp G ODN+Al(OH)3组血清抗体以Ig G2a为主,Al(OH)3对照组血清Ig G以Ig G1为主;Cp G ODN+Al(OH)3组小鼠特异性淋巴细胞的增殖能力最强。结论 Cp G ODN+Al(OH)3联合佐剂表现出明显的协同效应,可显著提高小鼠对PRV△VP8*亚蛋白的体液免疫和细胞免疫应答。     

高效液相色谱法测定人血清中的间羟舒喘灵

用HPLC方法检测人血清中的间羟舒喘灵浓度。样品用硅胶萃取小柱纯化浓集后用C8柱 (5μm ,2 50× 4.6mm )作分析色谱柱 ,用硫酸沙丁胺醇作内标 ,以 pH2 8,0 .0 3mol/LNH4H2 PO4,缓冲液 -CH3OH -CH3CN(90 :3:7)为流动相 ,在波长 2 2 4nm处检测。标准曲线在 0 5～ 32 μg/L范围内有良好线性关系 (r =0 9998) ,最低检测浓度为 0 2 μg/L ,平均回收率为 1 0 0 7%± 3 1 % ,日内RSD小于 3 7% ,日间RSD小于 7 5% ,适宜血清中间羟舒喘灵的测定。     

重组融合蛋白IL-3-PE38KDEL对急性髓性白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的观察重组融合蛋白IL-3-PE38KDEL对急性髓性白血病(Acute myelocytic leukemia,AML)细胞HL-60(IL-3R阳性)和NB4(IL-3R阴性)增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的IL-3-PE38KDEL分别作用HL-60和NB4细胞,MTT法检测细胞的增殖抑制作用,计算抑制率及半数抑制浓度(IC50)。将HL-60和NB4细胞分别分为IL-3-PE38KDEL组和IL-3+IL-3-PE38KDEL组,IL-3+IL-3-PE38KDEL组加入IL-3(100 ng/ml),孵育4 h后,IL-3-PE38KDEL组和IL-3+IL-3-PE38KDEL组均加入IC50浓度的IL-3-PE38KDEL,计算细胞增殖抑制率;流式细胞术检测2种AML细胞细胞周期的变化及凋亡情况。结果 IL-3-PE38KDEL对HL-60和NB4细胞的增殖均有抑制作用,且呈浓度依赖性,对HL-60细胞的抑制作用强于NB4细胞(P<0.05),IC50值分别为2.5μg/ml和259.2μg/ml。当IL-3-PE38KDEL浓度为IC50时,经IL-3处理后,对HL-60和NB4细胞增殖的抑制率均值分别为32.20%和49.00%。经IL-3-PE38KDEL作用后的HL-60细胞大部分被阻滞于G1/S期。HL-60细胞IL-3-PE38KDEL组的细胞凋亡率均值(19.71%)显著高于IL-3+IL-3-PE38KDEL组(9.39%)(P<0.05),NB4细胞两组差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论 IL-3-PE38KDEL能抑制IL-3R阳性的AML细胞HL-60增殖,并诱导其凋亡,但对IL-3R阴性的AML细胞NB4的抑制作用较弱。     

高效液相色谱法分离测定部分贵金属的二苯基硫脲配合物

首次对二苯基硫脲(DPTU)的 Ag(Ⅰ)、Ru(Ⅳ)、Rh(Ⅲ)、Pd(Ⅱ)、Pt(Ⅳ)配合物的高效液相色谱行为进行了研究。以硅胶(5μm)填充柱为固定相,含10~(-3)mol/L DPTU 的 CHCl_3-C_6H_(?)-C_2H_6OH(8:1:1 V/V)混合液为流动相,流速为1mL/min,流出液在320 nm 检测,获得 Ag(Ru)、Rh、Pd、Pt 的最佳分离。从标准曲线的下限求得 Rh、Pd、Pt 的最低检测限分别为16 ng、8 ng、16ng.三次进样的变异系数分别为0.77%、2.2%和0.41%。     

柯萨奇病毒A组16型病毒样颗粒的制备及其免疫原性

目的应用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)病毒样颗粒(virus-like particle,VLP),通过条件优化,提高VLP的表达量,纯化后检测其免疫原性。方法对CVA16结构蛋白基因P1及蛋白酶基因3CD进行密码子优化,插入启动子P10改造为CMV的重组杆状病毒表达载体p Fast Bac Dual-CMV中,获得重组穿梭质粒p Fast Bac Dual-CMV-P1-3CD,转化DH10 Bac TM Competent Cells,提取重组杆粒Bacmid-CMVP1-3CD,转染Sf9细胞,组装成重组杆状病毒Ac MNPV-CMV-P1-3CD,并进行扩增,采用间接免疫荧光法、Western blot法及透射电镜观察对表达产物进行初步鉴定。对重组CVA16 VLP的表达条件(病毒接种MOI值、感染时间及细胞培养方式)进行优化后,通过20%蔗糖垫层及氯化铯连续密度梯度离心法纯化CVA16VLP,并通过腹部皮下注射免疫ICR小鼠3次,采用间接ELISA法检测小鼠血清特异性Ig G抗体滴度,微量中和试验法检测血清中和抗体滴度。结果重组杆状病毒Ac MNPV-CMV-P1-3CD经PCR及测序鉴定证实组装成功;重组CVA16 VLP在Sf9细胞中成功表达,优化的表达条件为:重组杆状病毒Ac MNPV-CMV-P1-3CD按MOI=5接种,Sf9细胞采用悬浮培养方式悬浮培养96 h,收集细胞及培养上清;纯化的CVA16 VLP纯度可达90%以上,针对VP2的单克隆抗体能与VP0及VP2发生特异性反应,电镜下可见大量形态规则的类球形VLP,直径约为27 nm;纯化的CVA16 VLP免疫ICR小鼠后,诱导机体产生的特异性血清Ig G滴度可达1∶105,中和抗体滴度达1∶358。结论应用杆状病毒表达系统成功表达了CVA16的P1和3CD蛋白,并组装形成完整的VLP;通过质粒启动子的改造及表达条件的优化,有效提高了CVA16 VLP的表达量;纯化的CVA16 VLP可诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,为CVA16亚单位疫苗的研究提供了参考。     

肠道病毒71型灭活疫苗的小鼠细胞免疫效果

目的评价肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠的细胞免疫效果。方法分别以不同剂量(1、2.5、5、10μg/ml,均含铝佐剂1 mg/ml)、不同剂型(含铝佐剂1 mg/ml或不含铝佐剂)、不同免疫剂次(单次免疫或加强免疫)EV71灭活疫苗经腹腔免疫小鼠,0.5 ml/只,均设铝佐剂对照组(仅注射铝佐剂1 mg/ml)。采用经典小鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)培养方法制备正常小鼠DC,瑞氏染色法检测细胞形态,流式细胞术分析其表型及纯度;免疫磁珠分选法(magnetic activated cell sorting,MACS)分离小鼠脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞,流式细胞术检测细胞纯度。ELISPOT法检测各组免疫小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ的水平;细胞因子试剂盒检测小鼠淋巴细胞培养上清及小鼠血清中细胞因子的水平。结果 DC形态不规则,表面树枝状突起形态不同,细胞核较大且不规则;DC纯度为(81.39±9.24)%,可高水平表达MHⅡ(I-A/I-E)类分子,中度表达CD86和CD40。CD4+、CD8+T细胞纯度分别为95.27%和94.08%。随着疫苗免疫剂量的增加,CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC显著增加,5μg/ml疫苗组达最大值,且明显高于其他组(P均0.05);5μg/ml疫苗组淋巴细胞培养上清中IFNγ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-5、TNF-α含量明显高于其他组(P0.05);1、2.5、5μg/ml疫苗组血清中IL-10含量明显高于铝佐剂对照组(P0.05),1μg/ml疫苗组明显低于2.5及5μg/ml疫苗组(P0.05)。含铝佐剂疫苗组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平及血清中IL-10含量均明显高于无铝佐剂疫苗组(P均0.05)。加强免疫组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平、血清中IL-10含量均明显高于单次免疫组(P均0.05)。结论 EV71灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性细胞免疫反应,本实验为其进一步人体临床试验研究奠定了基础。     

结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素的原核表达及其在结核病血清学诊断中的应用

目的原核表达与纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)肝素结合血凝黏附素(heparin-binding haemagglutinin adhesion,HBHA),并初步评估其在结核病血清学诊断中的价值。方法采用PCR法从M.tb H37Rv基因组中扩增hbha基因,克隆至原核表达载体p ET-28a(+),构建重组表达质粒p ET-28ah,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组HBHA(r HBHA)蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化后,Western blot法分析其抗原特异性。收集71例确诊的结核病患者和30名健康体检者血清,采用ELISA法检测血清中的抗HBHA Ig A、Ig G抗体水平,并以ESAT-6、Ag85A作为对照抗原,评估r HBHA在结核病血清学诊断中的价值。结果重组表达质粒p ET-28ah经酶切及测序证实构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,经Ni2+亲和层析柱纯化,可得到高纯度的r HBHA蛋白;纯化的r HBHA蛋白可与小鼠抗His-tag单克隆抗体特异性结合;结核病患者(TB)组血清中抗r HBHA、ESAT-6、Ag85A抗原特异性Ig G水平均显著高于健康对照(HC)组(P0.05),且TB组的r HBHA抗原特异性Ig A水平也显著高于HC组(P0.05),而两组间ESAT-6、Ag85A抗原特异性Ig A水平差异无统计学意义(P0.05);ROC曲线分析显示,r HBHA抗原检测Ig A的诊断效能较好,曲线下面积为0.711,其他两种对照抗原ESAT-6、Ag85A的Ig A诊断效能一般,曲线下面积分别为0.512和0.531。结论 r HBHA抗原用于结核病的诊断效能较好,可作为结核病血清学诊断的备选抗原之一。     

26例过敏性哮喘患者尘螨特异性抗体的检测及其临床研究

目的探讨过敏性哮喘患者尘螨特异性抗体的检测及临床意义。方法采用ELISA法对26例尘螨过敏性哮喘患者和25例正常人的血清尘螨特异性血清免疫球蛋白IgE和IgG亚类进行了检测比较。结果尘螨过敏性哮喘患者和对照组血清免疫球蛋白IgE和总IgE水平差异显著;患者组血清尘螨特异性m-sIgG1、m-sIgG2和m-sIgG4的含量均显著高于正常组,但两组m-sIgG3含量无显著性差异。结论特异性抗体清免疫球蛋白水平为过敏性哮喘提供临床诊断价值。     

Cd（OH）2和CdO纳米带的制备

以Cd(NO3)2·4H2O和NH3·H2O(质量分数25%～28%)为原料,在无任何模板存在下采用常压液相法制备了Cd(OH)2纳米带,将Cd(OH)2纳米带在350℃下煅烧4 h得到形貌相似的CdO半导体纳米带材料.XRD、TEM和SAED等测试结果表明,适当的温度对于Cd(OH)2和CdO纳米带的形成是必须的;所制得的Cd(OH)2纳米带为六方单晶结构,宽度为100～200 nm,长度达1.5 μm,厚度约为30 nm;CdO纳米带为面心立方单晶结构.     

肠道病毒71型灭活疫苗免疫原性比较

目的探讨新上市国产肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠体液免疫和细胞免疫应答特性。方法分别用我国3家企业生产的EV71灭活疫苗(V1、V2、V3)按0、14 d程序免疫BALB/c小鼠,采用体外微量中和试验检测血清单剂和2剂免疫后14 d的EV71中和抗体效价,ELISA法检测2剂免疫后14 d的小鼠脾单个核细胞(mononuclear cells,MNC)分泌细胞因子水平。结果 3家EV71疫苗1剂免疫后即可诱导90%以上小鼠产生EV71中和抗体阳转,V1疫苗组诱导的中和抗体效价显著高于V2和V3疫苗组,GMT分别为627.1、25.9和75.3(P0.01);2剂免疫后中和抗体阳转率均为100%,V1和V3疫苗组抗体效价相近,GMT分别为1 752.9和2 013.5(P0.05),均显著高于V2疫苗组(GMT为228.2,P0.001)。3家疫苗均可诱导BALB/c小鼠产生Th1和Th2类细胞因子应答,但细胞因子种类具有差异,V1和V3疫苗组诱导小鼠分泌IFNγ的水平显著高于V2疫苗组(P0.05);3个疫苗组间IL-2分泌水平差异无统计学意义(P0.05),IL-4和IL-5分泌水平与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05);V2疫苗组诱导小鼠分泌的IL-6水平显著高于V3疫苗组(P0.01);V3疫苗组诱导小鼠分泌的IL-10水平显著高于V1和V2疫苗组(P0.05)。结论 3家EV71疫苗均可诱导小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答,但呈现出不同的免疫应答特征。     

从柑橘皮中超声提取橙皮甙

在超声波作用下,用饱和Ca(OH)2水溶液浸提、盐酸酸析,从柑橘汁加工下脚料———柑橘果皮中提取橙皮甙。以精制橙皮甙收率为评价指标,利用正交实验L9(34)筛选最佳工艺条件为:超声提取温度25℃、超声时间30min、饱和Ca(OH)2溶液与柑橘皮质量比4∶1、超声频率25kHz。按优选的最佳工艺实验3次,精制橙皮甙平均收率达2 32%(为常规浸提法的1 61倍),相对标准偏差(RSD)为0 91%(n=3)。     

超临界抗溶剂法制备维生素D3脂质体前体及其表征（英文）

Vitamin D3 (VD3) proliposomes (VDP), consisted of hydrogenated phosphatidycholine (HPC) and VD3, were prepared using supercritical anti-solvent technology (SAS). The effects of operation conditions (temperature, pressure and components) on the VD3 loading in VDP were studied. At the optimum conditions of pressure of 8.0 MPa, temperature of 45 ℃, and the mass ratio of 15.0% between VD3 and HPC, the VD3 loading reached 12.89%. VD3 liposomes (VDL) were obtained by hydrating VDP and the entrapment efficiency of VD3 in VDL reached 98.5%. The morphology and structure of VDP and VDL were characterized by SEM (scanning electron micro-scope), TEM (transmission electron microscope) and XRD (X-ray diffractometer). The structure of VD3 nanoparti-cles in HPC matrix was formed. The size of VDL with an average diameter of about 1μm was determined by dynamic light scattering instrument (DLS). The results indicated that VDP can be made by SAS and VDL with high entrapment efficiency can be formed easily via the hydration of VDP.     

高效液相色谱法测定化妆品中VD2及VD3

采用高效液相色谱法对VD2及VD3进行测定,以甲醇/乙腈(90∶10)为流动相,流速为1.0 mL/min,DAD检测器,C18柱,检测波长260 nm,得到在0.50～50.0 mg/L浓度范围内有较好的线性关系,相关系数分别为rVD2=0.999 4和rVD3=0.999 5,回收率为96.9%～100.6%,方法检出限VD2为0.13 mg/L,VD3为0.06 mg/L。该方法快速方便,可用于化妆品VD2及VD3的检测。