IEC-6细胞的培养鉴定和生长特性研究

大鼠肠上皮细胞株IEC 6具有正常的未分化的肠上皮隐窝细胞的特征 ,在营养学研究中具有重要应用价值。本研究采用相差显微镜、透射电镜、扫描电镜等技术观察细胞形态结构 ,采用MTT法研究血清和血清替代品对ICE 6细胞生长的影响。结果表明 :引进的IEC 6细胞具有典型的正常肠上皮隐窝细胞的形态特征、超微结构和生长特性 ,表明的细胞株未发生转化或变异。不同的血清和血清替代品对细胞增殖的效应有差异 ,2 %的透析胎牛血清能维持细胞良好的增殖状态 ,可用于研究正常培养条件下外源核苷酸对肠上皮细胞的作用。     

磷灰石超微粉对骨癌Os—732细胞形态的影响

利用细胞培养技术研究磷灰石超微粉对人骨癌Ｏｓ－７３２细胞形态的影响。用磷灰石超微粉处理过的人骨癌Ｏｓ－７３２细胞不仅生长受到明显的抑制而且Ｏｓ－７３２细胞的宏观形态和微观形态均发生了明显的变化。     

外源核苷酸对肠上皮细胞增殖和迁移的作用

目的：本研究通过对体外培养的大鼠小肠上皮细胞IEC-6添加核苷酸，探讨四种单核苷酸及其按母乳组成模式配制的核苷酸混合物对肠上皮细胞增殖和损伤后迁移的影响。方法：采用MTT法测定核苷酸对细胞增殖的浓度-效应和核苷酸之间对细胞增殖效应的相互作用：采用IEC-6单层肠上皮损伤重建立模型测定细胞损伤后迁移；通过免疫组化检测TGFB的表达。结果：嘌呤核苷酸．AMP和GMP分别在30(mol／L和150(mol／L及以上能显著抑制IEC-6细胞的增殖并表现浓度依赖，嘧啶核苷酸CMP仅在极高浓度(1440(mol／L)时对细胞增殖有一定的抑制作用，UMP和核苷酸混合物在受试浓度范围内未见明显作用，但是，CMP和UMP能解除嘌呤核苷酸AMP和GMP对细胞增殖的抑制。180(mol／L核苷酸混合物能促进细胞损伤后迁移，但不诱导TG即的表达。结论：嘌呤核苷酸抑制肠上皮细胞增殖，而嘧啶核苷酸能解除嘌呤核苷酸的抑制作用。核苷酸混合物能通过非TGFB依赖的途径促进肠上皮细胞的损伤后迁移。     

奥沙利铂对结肠癌细胞株的体外作用研究

以结肠癌细胞株HT29和SW620为系统,研究奥沙利铂对结肠癌细胞株的体外增殖抑制作用及对细胞凋亡的影响.经奥沙利铂作用的细胞,通过MTT法测定细胞存活率、光学显微镜观察细胞形态变化、AO/EB染色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡等情况.结果表明奥沙利铂具有抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡的活性.     

PMN-PT弛豫型铁电材料的凝固组织与相结构

采用熔融法制备了PMN－32PT弛豫型铁电晶粒，研究了自由凝固条件下PMN－32PT晶体的生长形貌、组织形态、相结构和择优生长方向。结果表明，自由凝固条件下，从熔体中生长出的PMN－32PT晶体一般呈现三棱柱和八面体两种形态；PMN－32PT晶体的择优生长方向为＜211＞晶向；凝固过程中熔剂不足会引起组分中MgO的优先树枝状结晶；生长速度对PMN－32PT晶体的完整性有较大影响，生长速度过快会导致熔剂夹杂。     

外源核苷酸对肠上皮细胞增殖和迁移的作用

目的本研究通过对体外培养的大鼠小肠上皮细胞IEC-6添加核苷酸,探讨四种单核苷酸及其按母乳组成模式配制的核苷酸混合物对肠上皮细胞增殖和损伤后迁移的影响.方法采用MTT法测定核苷酸对细胞增殖的浓度-效应和核苷酸之间对细胞增殖效应的相互作用;采用IEC-6单层肠上皮损伤重建立模型测定细胞损伤后迁移;通过免疫组化检测TGFβ的表达.结果嘌呤核苷酸AMP和GMP分别在30(mol/L和150(mol/L及以上能显著抑制IEC-6细胞的增殖并表现浓度依赖,嘧啶核苷酸CMP仅在极高浓度(1440(mol/L)时对细胞增殖有一定的抑制作用, UMP和核苷酸混合物在受试浓度范围内未见明显作用,但是,CMP和UMP能解除嘌呤核苷酸AMP和GMP对细胞增殖的抑制.180(mol/L核苷酸混合物能促进细胞损伤后迁移,但不诱导TGFβ的表达.结论嘌呤核苷酸抑制肠上皮细胞增殖,而嘧啶核苷酸能解除嘌呤核苷酸的抑制作用.核苷酸混合物能通过非TGFβ依赖的途径促进肠上皮细胞的损伤后迁移.     

携带Kallistatin的溶瘤腺病毒载体构建及其对肝癌细胞的体外杀伤效应

采用靶向基因-病毒治疗策略,通过同源重组的方式构建了携带Kallistatin（KAL）的重组溶瘤腺病毒ZD55-KAL,并研究其对肝癌细胞的杀伤作用。通过PCR方法鉴定病毒构建正确;MTT法检测病毒对肝癌细胞的杀伤能力和对正常细胞的安全性;结晶紫染色观察细胞凋亡现象。结果显示：经目的病毒ZD55-KAL感染后肝癌细胞出现明显的病变和生长抑制,而正常细胞未出现病变现象,表明目的病毒具有较高的安全性和对肿瘤细胞的特异性杀伤能力。此外ZD55-KAL感染肝癌细胞后引起凋亡,所携带的治疗基因KAL能通过促进肿瘤的凋亡达到抑制肿瘤细胞生长的效果。     

组合内窝孔玉米精密排种器型孔的研究

提出并研制了一种具有阶梯形内窝定量孔的玉米精密排种器－－组合内窝孔玉米精密排种器。通过试验研究可知，只要适当地选择充真和阶梯形内窝定量孔的形状和尺寸，该排种器可对不同品种的玉米种子在不分级的情况下达到精播要求。     

酸碱介质条件对啤酒酵母耐压性的研究

研究了高静压对啤酒酵母Ｓ．ｃ．Ａｓ２．１３６４的细胞及其生长速度的影响，并探讨了不同ＰＨ和不同种类的有机酸环境条件对啤酒酵母耐压性的影响。实验结果表明：３００ＭＰａ以上压力处理１５ｍｉｎ后，啤酒酵母基本死灭，细胞美蓝染色蓝色，染色率达９５％以上，扫描电镜显示细胞形态破裂、内容物外泄；经高静压处理的酵母生长速度比对照样滞后４８ｈ；不同的ＰＨ与有机酸对高静压（１００－５００ＭＰａ／１５ｍｉｎ）灭菌效果     

顺铂增强携带IL-24基因的双调控溶瘤腺病毒对结肠癌细胞株的杀伤作用

研究端粒酶逆转录酶启动子hTERT启动子和缺氧反应元件HRE双调控的溶瘤腺病毒SG500-IL24联合化疗药物时人结肠癌细胞株的体外杀伤作用.采用MTT法检测病毒联合化疗对结肠癌细胞株HCT-116、SW620以及人正常细胞株L02增殖的抑制作用;利用Hoechst 33342染色对病毒一化疗疗法诱导的HTT-116细胞凋亡进行形态学观察;通过Western blot检测病毒-化疗疗法诱导的HCT-116细胞凋亡信号通路的变化.结果表明SG500-IL24或不携带外源基因的SG500联合低剂量的顺铂后,其对结肠癌细胞株HCT-116、SW620的杀伤作用显著提高(p<0.05);相同条件下对人正常细胞株L02无明显抑制作用.通过Western blot对联合疗法作用机制的初步探索表明,联合疗法增强caspase依赖性细胞凋亡通路的信号.     

二氯乙酸钠对溶瘤腺病毒ZD55-Smac抑制肝癌细胞生长的影响

研究了溶瘤腺病毒ZD55-Smac联合小分子药物二氯乙酸钠(DCA)对人肝癌细胞株的体外抑制效果.首先通过PCR及Western blot鉴定病毒构建正确与否及有无野毒污染,再用MTT 法分别检测DCA、ZD55、ZD55-Smac以及DCA与病毒联合对肝癌细胞株Huh-7、PLC、SMMC-7721及肝正常细胞QSG-7701生长的抑制作用;通过倒置显微镜观察了DCA、ZD55-Smac以及DCA和ZD55-Smac联合使用对肝癌细胞株PLC及肝正常细胞QSG-7701的细胞形态变化的影响;利用Hoechst33342染色观察了所处理细胞的凋亡形态学变化.结果表明DCA联合ZD55对肝癌细胞株Huh-7、PLC和SMMC-7721的抑制效果相比较单药物治疗或单病毒治疗有显著增加,而DCA联合ZD55-Smac对肝癌细胞的抑制效果比单病毒治疗有所减弱.该研究为进一步探究ZD55-Smac联合药物治疗打下基础.     

绿球藻TC品系提取液促进鼠肝癌细胞的生长

以长期热诱导建立了一种绿球藻(Chlorococcum infusioum)的嗜温品系,简称CTCS。在PBS(磷酸缓冲液)中的CTCS细胞提取液明显促进H_4肝癌细胞株在DME培养基和0.5％FSB(胎牛血清)中的生长。当CTCS提取液蛋白质浓度为12.4微克/毫升时,可使H_4肝癌细胞数量在6天中比对照(不加CTCS提取液)增加12.5倍。     

籼米制备脂肪替代品的酶水解工艺

研究了以籼米为基质的脂肪替代品加工过程中的酶水解工艺，采用响应面分析法得到了最佳酶解工艺条件，并对不同干燥工艺进行了比较，结果表明，酶水解的最佳温度为85－92℃，酶用量为8U／g，采用喷雾干燥方法所得到的产品具有良好的复水性能。     

血液细胞形态识别研究

血液细胞形态识别在白血病检查与诊断中起重要作用,细胞形态特征提取对于识别性能有很大影响,通过提取反映血液细胞形态几何、纹理及对几何变形不敏感的二维不变矩构成特征矢量,基于SVM分类器研究骨髓血液细胞形态的识别,特别研究了急性淋巴细胞白血病L3型细胞与骨髓正常细胞的识别,得到正确识别率为97%.     

单极性复合生物驻极体材料及其对细胞生长的影响

为了探索复合生物驻极体材料的带电性能对细胞生长的影响，研制了几种不同配比的胶原／壳聚糖复合生物驻极体材料，分析了它们的ＴＳＤＣ图谱（热刺激去极化电流谱），筛选出了一种性能较好的胶原／壳聚糖复合生物驻极体材料，它在极化状态时，主峰温度和电流分别为３７℃和２×１０－９Ａ细胞培养实验研究发现，当该材料负极化时，能够有效地促进正常细胞的生长；当材料正极化时，能够抑制癌细胞的生长这表明，对复合生物驻极体材料进行合理设计，将对临床医学应用具有重要意义     

紫甘薯花色苷对人肝癌细胞HepG2的作用

以人肝癌细胞HepG2为模型研究紫甘薯花色苷的抗肿瘤活性.通过MTT实验检测紫甘薯花色苷对HepG2细胞的生长抑制作用,HE染色观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞周期变化.MTT结果表明,不同浓度的紫甘薯花色苷处理HepG2细胞24、48、72,h后,低浓度的紫甘薯花色苷促进肿瘤细胞的生长,高浓度的紫甘薯花色苷抑制肿瘤细胞的生长,800,μg/mL花色苷处理72,h抑制率高达80%.HE染色结果表明,正常HepG2细胞的细胞核和细胞质清晰可见,而加入花色苷后,出现细胞核固缩、染色质浓集于核膜表面、形成新月形致密小斑块、细胞膜形态变得不规则等凋亡的特征.流式细胞仪分析结果表明,花色苷能够促进肿瘤细胞的凋亡,且细胞的凋亡率随花色苷浓度的增加而增大.     

生物组织自体荧光光谱诊断的模拟实验研究

讨论了一种快速、无损伤定位疾病的生物组织自体荧光诊断技术，并对正常和病变的猪血溶液进行了模拟研究，得出了在530－550nm范围内，正常组织荧光强度明显低于病变组织的结果，在531．6、532．6nm三处光谱峰是正常血液组织荧光谱的特征峰，对临床有一定的指导意义。     

脂肪酶产生菌的筛选及其理化特性研究

在食堂下水道污水、肉联厂及油田地下水等富含油脂的地方采样,利用维多利亚蓝B平板筛选模型,,以乳化橄榄油为底物的NaOH滴定法为测酶活主要方法,筛选到5株具有明显脂肪酶活力菌株。继而对所得菌株的理化特征进行研究,即对其群体形态、菌落形态、在半固体或液体培养基中的生长状态以及个体形态、细胞形态、大小、排列、运动性、特殊构造...     

缺氧胁迫小细胞团法选育高产高酮苷悬池细胞系

以银杏优良品种的种苗诱导愈伤组织，考察了B5，SH，MS，White4种培养基对银杏愈伤组织生长性状和黄酮苷合成能力的影响，采用缺氧胁迫小细胞团法从愈伤组织中筛选高产黄酮苷的细胞系，并对细胞系在悬浮培养时的条件进行了优化。结果表明：TZG－1培养周期18d，生长指数为4．12，黄酮苷含量为1．25％，比愈伤组织提高了257．1％；MS培养基有利于形成质地松软的愈伤组织，当培养基中NH4^ 与NO3^-的浓度比为20．6／39．4或10．3／29．1，蔗糖质量浓度为30g/L或40g/L,pH值为5．6－6．0时，有利于细胞生长和黄铜苷合成。     

辣椒茎尖培养脱毒研究

以云南小米椒为试材，经无菌发芽，2－3片真叶时，经35℃处理4周，取无菌苗生长点，以Ms为基本培养基，在其中分别添加6－苄基腺嘌呤6－苄基腺嘌呤（6－BA）、玉米素（ZT）、细胞激素素（KT）、赤霉素（GA3）、吲哚酸（IAA）和萘乙酸（NAA）等生长调节剂进行培养，经筛选，发现其中Ms BA7.0mg/l IAA0.05mg/l比较适宜于茎尖培养，Ms ZT8.0mg/l GA32.0mg/l比较适宜于茎的伸长，将长2cm以上的芽无根苗转入1／2Ms IAA0.2mg/l NAA0.1mg/l的培养基上有利于根的生长，生根后移入土壤可正常生长1－1.5mm长的茎尖成苗脱毒率达96．3％，0．1－0.5mm长的茎尖脱毒率达100％。