以乙酰丙酸为原料合成5-羟基乙酰丙酸的研究

对新型聚酯单体5 羟基乙酰丙酸（5-HLA）的合成工艺进行了改进和优化.以来源于生物质资源的乙酰丙酸(LA)为原料，通过改进的溴化和水解反应合成了5-HLA.优化溴化反应温度、液溴滴加速率、反应介质用量等溴化反应条件；同时利用3 溴乙酰丙酸甲酯等溴化物的分子内重排和歧化反应，对溴化反应生成的副产物回收再利用，将中间产物5 溴乙酰丙酸甲酯的产率从文献值30%提高到45%.5-溴乙酰丙酸甲酯经一步水解、乙醚连续萃取和重结晶得到5-HLA.改进后的工艺基于乙酰丙酸的产率为30%，与二步法相比，操作时间短，产率大大提高.     

5-氨基乙酰丙酸在18种园林植物上的应用效果

以18种园林绿化植物为材料,通过叶面喷施或者根系浇灌50 mg·L-15-氨基乙酰丙酸(ALA)溶液,25 d后检测叶片形态特征和叶绿素快速荧光特性,发现ALA处理可以增大植物叶片面积与厚度,提高叶绿素含量。同时,它可以提高叶片PSII和PSI反应中心活性。这不仅表现在PSII反应中心供体侧放氧复合体和受体侧电子传递活性上升,而且表现在PSI反应中心氧化活性和还原活性提高。根据不同物种叶片形状和叶绿素荧光特性对ALA处理的响应,可以将这些园林植物分为4类,其中遭遇倒春寒冻害的香樟单独一类最为敏感,表明ALA可以运用于一般园林植物常规生产,尤其可以用于灾后补救。     

2-[2-(5-甲基苯并噻唑)偶氮]-5-二乙氨基苯甲酸与铜的显色反应研究

研究了显色剂2－[2－（5－甲基苯并噻唑）偶氮]－5－二乙氨基苯甲酸（5－Me－BTAEB）与Cu2+的显色反应。试剂与Cu2+在pH为3．0～5．5的醇－水溶液中形成蓝色稳定的1：1配合物，其最大吸收波长为650 um，表观摩尔吸光系数为7．33 × 10~4L·mol-1·cm－1。Cu2+的浓度在50～800 μg／L时服从比尔定律。     

蜡样芽胞杆菌深圳株754-1 PLC基因的克隆及表达

以本实验室分离筛选的高产PLC的蜡样芽胞杆菌深圳株754—1为供体菌，以大肠杆菌DH5仅和BL21（DE3）为受体菌，构建高效表达胞内PLC的工程菌。以754-1菌基因组为模板。经PCR扩增，将得到的PLC基因连接到T载体上，转入大肠杆菌DH5仅。经Amp抗性筛选的阳性克隆子提取重组质粒，双酶切，回收含PLC基因的片段并将其克隆到pGEX-KG载体，获得重组质粒pGEX-KG-PLM，该重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）。用IPTG诱导表达，SDS-PAGE分析，在分子量为38kd处有一条明显的表达带。     

小颗粒ZSM-5沸石在表面活性剂体系中的合成与表征

通过水热法，以十二烷基苯磺酸钠（SDBS）、聚乙二醇（PEG）、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯（Tween）为表面活性剂制备小颗粒ZSM-5沸石，研究了不同表面活性剂及合成条件对小颗粒ZSM-5沸石合成的影响。利用 X 射线衍射（XRD）、扫描电镜(SEM)对所得产品进行了表征。结果表明：吐温添加量为2.5g时效果最好，可得到分散度较好的小粒径产品。     

纤维素酶E5基因在E．coli中的克隆与表达

将含纤维素酶E5基因的质粒pD541用Nco Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切后,经电泳分离获取含E5基因的小片段,将该片段定向插入表达质粒pSE420的多克隆位点上,进一步将重组DNA转人大肠杆菌宿主．采用刚果红染色法检测出选择性平板上的转化子具有羧甲基纤维素酶(CMCase)活性．摇瓶产酶试验进一步表明,基因重组后的大肠杆菌能高效表达E5基因并将产物分泌出胞外,培养液中可检测到的CM-Case活力达31．6U／mL．该研究结果为进一步构建高效纤维素分解菌株打下了良好的基础,具有重要的学术意义和实际应用价值．     

色氨酸酶在大肠杆菌周质中的分泌融合表达

按照大肠杆菌偏爱密码子合成编码“BspTI位点一连接肽（Gly—Ser—Gly—Ser—Gly一6His—Tag—Ek—site（Asp—Asp—Asp-Asp—Lys）”序列的DNA序列,利用重叠延伸拼接技术,将其与色氨酸酶基因TnaA拼接,利用BspTI和HindⅢ重组至pET-39二硫键形成蛋白DsbA基因的下游,转化表达宿主EscherichiacoliBL21（DE3）,成功构建分泌融合表达型色氨酸酶基因工程菌．通过摇瓶培养实验研究了诱导剂浓度、诱导温度及诱导时间对色氨酸酶活性的影响．工程菌以舍2％甘油的LB为培养基,A600=0．5时,加入终浓度为0．05mmol／L的Isopropyl伊D-1-thiogalactopyranoside（IPTG）,30℃诱导培养8h,可在周质空间中表达高活性的色氨酸酶融合蛋白．在培养基中添加0．5％的甘氨酸,酶活可提高6．3倍．本实验首次实现了色氨酸酶基因的周质分泌融合表达．     

Al2（SO4）3催化纤维素生成乙酰丙酸乙酯的实验研究

以Al2（SO₄）₃为固体酸催化剂,考察其在乙醇/甲苯体系中催化纤维素生成乙酰丙酸乙酯的工艺,探讨了共溶剂甲苯的体积分数、反应温度、催化剂用量以及反应时间对乙酰丙酸乙酯产率的影响,同时考察了该催化剂对不同碳水化合物的催化作用及其重复利用性.结果表明:在甲苯体积分数为10%,反应温度为180℃,催化剂用量为0.8 g,反应时间为3 h时,纤维素醇解转化为乙酰丙酸乙酯的摩尔产率高达51.6%;果糖、葡萄糖、蔗糖和菊糖转化生成乙酰丙酸乙酯的摩尔产率分别为54.3l%、47.3%、51.4%和49.6%,Al2（SO₄）₃对碳水化合物醇解生成乙酰丙酸乙酯具有良好的普遍适用性.该催化剂经回收重复使用5次后依然具有良好的催化活性.     

一种假单胞菌SY5降解石油的动力学研究

为了确定石油降解菌对石油污染物的生物降解特性,选用分离得到的一株石油降解菌假单胞菌SY5,对其降解石油污染物的动力学特性进行了研究．研究结果表明,在30℃,pH=7．2的反应条件下,所筛选的SY5菌对石油具有良好的降解能力,降解石油的反应基本符合一级反应动力学,且随石油初始浓度的增大,SY5降解石油的速率减小,降解受到抑制．在生物降解的过程中,SY5的生长曲线具有明显增长和衰减曲线．在生长阶段,产率系数Y值为0．3873．在内源呼吸阶段,衰减系数bd值为0．1805d^-1,SY5菌自身氧化速度比较快．SY5生物降解石油Monod方程的最大比增长速率胁,和半饱和常数Ks分别为1．6d^-1和150mg／L．     

肝泰乐生产废液常压下水解制备乙酰丙酸

以肝泰乐废液为原料制备乙酰丙酸,并对制备工艺进行优化,得出了废液在酸性条件下回流水解,浓缩,乙醚萃取,活性炭脱色重结晶制备乙酰丙酸的工艺．通过正交实验优化,最佳工艺条件为：废液与水的质量比是0．3,浓盐酸与水的质量比是0．4,600r／min搅拌下,加热回流15h．为肝泰乐生产企业提供了一条综合利用,变废为宝的有效途径．     

过表达hom基因对谷氨酸棒杆菌发酵L-异亮氨酸的影响

谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）中hom基因编码的高丝氨酸脱水酶为L-异亮氨酸合成过程的关键酶,本研究通过在L-异亮氨酸生产菌cglutamicum YILW中过表达高丝氨酸脱水酶,考察过表达高丝氨酸脱水酶对发酵卜异亮氨酸产量的影响．以L-异亮氨酸生产菌cglutamicum YILW基因组为模板克隆horn基因,将horn基因与表达载体pXMJ19连接构建出重组质粒pXMJ19-hom,再转入Cglutamicum YILW构建C．glutamicum YILW（pXMJ19．hom）．通过5L罐发酵研究重组质粒对工程菌的生长、耗糖、L-异亮氨酸产量及副产物积累等方面的影响．结果显示,重组酶的表达使菌株对卜苏氨酸的抗反馈抑制作用得到加强．最终L-异亮氨酸和L-蛋氨酸积累量分别为36．5g／L和2．8g／L,分别较出发菌株提高7％和33％,同时L-赖氨酸合成量仅为2．1g／L,较出发菌株降低了63．8％．     

过量表达苏氨酸脱水酶对谷氨酸棒杆菌合成L–异亮氨酸的影响

考察过量表达解除反馈抑制的苏氨酸脱水酶对谷氨酸棒杆菌发酵生产L-异亮氨酸的影响.将解除反馈抑制的苏氨酸脱水酶基因ilvA（F383V）连接大肠杆菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pXMJ19,过量表达于L-异亮氨酸生产菌株Corynebacterium glutamicum YILW.经5 L发酵罐分批补料发酵产酸实验,与出发菌株C.glutamicum YILW相比,耗糖高峰期滞后,L-异亮氨酸产量增加了10.3%,副产物L-蛋氨酸、L-赖氨酸含量分别降低了33.3%2、6.5%,发酵液中没有L-苏氨酸的累积,乳酸的累积量增加了41.7%.对发酵稳定期的代谢流分布研究表明,过量表达解除反馈抑制的苏氨酸脱水酶使HMP途径流量增加了31.7%,L-异亮氨酸生物合成途径的代谢流提高了8.5%.     

V-5Cr-5Ti合金的动态压缩力学性能及本构关系

利用Hopkinson压杆技术对V-5Cr-5Ti合金动态压缩力学性能进行了实验测试,获得了不同应变率下V-5Cr-5Ti合金的压缩应力—应变曲线,结果显示V-5Cr-5Ti合金具有较强的应变率敏感性。根据实验结果,确定了描述V-5Cr-5Ti合金常温动态性能本构参数,并将实验结果与计算结果进行了比较,两者吻合较好。     

Keggin型配合物H_5PMo_(10)V_2O_(40)催化剂催化氧化反应研究

以钼酸钠、偏钒酸钠、磷酸二氢钠为原料合成H5PMo10V2O40.通过IR进行表征,确认所合成的化合物中多酸阴离子仍保留Keggin结构.将新合成的H5PMo10V2O40杂多酸应用到苯甲醛氧化合成苯甲酸反应中,考察了催化剂用量、氧化剂30%H2O2的用量、反应时间、反应温度等对苯甲酸收率的影响.最佳工艺条件为催化剂苯甲醛=1.9×10-31(摩尔比),n(H2O2)n(苯甲醛)=6.5 1,反应时间2.5 h,反应温度80℃.苯甲酸的收率达到85%以上.     

微波法制备强酸性Y-MCM-41复合分子筛

以高岭土和一定的硅源为原料,用微波法合成复合分子筛Y-MCM-41。采用X射线粉末衍射(XRD)、红外光谱仪(FT-IR)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电镜(TEM)、比表面积及孔隙度分析仪和NH3-TPD等仪器对合成的Y-MCM-41复合分子筛进行了一系列的结构和性能表征。结果表明,Y-MCM-41分子筛含有介孔和微孔双重孔结构,其比表面积为791.14 m2/g,平均孔径为2.46 nm,是具有强酸性的大比表面积复合分子筛。     

高碳水化合物条件下鼠肌GLUT4表达与CaMK／HDAC5关系的研究

观察Caffeine诱导骨骼肌细胞GLUT4表达的潜在分子调控机制是否是Caffeine—Ca2＋-CaMKII—HDAC5信号通路。8周龄雄性Wistar大鼠42只,随机分为高碳Caffeine组（HGC）、高碳KN62组（HGK）、低碳Caffeine组（LGC）和低碳KN62组（LGK）,每组12只。分别给予不同饮食加Caffeine或KN62刺激。检测caMKⅡ（Thr286）位点、HDAC5（sel498）位点和HDAC5（Ser259）位点磷酸化水平以及GLUT4蛋白表达水平。与HGc组相比LGC组GLUT4蛋白表达、CaMKⅡ（Thr286）、HDAC5（Se-98）HDAC5（Ser259）磷酸化水平都显著增加性高于HGC组和LGK组。无论是在低碳还是在高碳浓度下骨骼肌细胞GLUT4蛋白表达变化都对应着上游caMKⅡ蛋白位点（Thr286）磷酸化水平和下游HDAC5蛋白位点（Ser498）和（Ser259）磷酸化的变化,所以CaMKⅡ调节GLUT4表达的机制至少涉及到CaMKⅡ征用转录抑制子HDAC5。     

手性樟脑磺酸的合成及表征

以樟脑粉为原料合成了消旋樟脑磺酸;采用l-苯甘氨酸为拆分剂,经拆分、纯化分离得到了手性樟脑磺酸。合成消旋樟脑磺酸的适宜工艺条件为：反应时间25 h,浓硫酸的滴加速度0.5～1.0 mL/min,反应温度10℃,消旋樟脑磺酸的收率85.6%,熔点195～201℃。拆分的适宜工艺条件为：物料比n（dl-樟脑磺酸）∶n（l-苯甘氨酸）=1∶0.95,d-樟脑磺酸拆分收率64%,熔点194～196℃,[α]2D0=＋23°（C=5,H2O）;l-樟脑磺酸拆分收率90.8%,熔点197～198℃,[α]2D0=-22.5°（C=5,H2O）。样品经熔点、旋光率、红外光谱等检测方法,证明与目标产物一致。     

复合脱色絮凝剂处理溴氨酸水溶液研究

以双氰胺和甲醛为主原料,以亚硝酸钠为催化剂,在一定条件下制备改性双氰胺甲醛脱色絮凝剂后不经分离直接处理溴氨酸水溶液．以溴氨酸水溶液的脱色率和CODc,去除率为考核指标,考核了反应物料摩尔比、催化剂用量等因素对溴氨酸水溶液性能的影响．结果表明：在反应温度为75℃,反应时间为4h,反应物摩尔比为n1（双氰胺）：n2（甲醛）：n3（氯化铵）：n4（尿素）：n5（亚硝酸钠）=1：2．4：0．7：0．1：0．05的条件下,脱色絮凝剂对溴氨酸水溶液的脱色率和cODcr去除率分别为98．0％和65．4％．     

1株阿魏酸降解菌的筛选与降解特征研究

阿魏酸是导致很多作物产生连作障碍的自毒物质。筛选出1株高效降解阿魏酸的细菌,初步鉴定为葡萄球菌属,命名为A WS4B ,研究了A WS4B对阿魏酸的降解特征,探讨了其降解途径。结果表明,当无机盐培养基中阿魏酸的浓度为100 mg／L 时,菌株AWS4B 72 h可降解99.97％。降解过程符合一级动力学模型,反应的活化能 Ea 为19.88 kJ／mol ,降解方程常数 k0为3.26＆#215;10－4,得出了菌株AWS4B降解阿魏酸的预测模型方程。AWS4B降解阿魏酸的底物来源比较广泛。菌株AWS4B对阿魏酸降解的可能途径是非氧化脱羧形成香草醛,再氧化形成香草酸,脱甲基后形成原儿茶酸,最后原儿茶酸苯环裂解后分解为水和二氧化碳,最终实现阿魏酸的降解。     

深黄被孢霉H3,3410-5γ-亚麻酸发酵的实验研究

γ-亚麻酸是人体必需脂肪酸。深黄被孢霉被认为是潜力较大的γ-亚麻酸的发酵生产菌。对深黄被孢霉突变株H3,3410-5产γ-亚麻酸发酵培养基和发酵实验优化,结果表明,菌丝体平均得率为25.9 g/L,总油脂平均含量为44.0%,油脂中γ-亚麻酸比率为10.97%。三项指标分别比优化前提高了约6.6%、5.8%和16.3%。