血常规红细胞参数对β地中海贫血诊断、筛查价值探讨

目的对轻型、重型两类β地中海贫血患者的血常规红细胞参数进行分析,以进一步揭示和探讨红细胞参数在β地贫筛查和诊断中的临床意义。方法分别分析38例轻型β地中海贫血、35例重型β地中海贫血患者红细胞参数的变化趋势和分布特点,并通过ROC曲线讨论各参数对两类β地贫患者的诊断、筛查价值及最佳临界值。结果在筛查轻型β地中海贫血时,MCV、MCH、RBC三指标的ROC曲线下面积分别为0.985、0.983、0.976,其最佳筛查临界值分别为74.25fl、23.8pg、4.215×1012/L;在诊断重型β地贫时,MCV、MCH、RBC、RDW四指标的ROC曲线下面积分别为0.905、0.714、0.916、0.940,其最佳筛查临界值分别为81fl、26.65、3.465×1012/L、20.55%。结论红细胞参数对轻型β地贫的筛查价值最为突出,但其独特的血液学特征对重型β地贫患者也具有一定的辅助诊断价值;血常规中红细胞参数以MCV最为有筛查、诊断价值,RBC、RDW、MCH也有部分参考价值。     

渭源地区健康成人静脉血红细胞分析参考范围调查

目的建立甘肃省渭源县健康成人静脉血红细胞(RBC)分析参数的参考范围。方法所有对象均来自本县体检的正常人群,男921名,女893名,以G.TECCA800自动血液分析仪作RBC参数检测后行统计学分析并与对照资料作对比。结果各项RBC参数的参考范围如下:RBC计数男性为4.66～6.45×1012/L,女性为3.91～5.64×1012/L;红细胞压积(HCT)男性为0.394～0.553,女性为0.336～0.474;血红蛋白(HGB)浓度男性为140.7～194.4g/L,女性为113.2～167.7g/L;红细胞平均血红蛋白含量(MCH)男性为26.82～33.52Pg,女性为25.06～33.80Pg;红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)男性为317.6～390.9g/L,女性为304.0～389.7g/L;红细胞平均体积(MCV)男性为76.5～93.9,女性为72.0～98.0。结论 RBC、HCT、HGB、MCH、MCHC和MCV的结果与对照资料相比有显著差异(P<0.01)。     

地中海贫血儿童的预防接种建议及探讨

地中海贫血又称"珠蛋白生成障碍贫血",是由于一种或多种珠蛋白肽链合成受阻或完全抑制,导致Hb成分组成异常引起的慢性溶血性贫血,其中以α、β-地中海贫血较常见,α-地中海贫血有静止型、标准型、中间型及Hb Bart胎儿水肿综合征4种临床分型;β-地中海贫血有轻型、中间型及重型3种临床类型[1]。该贫血为全球分布最广、累积人数最多的常染色体隐性单基因遗传病,在中国广东、广西、海南发病率较高。     

3期糖尿病肾病颈动脉粥样硬化危险因素分析

目的 探讨临床糖尿病肾病(DN3期)患者颈动脉粥样硬化(AS)的危险因素.方法 检测227例原发于糖尿病的患者的一般临床指标.同时应用高分辨彩色B超测患者颈动脉内膜一中层厚度(CCA-IMT)及粥样硬化斑块情况.结果 粥样硬化斑块阳性的患者血UA.RBC及MCV(平均红细胞体积).MCH(平均血红蛋白含量),载脂蛋白a.HDL(高密度脂蛋白)与粥样硬化斑块阴性患者有显著性差异;各指标均值均在正常范围内.患者颈AS的危险因素为UA、RBC、载脂蛋白a,载脂蛋白b.结论 DN3期患者营养不良状况及低蛋白血症不明显,AS可能与UA、RBC.裁脂蛋白a.载脂蛋白b有关.高尿酸、贫血、脂代谢紊乱促进颈动脉粥样硬化(AS)的发生发展.     

225例小细胞低色素症小儿病因与临床分析

目的探讨珠海市户籍小儿小细胞低色素症的病因并分析其临床表现。方法采用已建立的技术与方法,分析我院儿科门诊与病房收治的珠海市户籍225例小细胞低色素症患儿的珠蛋白基因型、铁代谢状态和红细胞指标等并详细记录其临床表现。结果在上述病例中,α和β地贫基因检出率分别为43.6%和30.7%,缺铁的发生率为44.4%。在96例单纯性小细胞低色素症中,有78例检出地贫基因(81.3%)。结论地贫是引起珠海市小儿小细胞低色素性症主要的原因,其次是缺铁。因此,地贫和缺铁的鉴别诊断对于儿科临床非常重要。     

ROC曲线分析人附睾蛋白4在卵巢癌的诊断价值

目的通过ROC曲线分析人附睾蛋白4(human epididymal protein 4,HE4)在卵巢癌的诊断价值。方法将107例卵巢疾病患者分为正常对照组(21例)、良性卵巢肿瘤组(20例)、Ⅰ-Ⅱ期卵巢癌组(14例)、Ⅲ期卵巢癌组(30例)、Ⅳ期卵巢癌组(22例)。分别对5组受试患者进行血清HE4水平测定和影像学检测,在灵敏性和特异性方面比较两者在卵巢癌诊断的价值;对各组患者血清HE4水平进行ROC曲线分析,评价血清HE4在卵巢癌诊断方面的价值。结果血清HE4水平检测在灵敏性上明显高于影像学检查,差异有统计学意义(P0.05),而特异性差异无统计学意义(P0.05),且血清HE4水平随着癌症恶性程度的增加而升高;ROC曲线线下面积AUG为0.912,具有较高的诊断价值。结论血清HE4水平检测在灵敏性上明显高于影像学检查,并且具有较好的特异性,可作为卵巢癌辅助检查手段,具有较高的临床诊断价值。     

酶联免疫法快速筛查化妆品中非法使用人表皮生长因子

建立化妆品中人表皮生长因子(EGF)的酶联免疫(ELISA)快速筛查方法。冻干粉、水和啫喱剂化妆品用PBS缓冲液溶解,以空白加标样品回归拟合四参数标准曲线,以不确定度评估法确定本实验室临界值为0.0781、0.0814、0.0662,以精密度剖面函数和迭代逼近法确定本实验室最小可检出值为64、33、30 pg/mL。使用308个盲样对本方法评价,假阴性率、假阳性率和相对准确度分别为0%、3.2%、99.5%。本方法快速、灵敏、简便,适用于非法使用人表皮生长因子的现场快速筛查。     

VEGF、CA125和HE4联合检测对子宫内膜异位症的诊断价值

目的:探讨VEGF、CA125和HE4在子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)患者血清中的表达及其临床诊断价值。方法:应用酶联免疫吸附法检测研究组35例EMT患者和对照组35例正常健康女性血清VEGF、CA125和HE4浓度,并对两组数值进行统计学分析。结果:研究组患者血清VEGF、CA125和HE4浓度明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);VEGF、CA125、HE4以及三种指标联合对EMT诊断的灵敏度分别为94.29%、68.57%、69.97%、84.29%,特异度分别为60.00%、82.86%、91.43%、97.14%,在ROC曲线下的面积分别为0.813、0.822、0.612和0.909。结论:EMT患者血清VEGF、CA-125和HE4具有显著变化,联合检测VEGF、CA-125和HE4对EMT的诊断有很高的敏感度和特异度,具有重要的临床价值。     

咳嗽变异性哮喘患者血清25(OH)VD3、IL-4联合呼出气一氧化氮的表达及临床意义

目的:探讨血清25(OH)VD3,IL-4,FENO的检测在咳嗽变异性哮喘中的诊断价值。方法:收集从2018年12月至2019年11月来自佳木斯大学附属第一医院呼吸内科门诊就诊并确诊的咳嗽变异性哮喘患者60例;对照组选取同一时间段健康体检者40例。分别测定血清25(OH)VD3,IL-4,FENO水平以及分别计算三者对CVA的诊断价值。结果:两组血清25(OH)VD3,IL-4,FENO水平有显著性差异(P0.05);血清25(OH)VD3诊断CVA的ROC曲线下面积为0.965(P0.001),截断值为22.665ng/ml时,25(OH)VD3诊断CVA的灵敏度和特异度为87.5%和93.3%;FENO诊断CVA的ROC曲线下面积为0.980(P0.001),截断值为35.5ppb时,FENO诊断CVA的灵敏度和特异度95.0%和97.5%;IL-4诊断CVA的曲线下面积为0.776(P0.001),截断值为435.80 ng/L,敏感度和特异性分别为90.0%和55.00%;结论:咳嗽变异性哮喘患者血清25(OH)VD3降低,IL-4,FENO水平增高,联合检测上述指标可有效提高CVA诊断。     

凝血功能检查在重型肝炎中的临床意义探讨

目的将凝血常规指标对重型肝病的诊断、病情监测、预后进行研究和分析。方法收集临床确诊的急性肝炎组(AH)42例,慢性肝炎组(CH)58例,重型肝炎组(CSH)44例,健康对照组(N)19例,进行凝血功能检查。结果CSH组的PT、PA、V、VII、VIII和APTT水平与正常组、AH和CH组比较均存在显著性差异(P<0.001);重型肝炎患者PA与V相关性最高。结论PT、PA、APTT、V、VII水平不仅对CSH具有很好的诊断价值,也是重型肝炎(CSH)与正常组、轻度肝病组(AH、HC、LC代偿)之间较理想的鉴别指标。     

祛铁胺治疗中的护理观察与配合

铁过载主要由于长期贫血反复大量输血或原发病本身引起,例如骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syrdrome,MDS)、慢性再生障碍性贫血(Chronic aplastic anemia,CAA)等。长期依赖输血患者(如重型地中海贫血、MDS和AA患者),输血是引起铁过载的主要原因[1]。由于长期大量输注红细胞(一般超过20U)或疾病本身(如MDS无效造血)摄入过量铁等原因,造成体内铁贮积过多,沉积于组织和脏器引起铁过载,造成组织和脏器损伤。正常情况下,人体缺乏定期快速的排铁机制,过多的铁沉积心脏、肝、脑、胰腺等器官,引起血色病。当患者体内的铁累计达到20g以上时,则可出现明显的中毒表现,故应及早给予铁螯合治疗,以预防或改善输血依赖性铁过载。我科自2009年10月至2010年10月对20例铁过载患者进行规律祛铁治疗,并针对性实施护理,取得了满意的效果,现报道如下。     

超声对胎盘早期剥离的诊断及意义

目的探讨超声对胎盘早剥的诊断及临床意义。方法总和分析经手术证实的35例胎盘早剥患者的超声表现。结果超声诊断重型胎盘早剥准确率高,与手术对照符合率为100%;诊断轻型胎盘早剥与手术对照率为83.3%,边缘性胎盘早剥合并有显性出血者,超声极易漏诊。结论超声对胎盘早剥的诊断率高,能够较准确地判断胎盘早剥的部位、剥离范围以及胎儿的情况,对手术治疗的方案选择有较大的指导价值,是作为诊断胎盘早剥的首选检查方法。在超声诊断发现胎盘回声异常时,最主要的是要结合临床症状和病史,加以鉴别诊断。     

8266例宫颈液基细胞学筛查结果分析

目的评价液基细胞薄层制片技术在宫颈病变筛查中的临床应用价值。方法利用液基细胞薄层制片机(TCT)对妇科子宫颈管刷取的细胞标本进行制片,然后进行固定、染色、显微镜检查;用TBS诊断系统进行分析,作出诊断。对ASCUS以上阳性病例进行阴道镜检查并取组织活检。结果8266例患者取材均为满意图片,对ASCUS以上阳性病例进行阴道镜下组织活检,细胞学与组织病理诊断符合率分别为100%、88.46%、73.38%、36.17%。结论TCT和TBS诊断报告系统对宫颈癌早期病变和高度病变检出率较高,能全面准确反映宫颈病变情况,防止HPV感染,及时治疗及阻止CIN病变升级是预防宫颈癌和癌前病变的关键。     

人血清中猪抗人淋巴免疫球蛋白双抗体夹心ELISA检测法的建立及验证

目的建立人血清中猪抗人淋巴免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,ALG)双抗体夹心ELISA检测法,并进行验证。方法以兔抗猪Ig G包被酶标板,HRP酶标记的鼠抗猪Ig G为二抗,建立人血清中ALG含量的双抗体夹心ELISA检测法,并对方法中包被浓度及二抗浓度进行优化,同时验证该方法的重复性、敏感性、准确性、特异性及稳定性。采用优化后的方法对14位严重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)患者进行ALG的血药浓度监测(therapeutic drug monitoring,TDM)。结果最佳包被浓度为1∶2 000,最佳二抗稀释度为1∶8 000。参考品浓度在4.9~5 000μg/ml范围内标准曲线的四参数Logistic曲线拟合较好,R2值为0.991 1,在4.9~156μg/ml范围内的线性拟合也较好,R2值为0.991 5,批内重复性CV值均10%;其检测底限为0.39μg/ml;浓度为500、50及5μg/ml参考品的回收率为91.2%~107.0%;该方法可特异性检测出注射ALG患者血清中ALG含量;包被好的ELISA板及二抗、底物于4及37℃条件下分别保存1~3周及1~3 d后检测结果均较稳定。经DAS 3.1.4软件分析,14名经ALG治疗的SAA患者血清中ALG的曲线下面积(AOC)为(7.3±5.1)mg/(L·d)(95%CI),半衰期(t1/2)为(20.65±38.67)d(95%CI)。结论该方法具有良好的重复性、准确度及稳定性,可用于ALG的TDM。     

结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素的原核表达及其在结核病血清学诊断中的应用

目的原核表达与纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)肝素结合血凝黏附素(heparin-binding haemagglutinin adhesion,HBHA),并初步评估其在结核病血清学诊断中的价值。方法采用PCR法从M.tb H37Rv基因组中扩增hbha基因,克隆至原核表达载体p ET-28a(+),构建重组表达质粒p ET-28ah,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组HBHA(r HBHA)蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化后,Western blot法分析其抗原特异性。收集71例确诊的结核病患者和30名健康体检者血清,采用ELISA法检测血清中的抗HBHA Ig A、Ig G抗体水平,并以ESAT-6、Ag85A作为对照抗原,评估r HBHA在结核病血清学诊断中的价值。结果重组表达质粒p ET-28ah经酶切及测序证实构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,经Ni2+亲和层析柱纯化,可得到高纯度的r HBHA蛋白;纯化的r HBHA蛋白可与小鼠抗His-tag单克隆抗体特异性结合;结核病患者(TB)组血清中抗r HBHA、ESAT-6、Ag85A抗原特异性Ig G水平均显著高于健康对照(HC)组(P0.05),且TB组的r HBHA抗原特异性Ig A水平也显著高于HC组(P0.05),而两组间ESAT-6、Ag85A抗原特异性Ig A水平差异无统计学意义(P0.05);ROC曲线分析显示,r HBHA抗原检测Ig A的诊断效能较好,曲线下面积为0.711,其他两种对照抗原ESAT-6、Ag85A的Ig A诊断效能一般,曲线下面积分别为0.512和0.531。结论 r HBHA抗原用于结核病的诊断效能较好,可作为结核病血清学诊断的备选抗原之一。     

血管内皮生长因子化学发光免疫测定试剂盒的研制及验证

目的研制血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)化学发光免疫测定试剂盒,并对该试剂盒进行验证。方法以试剂盒的技术指标和血清检测结果为参考依据,建立检测方法,确定检测范围,并对包被抗体(1∶500、1∶1 000和1∶2 000倍稀释)及酶标抗体浓度(1∶3 000、1∶5 000、1∶6 000和1∶8 000倍稀释)、包被温度(室温和4℃)、封闭液成分(1%小牛血清、1%和0.5%牛血清白蛋白)及干燥方法(超净台吹干和使用真空干燥机进行干燥)进行优化;同时对试剂盒的线性、检出限、精密性、准确度、特异性及热稳定性进行验证;采用本试剂盒对139例非肿瘤人群和100例肿瘤患者的血清样本进行初步检测。结果方法的最佳检测条件为:包被抗体浓度为1∶1 000,酶标抗体浓度为1∶3 000,对血清样本的检测范围为6.25~800 pg/ml,最佳包被浓度为4℃,最佳封闭液成分为0.5%牛血清白蛋白,最佳干燥方法为真空干燥法。试剂盒线性相关系数r0.99,校准曲线各点偏差的绝对值10%,最低检出限≤3.125 pg/ml,空白检出限≤3.125 pg/ml,批内差异5%,批间差异7%,回收率为85%~99%;特异性检验结果为本试剂盒对EGF、FGF-2、PDGF-AA、Pl GF-1、Pl GF-2、HGF、TNF-α、TNF-β检测的交叉反应率≤0.52%;经37℃保存3、7 d后,试剂盒线性相关系数r0.99,空白检出限≤3.125 pg/ml,批内差异8%,回收率为80%~82%。139例非肿瘤人群和100例肿瘤患者的血清样本中VEGF的中位水平(M)分别为44.6和83.4 pg/ml。结论本研究开发的试剂盒具有较高的准确性、灵敏性、特异性,适用于血清VEGF的临床检测,具有较好的临床应用前景。     

抗卵巢癌相关抗原CA125单抗及其磁酶诊断试剂的制备

目的制备卵巢癌相关抗原CA125(cancer antigen 125)磁酶检测试剂,并进行验证及初步应用。方法应用CA125抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合,筛选效价高、稳定性分泌抗体的杂交瘤细胞株后,接种小鼠腹腔,收集腹水,制备抗CA125单抗,并对其亚型、特异性、相对亲和力、抗原结合位点及抗原决定簇进行鉴定。通优化反应条件制备CA125抗原磁酶检测试剂,并进行验证后,将其应用于50份女性健康体检者及100份卵巢癌患者血清的检测。结果共获得3株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为4B6、2G10、1C2;1C2、4B6和2G10单抗的抗体亚型分别为Ig G2a、Ig G1和Ig G1,轻链均为κ链,相对亲和力依次为2G104B61C2,与AFP、CA50、CEA、CA199、CRP、CA242和小牛血清未发生交叉反应,1C2单抗识别位点与2G10和4B6不同,且3株单抗的抗原决定簇均在CA125蛋白部分上。确定该磁酶检测的反应条件为:包被抗体按100μg/ml,37℃包被1 h;20%小牛血清37℃封闭1 h或4℃封闭过夜;酶标抗体最佳反应时间为45 min。当CA125浓度在10~500 U/ml时,与对应的A450值线性关系良好,R2=0.992;该检测试剂最低检测极限约10 U/ml,灵敏度高;与人血清白蛋白、小牛血清、CA50、CEA、AFP、CRP、CA199和CA242均未发生反应,特异性高;于37℃放置4 d的CA125 A450值与2~8℃相比,差异无统计学意义(P0.05);批内及批间变异系数均10%,重复性较好;高、中、低3个浓度的CA125抗原的回收率在94.45%~105.21%之间,准确性高。50份健康体检者血清中CA125阳性率为4%,100份卵巢癌患者血清中CA125阳性率为88%。结论已成功制备了卵巢癌相关抗原CA125磁酶检测试剂,该试剂具有应用于卵巢癌患者的诊断价值。