一株生孢噬纤维细菌的16S rDNA 基因序列分析

利用双层平板法从土壤中分离获得了一株能够降解纤维素的好氧性滑动细菌--生孢噬纤维细菌Sporocytophaga sp.JL02,通过菌株基因组DNA的提取、16S r DNA的PCR扩增及克隆、16S r DNA的全序列分析等手段,对该菌株的16S rDNA的基因序列进行了研究.通过扩增,得到了一长度为1560bp的16S rDNA的基因,并对其基因序列进行了分析.     

一株赣南脐橙根际吲哚乙酸产生菌的筛选及其发酵特征

为了给脐橙微生物肥料的研制和生产提供优良菌株,从赣南脐橙根际土壤中分离获得19株菌能产吲哚乙酸(Indole-3-Acetic Acid,IAA)的菌株,其中IAA-6菌株产IAA能力最强.对IAA-6菌株进行菌落形态观察和16S rDNA序列分析,利用分光光度法测定产IAA的能力,并对最佳碳氮源、产素等发酵条件进行了筛选.结果表明,IAA-6菌株菌落形态光滑、透明、黄色,初步命名IAA-6菌株为Pantoea sp.IAA-6,其最适发酵条件为p H为7,装液量为75 mL/250 mL,培养时间为29 h,碳源为淀粉,氮源为蛋白胨,IAA产量可达到33.299 mg/L.研究发现IAA-6菌株具有较强的IAA产生能力,具有作为脐橙功能微生物肥料研发的潜力,可进一步对其进行开发研究.     

南洞庭湖湿地优势植物重金属含量及富集特征

通过野外调查采样,分析了南洞庭湖湿地8个采样点土壤和优势植物中重金属含量,以及南洞庭湖湿地9种优势植物对Cd、Cu和Sb的吸收及富集特性.结果表明,南洞庭湖湿地土壤中3种重金属元素的平均含量均超出湖南省土壤背景值和全国土壤背景值,土壤受Cd污染最严重.9种优势植物体内Cd、As和Sb的含量较高,具有修复洞庭湖湿地土壤Cd、As和Sb污染的潜力.其中蒌蒿（Artemisia selengensis）对Cd和Sb表现出显著的富集转移特征,可作为洞庭湖湿地土壤污染修复的备选材料.八棱麻（Boehmeria siamensis）对Sb的富集系数和转运系数均大于1,对重金属有较强耐受性,作为重金属污染的修复植物具有较好的应用前景.     

快速筛检活性污泥中硫酸盐还原菌的新方法

由于硫酸盐还原菌(SRB)的生物学多样性以及在系统发育学上的分散性,采用传统方法筛选活性污泥中的SRB准确率不高,且耗时、耗力,而直接采用16S rRNA基因(rDNA)序列分析方法既耗资又不适合从大量细菌中检测SRB.本研究开发出一种新方法,采用SRB16S rDNA特异引物SRB385F为正向引物,真细菌通用引物EUB926R为反向引物,通过梯度PCR,选择适当的退火温度来扩增SRB通用培养基分离的细菌,通过扩增条带与阳性和阴性对照比较,判断待检测菌株是否为SRB,整个过程仅需6h即可完成.将测试菌株进行16S rDNA测序表明该技术获得的阳性菌株全部为SRB.     

石油污染土壤生物修复的强化技术

为探索石油污染土壤的高效修复方法,从实验室保存的优势菌中筛选得到4株降油效果最佳菌,采用摇床和恒温培养箱培养,对含油量为5%的石油污染土壤进行微生物菌剂强化处理和环境强化实验。微生物菌剂强化结果表明:4种菌和除油效果最好的A、C、D混合菌3d可将石油烃依次降解24%、19.81%、22.55%、26.46%、39.67%;并对该菌群的最佳投加配比进行确定,A、C、D菌群数量的最佳配比为N_A:N_C:N_D=1:2:0.5,3d内菌群A、C、D在最佳接种配比情况下可将石油烃降解44.2%。环境强化实验结果表明:A、C、D菌群在最佳修复条件营养物质C:N:P为75:8:3、表面活性剂为0.5%、通气条件为6层纱布、电子受体H₂O₂的加入量为1.5%下,3d内石油烃降解61.46%,比自然条件下修复的除油率4.7%提高了56.76%,较只进行菌种强化时最高除油率44.2%提高了约17%。     

一株Ectoine生成菌DL031的分离及特性研究

从大连普兰店盐场盐池土壤中分离到一株产渗透压补偿溶质Ectoine的菌株DL031,通过16SrDNA序列分析,菌株DL031与Halomonas marina相似性为99%.菌株DL031可在含有0～200 g/LNaCl培养基中生长,生长最适NaCl浓度为100 g/L.DL031菌株在含有NaCl的培养基中诱导能合成Ectoine;在含3 mol/L NaCl的培养基,30℃诱导培养48 h,Ectoine的合成量为98.8 mg/L.     

一株抗铅细菌的筛选及鉴定

重金属铅对环境和人类危害极大,有些微生物具有耐受性,可用于治理环境中的铅。从电镀厂附近的土壤中分离、筛选出一株可抗Pb2＋浓度达2000mg/L的菌株FP 2000,该菌经过革兰氏染色,在显微镜下观察确定为短棒状革兰氏阴性菌,最适合的生长条件为：温度34-40℃,p H值4-6。并对该菌株16S r DNA进行测序,分析测序结果后鉴定了该菌种为克雷伯氏菌。为进一步研究微生物抗铅机理奠定基础。     

一株Ectoine生成菌DL031的分离及特性研究

从大连普兰店盐场盐池土壤中分离到一株产渗透压补偿溶质Ectoine的菌株DL031,通过16SrDNA序列分析,菌株DL031与Halomonas marina相似性为99%.菌株DL031可在含有0～200 g/LNaCl培养基中生长,生长最适NaCl浓度为100 g/L.DL031菌株在含有NaCl的培养基中诱导能合成Ectoine;在含3 mol/L NaCl的培养基,30℃诱导培养48 h,Ectoine的合成量为98.8 mg/L.     

微生物絮凝剂产生菌筛选和廉价培养

微生物絮凝剂具有安全高效的特点,具有巨大应用潜力.为开发更多微生物絮凝剂,本研究从活性污泥中分离纯化高效絮凝剂产生菌株,初步确定其活性成分分布,并探讨利用糖蜜废液对其廉价培养的可行性.研究结果表明,16株能产生微生物絮凝剂的菌株中,呈革兰氏阴性的Y3和S1菌株的微生物絮凝特性最好,对高岭土悬浊液絮凝率分别达到98.9%和99.5%,其絮凝有效成分多为细胞外产物.稀释20倍、40倍和60倍的废糖蜜中菌株Y3和S1均可生长,在稀释40倍的废糖蜜中两种菌生长量均最大,且在废糖蜜中均保持了絮凝特性,表明糖蜜废液可用于Y3和S1菌株的廉价培养.     

一株Triton X⁃100降解菌的分离鉴定及降解条件优化

从某化工厂污水处理车间好氧曝气池的活性污泥中,筛选了一株对非离子表面活性剂Triton X?100具有降解能力的菌株ISB5。对菌株的16S rDNA进行测序和比对分析,将菌株ISB5鉴定为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）。进一步对菌株ISB5降解Triton X?100的培养条件进行考察,得到了菌株的适宜降解条件：培养温度为30 ℃,Triton X?100的初始质量浓度为4 g/L,培养时间为28 h,振荡速率为150 r/min,装液量为100.00 mL,接种量为1.00%（菌株ISB5与培养基的体积比）。在该条件下,TritonX?100的降解率可达93.0%以上。     

长白山不同海拔湿地植物群落结构及其物种多样性研究

以长白山自然保护区为研究对象,对不同海拔湿地植物群落结构及其物种多样性进行研究.调查研究发现:长白山北坡湿地有植物37科83属142种,南坡湿地有植物33科71属103种,西坡湿地有植物37科83属132种,其中西坡和南坡的植物科、属相似性较高.通过实地调查记录和重要值的计算,对长白山北坡、南坡、西坡不同海拔湿地植物群落结构名称及其湿地类型进行了判定和划分,并根据3个坡向上不同海拔湿地样方中的植物种数,探讨了长白山湿地植物多样性随海拔梯度变化的趋势.     

BEAC工艺中微生物群落变化和种群稳定性

为了解生物增强活性炭(BEAC)上微生物群落变化和种群的稳定性,从运行13 d、26 d和39 d的BEAC炭柱的上层、中层、下层进行取样,通过细胞裂解来获取基因组DNA,纯化后,用对细菌16S rDNA基因V3区具有特异性的通用引物F357-GC和R518对其进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,得到长约250 bp的PCR产物.用变性梯度凝胶电泳(DGGE)对PCR产物进行分离,获得炭柱内微生物群落的16S rDNA基因V3区的指纹图谱.研究表明:随着反应器的运行,活性炭柱内微生物的群落结构、种类以及数量都具有时序动态性;原水带入的其他菌的种类和数量不断减少;人工强化固定的5株菌一直存在,它们在空间上呈现不同的分布,这些菌经历了动态的演替后,逐渐成为优势菌群,群落结构趋于稳定.固定化菌群的稳定性从根本上保证了整个系统的运行和处理效果的稳定性.     

PCR技术对浓香型白酒糟醅细菌菌群的解析

为探索中国浓香型白酒发酵糟醅中细菌类微生物区系的形成和演变规律，通过发酵全过程跟踪取样和借助PCR扩增技术，对窖池中心糟醅样品进行了DGGE分析和16SrDNA同源性比较。研究发现，发酵初期表现出明显的微生物多样性分布，共检出Erwinoa、Kozakia、Acetobacter、Bacilllus、Staphylococcus、Lactobacillus、Granulicatella、Arthrobacter、Microbacterivm、Shewanella、Clostridium以及未分类Clostidales等11个以上的细菌分类属；随着发酵的进行，Lactobacillus属细菌成为主要优势菌，检出的有效克隆达到全部克隆的56．1％，并全部为Lac．Acetotolerans（98％）菌株。主要细菌菌群的数量分布及变化趋势揭示，在浓香型白酒糟醅发酵过程中，Lactobacillus属细菌可能充当着重要的角色。     

超声波破碎法提取活性污泥DNA及其DGGE分析

为快速提取活性污泥中的微生物DNA,进一步应用于变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分析其群落结构,采用细胞超声波破碎法直接提取反应器活性污泥DNA,以16S rRNA V3区域通用引物进行PCR扩增,随后利用DGGE技术对扩增产物的多样性进行评估.结果表明,超声波破碎法可以快速地提取活性污泥DNA,用超声波破碎法提取到的活性污泥克服了PCR扩增困难的问题.在一定的超声波功率下,超声时间对DNA产率、PCR扩增效率和DGGE分析均有很大影响,实验的最佳超声时间为27 s.DGGE分析表明,用该法提取到的DNA种类较为丰富,多样性较好,种群强度最高能达到0.7 OD,能够进一步应用于群落结构分析.     

PCR-DGGE在真菌群落研究中的应用解析

论述了变性梯度凝胶电泳（DGGE）在真菌群落结构研究中的技术应用的主要步骤：从样品中直接提取真菌DNA,选取5′端含GC夹的特异性引物对18S rDNA或IST序列等的部分片段进行扩增,得到合适的目的DNA片段,并在变性梯度的聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳,使不同来源的真菌DNA片段有效分离,再进行各种分类分析。     

PCR-DGGE技术分析浸矿体系细菌群落结构的实验优化

为了研究低品位黄铜矿细菌搅拌浸出的浸矿菌液中的细菌群落结构,对 PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术相关的实验方法进行了优化,主要涉及低丰度基因组 DNA提取方法优化、16SrRNA基因的 PCR扩增条件优化以及变性梯度凝胶电泳条件的优化.结果表明,采用分级离心多次浓缩的方法收集矿浆样品中的菌体,再用试剂盒提取基因组 DNA,有较好效果;使用含特定“GC夹板”的引物5′-CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGTCCCGCCGCCCCCGCCCG-3′进行热启动降落 PCR,能显著提高目的条带的 PCR扩增效率;当 DGGE电泳设置温度为60℃左右,胶浓度为6%,尿素变性梯度为30%~50%,恒定电压为100V,时间为9h时,可以获得效果较好的 DGGE电泳图谱,该优化方案提高了对浸矿体系中细菌群落结构的检测效果     

超高温堆肥过程中微生物群落及其理化性质研究

为了研究微生物在超高温堆肥过程中的变化及其对堆肥的影响,利用聚合酶链式反应 - 变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction - denaturing gradient gel electrophoresis, PCR - DGGE)技术分析了超高温堆肥畜禽粪便中微生物的组成结构,并检测了其理化性质(温度、含水率、碳氮比(C/N)和pH)随时间的变化情况.研究结果表明:不同堆肥阶段其主要含有的微生物不同,其中优势菌门为Firmicutes; 在超高温堆肥过程中,温度、含水率和C/N随堆肥时间总体呈逐渐下降趋势,而pH随堆肥时间总体变化趋势不大且pH值大于8; 腐熟35 d后发酵基质趋于稳定.该研究结果可为超高温堆肥畜禽粪便发酵菌种的筛选和功能菌剂的制备提供理论基础.     

长白山圆池湿地生态系统自然环境分析

根据野外调查和资料收集,对长白山圆池湿地生态系统的地理环境、圆池的群落特点、圆池的群落外貌、圆池的浮游生物、圆池泥炭沼泽类型等进行了全面系统性的阐述与分析,为长白山圆池的保护与开发提供了科学依据.     

基于GIS的长白山地区山体滑坡易发程度分析

将地理信息系统（GIS）和遥感技术（Rs）相结合,利用地质图、土壤图、土地利用图、坡度图、坡向图对长白山地区进行了山体滑坡易发程度分析．首先基于遥感技术对长白山地区的卫星图像进行了分类,并绘制了土地利用图,然后用长白山地区的数字高程模型分别获取了坡度和坡向信息;其次利用AHP技术计算了5种山体滑坡影响因子的重要度,结果显示坡度重要度最高,坡向重要度最低;最后根据山体滑坡影响因子的重要度,使用GIS的栅格数据叠置功能绘制了山体滑坡易发区划图,图中显示最危险区域（危险度≥O．9）主要分布在集安市、临江市和和龙市周围的山区地带中靠近中朝边界的地区．     

长白山不同区域人参中挥发性、半挥发性成分的研究（英文）

将气流吹扫微注射器萃取(GP-MSE)与气相色谱质谱(GC-MS)联用,建立了一种快速分析长白山人参中挥发性、半挥发性成分的方法.在长白县人参中,共确定了45种化合物(占总组分含量的87%),其中主要化合物有呋喃类(30%)、酸类(30%)和醛酮类(12%).用该方法测定长白山不同区域人参中挥发性、半挥发性成分显示,不同区域人参中挥发性、半挥发性成分的组成相似,但含量有显著差异.研究表明,GP-MSE样品前处理方法对研究植物中挥发性、半挥发性成分有良好的应用前景,有助于植物资源的开发利用.