ELISA法检测玉米中AFB1样品提取方法改进的研究

在用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定玉米AFB1含量的过程中,通过改进样品提取方法,将样品本身的影响因素所造成的误差降至最小.结果表明:ELISA定量检测的标准工作溶液与样品提取液内成分相当时,样品检测结果准确,回收率稳定在83%以上.     

麦角生物碱分析检测研究进展

对粮谷及其制品中麦角生物碱的定性和定量检测方法进行了介绍,包括传统的检测方法,如比色法、薄层层析法(TLC);仪器检测法,如液相色谱-荧光检测法、液相色谱-质谱联用法、毛细管电泳法;免疫分析法,如放射免疫法、酶联免疫吸附法。并综述了国内外麦角生物碱分析检测的研究进展。     

时间分辨荧光免疫层析法定量检测稻谷中的镉

本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明：定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL,标准曲线线性范围为0.1ng/mL～5.0 ng/mL,检出限和定量限分别为0.026 mg/kg和0.064 mg/kg,对有证标准物质的正确度在81.0%~91.7%之间,对实际样本的检测与ICP-MS检测结果一致性较高。该法重复性较好,变异系数在10%以内。结果显示,该法灵敏度高、操作简便、成本低廉,因此,非常适合基层单位大量样本的快速初步筛查。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物免疫亲和柱的研制

本实验采用抗DON杂交瘤细胞株SW-3 F4、SW-3 G12,分别制备出两种不同特性的单抗,然后与蛋白A-琼脂糖凝胶定向偶联,制备出了能同时分离净化DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其乙酰化衍生物的三合一免疫亲和柱(IAC),并对其性能进行了评价。结果表明:抗体1和抗体2均为IgG1亚型,亲和常数分别为3.0×10~8 L/mol和2.0×10~9 L/mol,与DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON的交叉反应率分别为100%、0.1%、453%和100%、101%、6%。制备的IAC柱,单标过柱的平均柱容量DON、3-Ac-DON和15-Ac-DON依次为3 243 ng/0.25 mL、1 285 ng/0.25 mL和1 527 ng/0.25 mL,非特异性吸附率小于2.3%,3种毒素在小麦基质中平均加标回收率均大于89%。本实验制备的IAC柱容量大、回收率高,适于DON及其乙酰化衍生物的纯化分离。     

基于蛋白A-琼脂糖凝胶黄曲霉毒素B1免疫亲和柱的制备

将初步纯化的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体,定向偶联于蛋白A-琼脂糖凝胶,制备成免疫亲和层析柱。结果显示,辛酸-饱和硫酸铵纯化后的单抗质量浓度为17.5 mg/mL,纯度为45.1%,抗体亚型为IgG1。取纯化后抗体48 μL与1 mL蛋白A凝胶偶联,偶联率达98.1%,高效液相色谱测定其平均相对柱容量为105 ng/0.125 mL凝胶、柱空白为0,不同样品（玉米粉、面粉、花生油、酱油、醋等）平均加标回收率在80%以上。该亲和柱在2～8 ℃保存12 个月后,相对柱容量仍可达72 ng/0.125 mL凝胶。该法制备的亲和柱相对柱容量大,稳定性好,可用于样品中黄曲霉毒素B1分离净化的要求。