玉米转基因成分的非同源模板竞争定量PCR检测

建立了玉米转基因成分中35S启动子非同源模板的竞争定量PCR检测系统．竞争定量PCR的关键问题是内标物的制备．实验中非同源模板的构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严紧型扩增，回收预期DNA片段并将其构建到T-easy载体上．通过调整非同源模板浓度使竞争物PCR产物亮度与1％GMO玉米的亮度相同，从而确定转基因玉米的检出限为1％．然后以确定的内标物浓度与不同含量的GMO玉米样品进行竞争定量PCR反应，以此进一步确定样品中GMO的含量范围．     

郑州工程学院学报2004年总目次

第 1期粮食粉尘的性质与粉尘爆炸关系的研究周乃如 ,朱凤德 ,张　音 ,等 ( 1)……………………………………………………锈赤扁谷盗与其它几种储粮害虫对磷化氢的耐受性比较王殿轩 ,原　锴 ,武增强 ,等 ( 4)…………………………………非晶颗粒态木薯淀粉化学反应活性研究梁　勇 ,张本山 ,杨连生 ,等 ( 9)……………………………………………………制备微孔淀粉工艺条件的研究周　坚 ,沈汪洋 ,万楚筠 ( 14)…………………………………………………………………玉米转基因成分的非同源模板竞争定量PCR检测栾春光 ,马　林 ,郝彦玲 ,等 ( 19)…     

玉米中转基因成分的定性PCR检测

利用改良 CTAB 法提取玉米产品的基因组 DNA,应用 PCR 检测方法,并以玉米特异性内源基因 IVR 为内参,花椰菜花叶病毒 35S 启动子(CaMV35S 启动子)、农杆茵胭脂碱合成酶终止子(NOS终止子)为靶基因检测玉米中是否存在转基因成分.实验结果表明,有些玉米样品中存在转基因成分,表明市场上存在未经标识的转基因玉米及其加工品.     

玉米中转基因成分的定性PCR检测

利用改良CTAB法提取玉米产品的基因组DNA,应用PCR检测方法,并以玉米特异性内源基因IVR为内参,花椰菜花叶病毒35S启动子（CaMV35S启动子）、农杆菌胭脂碱合成酶终止子（NOS终止子）为靶基因检测玉米中是否存在转基因成分。实验结果表明,有些玉米样品中存在转基因成分,表明市场上存在未经标识的转基因玉米及其加工品。     

ELISA法检测玉米中AFB1样品提取方法改进的研究

在用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定玉米AFB1含量的过程中,通过改进样品提取方法,将样品本身的影响因素所造成的误差降至最小.结果表明:ELISA定量检测的标准工作溶液与样品提取液内成分相当时,样品检测结果准确,回收率稳定在83%以上.     

马来酸氯苯那敏片剂的核磁共振定量测定方法研究

提出测定马来酸氯苯那敏片剂中马来酸氯苯那敏的1↑H-NMR方法。考察了实验条件的影响,选择重水为溶剂,反丁烯二酸为内标,延迟时间为20 s,脉冲宽度为3.0μs,采样次数为16次,内标浓度为4-5mg/mL。在内标与样品质量比为0.48-2.12范围内,峰面积比与质量比之间具有良好的线性关系,相关系数r〉0.999 0,用绝对定量法和标准曲线法测定了3种马来酸氯苯那敏片剂的含量,并与药典的紫外分光光度法作了比较。     

复合溶剂萃取分离苯-环己烷的气相色谱分析

含盐的复合溶剂萃取分离苯-环己烷等烃类混合物是一种获得高纯苯的有效方法.为使检测分离效果更为准确,选择合适的内标物尤为重要,依照国际标准,采用气相色谱内标法,讨论了对N,N-二甲基甲酰胺(DMF)+硫氰酸钾(KSCN)复合溶剂萃取分离苯-环己烷各组分进行定量分析及内标物的选择问题.结果表明:正丁醇为内标物可行,该方法能够准确测量出各组分含量.三组分体系(苯-环己烷-DMF)和四组分体系(苯-环己烷-DMF-硫氰酸钾)中,苯、环己烷和DMF与内标物的峰面积比均与各标准品的质量百分比浓度呈良好的线性关系,变异系数不高于3.62%.测试结果的绝对误差小于2.44%,回收率、标准偏差分别在85.88%～110%和0.004%～1.13%之间.     

用气相色谱法分析丙烯酸中控样品中阻聚剂含量

建立了用安捷伦7890A系列气相色谱仪分析丙烯酸中控样品中阻聚剂含量的方法,本方法操作简单,可有效解决吩噻嗪分析定量的难题,整个分析过程仅20 min。本方法使用FID检测器检测,采用内标法进行定量计算。结果表明,该方法准确、适用性强、简便,适用于丙烯酸中控样品中阻聚剂含量分析。     

转基因食物中常见外源基因PCR检测方法的建立

通过对CTAB法、胍-氯仿法和试剂盒法三种植物基因组提取方法进行比较,筛选出回收率最大的CTAB法用于本实验样品基因组的提取。其次,以转基因作物中9种常见的外源基因序列为模板,设计出9对引物,拟扩增片段皆小于200bp以适用于深加工食品的检测,并进行了引物的特异性、灵敏度、适用性验证试验。最后,将所建立的普通PCR检测方法应用到了转基因样品的实际检测中。结果表明,所建立的针对转基因作物中9种常见外源基因的PCR检测方法特异性强、灵敏度高,相对检测限可达0.1%～0.5%,约18～90拷贝的基因组。因此,该方法可用于转基因食品及加工品中常见基因的筛选检测。     

基于ABAQUS的圆形桥墩模板的数值模拟

针对贵黔高速公路某一圆形桥墩在施工过程中混凝土桥墩模板内力及位移变化情况是否满足现有规范要求的问题,提出了基于ABAQUS的圆形桥墩模板的数值模拟.应用ABAQUS软件进行数值模拟并且进行现场实测,对混凝土桥墩施工时的模板进行了内力与位移的分析,并将得出的内力和位移与实际检测出的数据进行了对比.结果表明,模拟值与实测值吻合较好,证明了该模型具有一定的合理性;模板的环肋和竖肋提高了整个模板的刚度,对模板的变形起到了很好的限制作用.     

基于ABAQUS的高速公路空心墩模板的数值模拟

针对贵州新田大桥某一薄壁空心墩在浇筑混凝土过程中内外模板的内力及位移是否满足国家现行规范要求的问题,应用数值计算软件ABAQUS进行建模并计算内力和位移,在浇筑过程中进行实时监测,将现场测得的位移与数值模拟结果进行对比.结果表明,模拟值与实测值有稍许偏差,但在合理范围内,证明模型具有一定的合理性;模板的对拉螺栓及横肋对整个结构的变形起到了很好的限制作用,提高了整个模板的刚度;内模板的受力相对于外模板较大,在设计和施工的过程中需要特别注意.     

赤泥复合硅酸盐水泥的力学性能及其放射性研究

研究了不同赤泥掺量的赤泥复合硅酸盐水泥的力学性能和放射性.研究结果表明：赤泥的内照射指数IRa=2.05,外照射指数Ir=3.27,都大于1,超过国家标准允许值的范围,不经处理不能直接用作建筑材料.赤泥复合硅酸盐水泥的力学性能随着赤泥掺量的增加而下降,且复合水泥经水化固化后其放射性得到有效的调控.当赤泥掺量不大于20%时,复合水泥符合42.5等级水泥的要求,且其内照射指数和外照射指数均小于1,作为建筑材料使用不受限制.     

焙烤小麦胚芽中丙烯酰胺含量的测定与分析

以小麦胚芽为样品,设定1401,70,200℃3个焙烤温度,每个温度按不同的焙烤时间（分别为10,152,0 min）进行焙烤,样品中加入内标液甲基丙烯酰胺后,以水提取,Carrez试剂除去蛋白质,正己烷脱去油脂,乙酸乙酯萃取,提取液浓缩至1 mL,利用气相色谱测定其丙烯酰胺的浓度,并比较不同焙烤条件下麦芽中丙烯酰胺含量.结果：丙烯酰胺在0.125～2.0μg/mL浓度范围内具有良好的线性（R2=0.999）,加标平均回收率为88.1%～104.6%,相对标准偏差（RSD）小于6.7%;焙烤温度相同时,麦芽中丙烯酰胺含量会随着焙烤时间的增加而变大,焙烤时间相同,当焙烤温度为170～200℃时,麦芽中丙烯酰胺含量随着温度的升高而不断减少.     

气相色谱法测定茴香醛

选用8％OV－210为固定相，间甲苯酚为内标物，测定茴香醛的含量。结果表明，该方法快速、准确，标准偏差＜0.1％，回收率为98.2％～99．3％。     

西施舌16S rRNA基因片段PCR扩增及其核苷酸序列分析

利用酚/氯仿抽提法提取了西施舌闭壳肌总DNA,以总DNA为模板,利用两条16S rRNA基因特异引物,进行PCR扩增,扩增产物测序后进行序列分析。结果从西施舌的闭壳肌提取得到总DNA,获得一个长度约300 bp的PCR扩增产物;测序结果显示此片段为294 bp;核苷酸序列经WU-blast2分析,与Spisula subtruncata(AJ548774)和Corbicula sp(AY097259)的16S rRNA的同源性均为74%。经DNAStar分析,此核苷酸序列A,G,T,C含量分别为35.74%,25.51%,26.19%和13.59%,A T(61.90%)含量明显高于G C(38.10%)含量。     

北野豌豆及其近缘种基因组DNA的提取和RAPD稳定的反应体系的建立

采用改进的CTAB法,成功提取了北野豌豆及其近缘种的基因组DNA,电泳结果显示DNA质量和产量均较高,并以此DNA为模板,成功建立了RAPD稳定的反应体系：总体积10μL,包括10ng的DNA,1×的反应缓冲液,1．5mmol·L^-1MgCl2,0．2μmol·L^-1引物,0．2mmol·L^-1dNTP混合物和1．0U的TaqDNA聚合酶。RAPD扩增程序为：先在92℃下变性3min,然后在92℃下变性1min、40℃下复性1min、72℃下延伸2min反应45个循环,最后72℃延伸10min。     

气相色谱法测定反应液中的水分

采用了3×0.5×2000不锈钢柱内填充GDX-102（80～100目）,在所选择的色谱条件下．以乙醇为内标物,测定了苯酚和双氧水羟化反应液中水分的含量．该方法简便、快速．准确性较好．回收率为99.5％～101.3％．标准偏差为0.055～0.057(n＝5)．     

基于DNA的纳米结构自组装

分析了DNA适于作为纳米结构组装模板的结构特点,阐述了几种基于DNA的纳米结构自组装方式,提出DNA模板组装可作为“自下而上”的微纳器件加工新方式,从而克服传统“自上而下”加工方式的不足。     

一种近红外光谱水果内部品质自动检测系统

基于傅里叶变换近红外漫反射光谱技术探讨了水果内部品质快速自动检测的新方法.建立水果的内部品质自动检测系统由光源、迈克尔逊干涉仪、近红外漫反射光纤探头组件、铟镓砷检测器、数据采集卡和水果样品室等部件组成.利用该系统对不同采收期雪青梨糖度和总酸度进行了自动检测试验并结合多元校正算法偏最小二乘法,建立了雪青梨漫反射光谱与其内部糖度、酸度的相关关系.试验结果为：定标误差分别为0.25%、0.02% ,预测误差分别为 0.32%、0.02%.经研究表明,该自动检测系统可以直接用于水果内部品质的快速定量分析.