姜黄素防治慢性低O2高CO2大鼠肺动脉高压与c-Jun、c-Fos的关系研究

目的: 研究姜黄素对慢性低O₂ 高CO₂ 大鼠肺动脉高压及肺动脉管壁(c-Jun和C-Fos表达的影响。方法: 36只SD大鼠随机分为正常对照组、低O₂高CO₂,组、低O₂高CO₂+姜黄素组(简称姜黄组)。采用围像分析、免疫组化和组织原位杂交技术等方法观察姜黄素对慢性低O₂ 高CO₂ 大鼠肺动脉压力、血管显微结构及肺动脉管壁原癌基因c-Jun和c-Fos表达影响。结果: 血流动力学检测显示姜黄素组mPAP较低O₂高CO₂ 组明显降低(P<0.01),组间mCAP比较差异元显著性。光镜下姜黄素组肺细小动脉内弹力板扭曲、中膜平滑肌细胞增生及管腔狭窄程度均明显轻于低O₂高CO₂ 组。电镜下姜黄素组大鼠肺细小动脉内皮细胞结构基本正常,中膜平滑肌细胞增生较轻,胶原少见;外膜胶原纤维较低O₂高CO₂ 大鼠明显减少。免疫组化法发现肺细小动脉c-Jun和c-Fos平均吸光度值低O₂ 高CO₂ 组明显高于正常对照组( P<0.01 ),姜黄素组明显低于低O₂高CO₂ 组( P<0.01 );原位杂交法显示肺细小动脉管壁e-JunmRNA平均吸光度值姜黄素组显著低于低O₂,高CO₂组(P<0.01)。结论: 姜黄素有抑制慢性低O₂高CO₂性肺动脉高压和改善肺血管结构重建的作用,下调c-Fos,c-Jun及其基因的表达,抑制血管平滑肌细胞的增殖可能是其重要作用机制。     

慢性低O2高CO2大鼠血管内皮生长因子表达及参一胶囊的影响

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF) 在低氧性肺动脉高压形成中的意义及参一胶囊对其影响。 方法 采用ELISA 法、透射电镜、原位杂交技术等方法, 观察正常对照组、低O₂ 高CO₂ 4 周组、低O₂ 高CO₂ 4 周+参一胶囊组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心室重量比(RV/LV +S)、血清和肺组织的VEGF的含量、肺细小动脉的超微结构、肺组织VEGFmRNA表达的变化。 结果 低O₂ 高CO₂ 组大鼠的mPAP、RV/LV +S、血清和肺组织的VEGF 的含量明显高于正常对照组(P <0.01)。低O₂ 高CO₂ 4 周+参一胶囊组大鼠mPAP、RV/LV +S、血清VEGF 显著低于低O2 高CO₂ 组(P <0.01), 肺组织的VEGF 的含量也低于低O₂ 高CO₂ 组(P <0.05)。低O₂ 高CO₂ 组大鼠肺细小动脉中膜平滑肌细胞明显增生、胶原纤维较正常对照组增多, 低O₂ 高CO₂ 4 周+参一胶囊组较低O₂ 高CO₂ 组则明显减轻。原位杂交显示低O₂ 高CO₂ 组大鼠肺细小动脉VEGFmRNA 较正常对照组明显增加(P <0.01), 而低O₂ 高CO₂ 4周+参一胶囊组与低O₂ 高CO₂ 组比较, 则明显降低(P <0.05)。 结论 VEGF 参与了慢性低氧性肺动脉高压的形成, 参一胶囊可通过抑制VEGF 的作用而有效地降低肺动脉高压。     

氨氯地平对高胆固醇大鼠心肌缺血再灌注时一氧化氮合酶的影响

目的: 探讨高胆固醇血症大鼠心肌缺血 再灌注损伤时氨氯地平对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在冠脉血管内皮表达的影响。方法: 雄性Wistar 大鼠分4 组:单纯高胆固醇血症组;氨氯地平组;氨氯地平+N-甲基亚硝基左旋精氨酸甲酯组;氨氯地平+假手术组。大鼠经高胆固醇喂养6 周后,开胸结扎左冠状动脉,缺血30 min 后,行再灌注20 min、2 h。分别用免疫组织化学ABC 法检测冠脉血管内皮eNOS 和iNOS 的表达水平。结果: 缺血前,氨氯地平可显著降低冠脉血管内皮iNOS 表达(P<0.01)。缺血30 min,高胆固醇血症组eNOS、iNOS 表达明显减少(P<0.01),氨氯地平组eNOS 表达上调(P<0.01),iNOS 下调;再灌注20 min 时,高胆固醇血症组冠脉血管内皮表达iNOS 增多,氨氯地平组eNOS、iNOS 表达明显下调;再灌注2 h 时,氨氯地平组NO 水平及eNOS、iNOS表达较高胆固醇血症组轻度降低。各时相点LNAME均可部分阻断氨氯地平对eNOS、iNOS 的效应。结论: 在高胆固醇血症时、缺血期及再灌注早期,氨氯地平可调节eNOS、iNOS 表达,减少心肌缺血再灌注损伤。     

一氧化氮部分介导吡格列酮抑制培养兔胸主动脉平滑肌细胞增殖

目的: 观察吡格列酮(PIO) 对高糖高胰岛素诱导兔胸主动脉平滑肌细胞(VSMCs) 增殖的影响及其与一氧化氮(NO) 的关系。方法: 模拟胰岛素抵抗(IR) 状态培养VSMCs, 四甲基氮唑盐(MTT) 比色法测定细胞增殖, 试剂盒分别检测细胞液中NO 含量及细胞总一氧化氮合酶(NOS) 、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) 活性。结果: PIO 干预后, 正常培养组和模拟IR 培养组VSMCs 含MTT 溶解物的吸光值(A₄₉₀)均低于各自对照组(P <0.01) 。PIO 显著增加VSMCs 总NOS 活性、iNOS 活性以及NO 含量(P <0.01) 。PIO 上述作用在模拟IR 培养时更强, 均可被NOS 抑制剂L-NAME 部分阻断。结论: 在正常或模拟IR 培养时, PIO 抑制VSMCs 增殖的作用部分通过NO 介导。     

理气活血中药防治大鼠血管内皮细胞损伤的实验研究1

目的 观察理气活血中药对大鼠血管内皮细胞(VEC)损伤的防治作用。方法 建立大鼠VEC 损伤模型, SD 大鼠30 只, 随机分为正常对照组、模型组、理气活血组, 每组各10 只。检测并比较循环内皮细胞(CEC)计数、t-PA、PAI 活性、6-keto-PGF_1α含量及血小板最大聚集率(PAg T_max)等指标变化。结果 理气活血组与模型组比较, CEC 计数明显减少(P <0.01);t-PA 活性明显增强(P<0.01), PAI 活性降低(P <0.05), 活性型t-PA升高(P <0.01);6-keto-PGF_1α 含量升高(P<0.01);PAg T_max下降(P <0.01)。结论 理气活血中药能增强VEC 的抗凝及促纤溶功能, 具有良好的VEC 保护作用。     

川芎嗪对心肌细胞核钙转运功能异常的保护

目的: 观察异丙肾上腺素(ISO) 致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞核钙转运功能的变化及川芎嗪对其影响。 方法: Wistar 大鼠皮下注射 5 mg·kg^-1 ISO 液, 造成心肌缺血损伤模型。超速离心分离纯化心肌细胞核。 酶学方法鉴定核纯度和测定核膜Ca²⁺-ATP 酶活性, 同位素法观测核钙的摄取。 结果: 与正常对照组比较, 心肌缺血组(实验组) 心肌细胞核膜 Ca²⁺ 依赖性ATP 酶活性降低 18.1%(P<0.05), ⁴⁵Ca²⁺ 摄取效率也显著降低, 其最大反应速度(V_max ) 降低 54.6%, 细胞核 Ca²⁺ 依赖性ATP 酶的最大反应速度(V_max ) 降低 33.0%(P<0.05), 平衡常数(K_m ) 降低 42.8%(P<0.01);川芎嗪保护组心肌细胞核 Ca²⁺-ATP 酶活性及核 ⁴⁵Ca²⁺ 摄取与正常对照组比较均未见显著性改变。结论: 川芎嗪对 ISO致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞核钙转运功能降低有保护作用。     

甘草酸二铵对大鼠心肌缺血再灌注损伤脂质过氧化及心肌酶活性的影响

目的: 观察甘草酸二铵(DG)对大鼠心肌缺血再灌注损伤脂质过氧化及心肌酶活性的影响。方法: 雄性wistar大鼠30只,随机分为假手术组、缺血再灌注组和DG20mg·kg^-1组。每组10只。采用在体大鼠心肌缺血30min再灌注60min损伤模型,再灌注60min后分别用比色法测定心肌丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、三磷酸腺苷酶(ATP酶)、血清磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,并用酶组织化学方法检测心肌组织琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。结果: DG能显著降低心肌组织中MDA含量和SDH的活性(P<0.05,P<0.01),提高SOD和ATP酶活性(P<0.05,P<0.01),并减少心肌CPK和LDH的释放(P<0.05,P<0.01)。结论: DG具有保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用,其作用机理可能与其降低心肌脂质过氧化,增强心肌细胞SOD、SDH和ATP酶活性有关。     

川芎嗪对儿茶酚胺诱导大鼠心肌损伤时Bcl-2和Fas 蛋白表达的影响

目的: 观察川芎嗪对儿茶酚胺诱导大鼠心肌损伤时心肌细胞Bcl-2 和Fas 蛋白表达的影响。方法: 采用皮下多点注射异丙肾上腺素(ISO,5 mg·kg^-1) 每天1 次, 连续3 d, 诱导大鼠心肌损伤,采用免疫组化方法检测Bcl-2 和Fas 蛋白的水平, 并利用图像分析系统分析蛋白阳性表达区域平均光密度值。结果: 损伤组和川芎嗪保护组心肌细胞Bcl-2蛋白表达较对照组均显著升高(P<0.01), 损伤组Fas 蛋白水平较对照组也显著升高(P<0.01), 川芎嗪保护组的Fas 蛋白水平较损伤组显著下降(P<0.01), 且Bcl-2 Fas 比值也较损伤组和对照组明显增加。川芎嗪保护组的病理损伤程度明显低于损伤组。结论: 川芎嗪可抑制儿茶酚胺诱导的心肌损伤时心肌细胞中促凋亡基因Fas 的表达, 提高心肌细胞中Bcl-2 Fas 比值。     

阿托伐他汀对高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2表达的影响

目的: 观察阿托伐他汀对两肾一夹(2K1C)高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2) 表达的影响, 探讨阿托伐他汀降血压作用可能的新的作用机制。方法: 40 只雄性Wistar 大鼠随机分为5 组(每组8 只) :假手术组、高血压组、缬沙坦组(20 mg·kg^-1·d^-1) 、阿托伐他汀组(10 mg·kg^-1 ·d^-1) 和阿托伐他汀组(30 mg·kg^-1·d^-1) 。鼠尾容积法测定术前、术后1周及药物干预后4 、8 周的SBP 变化。8 周后, 免疫组化法检测肾脏ACE2 蛋白表达, 放射免疫分析法测定心肌组织血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ) 水平,RT-PCR 法检测肾脏组织ACE2 mRNA 表达。结果: 高剂量阿托伐他汀组SBP 较高血压组降低显著(P<0.01) ;高剂量阿托伐他汀组较高血压组降低心肌组织Ang Ⅱ 浓度显著(P<0.01) ;RTPCR显示缬沙坦组和低、高剂量阿托伐他汀组肾脏组织ACE2 mRNA 的表达较高血压组不同程度增高(P<0.05) 。结论: 2K1C 高血压大鼠肾脏组织ACE2 蛋白、ACE2 mRNA 表达降低。阿托伐他汀在降低高血压大鼠SBP 的同时, 降低心肌组织Ang Ⅱ浓度, 增加肾脏组织ACE2 蛋白、ACE2 mRNA表达。     

大豆异黄酮活性组分对 H2O2 诱导的 PC12 细胞损伤的影响

目的: 探讨大豆异黄酮活性组分对 H₂O₂ 诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法: 以 H₂O₂ 损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型, 采用光学显微镜观察细胞形态, MTT 法判断细胞的存活率, LDH 法检测细胞的损伤程度。结果: 不同浓度大豆异黄酮能明显改善 H₂O₂ 导致的细胞甲瓒减少, 大豆异黄酮处理组细胞存活率明显高于 H₂O₂ 处理组(P<0.01);而 LDH 漏出率则明显低于H₂O₂ 处理组(P<0.05)。结论: 大豆异黄酮活性组分对 H₂O₂ 诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。     

川芎嗪对鼠肺纤维化组织钙含量及钙调素活性的影响1

目的: 观察川芎嗪对博莱霉素所致鼠肺纤维化组织钙含量及钙调素活性的影响, 探讨川芎嗪防治肺纤维化的机制。方法: 将 32 只 SD 大鼠一次性气管内注入博莱霉素 A 5 制备肺纤维化模型, 随机分为2 组:模型组(n=16) 及川芎嗪组(n=16), 分析测定各组给药后 d 14、d 28 肺组织钙含量及钙调素活性, 并与正常对照组(n=8) 比较。 结果: 模型组肺组织钙含量及钙调素活性较正常组明显增高(P<0.01), 川芎嗪组各期钙含量及钙调素活性均低于模型组(P<0.05), 同时组织病理学显示肺泡炎及肺纤维化程度均较模型组明显减轻。 结论: 川芎嗪防治鼠肺纤维化的机制可能与降低肺组织钙含量及钙调素活性有关。     

吡格列酮对大鼠心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 观察吡格列酮对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的影响,并探讨其发生机制。方法: 将实验动物随机分为两组,一为再灌注30 min组,进一步分为假手术组(n = 5)、模型组(n = 6) 和吡格列酮(3mg·kg^-1, n=7)组,测定有关心功能指标和心肌梗死面积;另一为再灌注2 h组,再分为假手术组(n = 5)、模型组(n = 6)以及吡格列酮0.3 mg·kg^-1(n = 6)、1 mg·kg^-1(n = 7)和3 mg·kg^-1 (n = 6)组,共5组,免疫组化检测MMP-2(matrix metallopro-teinase-2)和PPARY (peroxisome proliferator activatedrecepton'Y)蛋白质表达,原位杂交方法检测其mRNA表达,结果:与模型组比较,吡格列酮组梗死面积(necronis,nec)与缺血n区而积(area at risk, aar)之比减少28% (P< 0.01),ne与左室面积(left ventricular,Iv)之比减少32% (P < 0.01);吡格列酮作用后心率和反映心脏收缩功能指标的+ dp/dtm以及反映舒张功能指标的-dp/dt_max明显改善(P<0.05~0.001),吡格列酮0.3、1、3 mg·kg^-1可呈剂量依赖性减少MMP-2蛋白质和mRNA表达,增加PPARY蛋白质和mRNA表达(P < 0.05)。结论: 吡格列酮对心肌缺血再灌注损伤有保护作用,且这种保护作用可能是通过激活PPARY而抑制MMP-2 表达实现的。     

埃他卡林对长期低氧大鼠肺动脉平滑肌KATP mRNA 的影响

目的:研究慢性低氧对大鼠肺动脉平滑肌ATP 敏感钾通道(K_ATP) mRNA 表达的影响及新型K_ATP开放剂盐酸埃他卡林的作用。方法:SD 雄性大鼠16 只随机分成对照组、低氧组、低剂量治疗组(盐酸埃他卡林0.75 mg·kg^-1 ·d^-1, ig)、高剂量治疗组(盐酸埃他卡林1.5 mg·kg^-1·d^-1, ig) 。将低氧组和治疗组大鼠放入常压低氧舱制备动物模型;采用RT-PCR 技术, 分析各组肺动脉主干平滑肌K_ATP mRNA表达。结果:低氧组SUR2 mRNA 水平显著低于正常组, 高剂量治疗组SUR2 显著高于低氧组, 各组Kir 6.1 没有显著差异。结论:慢性低氧抑制K_ATP 通道表达, 而盐酸埃他卡林能提高表达, 可从肺动脉高压发病机制上理解该药物治疗价值。     

一种白僵菌代谢产物BCEF0083对慢性应激抑郁大鼠下丘脑、垂体精氨酸加压素含量及海马GRmRNA表达的影响

目的: 研究一种白僵茵代谢产物(BCEF0083) 对实验性慢性应激抑郁大鼠下丘脑、垂体精氨酸加压素(AVP)含量及海马糖皮质激素受体mRNA(GR mRNA)表达的影响。方法: 采用慢性不可预见性应激法造成大鼠抑郁模型,用放射免疫分析法测定抑 郁模型大鼠下丘脑、垂体AVP含量,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定海马GR mRNA表达。结果: BCEF0083可降低慢性应激抑郁大鼠下丘脑、 垂体AVP含量,上调海马GR mRNA表达。结论: BCEF0083的抗抑郁作用可能与其降低慢性应激大鼠下丘脑、垂体AVP含量及上调海马GR mRNA 表 达有关。     

细胞凋亡与肺缺血再灌注损伤的关系及川芎嗪的影响

目的: 探讨兔肺组织细胞凋亡和肺缺血再灌注损伤的关系及川芎嗪的影响。方法: 制备兔在体原位肺缺血再灌注损伤模型(PIRI), 应用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT) 介导的dUTP 缺口末端标记技术(TUNEL) 检测缺血再灌注损伤所引起的肺细胞凋亡的变化;采用Murata 法进行肺组织损伤定量(IQA) 检测, 进行细胞凋亡与IQA 的相关性分析。结果: 肺缺血再灌注后, 缺血再灌注组(IR 组) 1 、3 和5 h 发生明显的肺细胞凋亡, 凋亡细胞数峰值位于再灌注3 h (P <0.01), 而川芎嗪干预细胞凋亡指数与同一时相缺血再灌注组比较显著降低(P <0.05, P <0.01); IR 组肺组织IQA 值高于TMP 组(P <0.01); 细胞凋亡指数与肺组织损伤定量指标呈正相关(r =0.718, P <0.01) 。结论: 细胞凋亡在肺缺血再灌注损伤机制中可能发挥着重要作用,川芎嗪可减轻肺缺血再灌注导致的细胞凋亡。     

纳洛酮对兔心肌缺血-再灌注损伤β-内啡肽的影响

目的: 探讨纳洛酮在心肌缺血-再灌损伤时对血浆及心肌匀浆β-内啡肽(β-EP) 的影响。方法: 新西兰兔45 只, 随机分成5 组:正常组5 只, 心肌缺血组、缺血再灌注组、纳洛酮保护组和纳洛酮治疗组,每组10 只。制作心肌缺血模型和缺血再灌注损伤模型, 并抽取不同时间点的静脉血, 在心肌缺血、缺血再灌注、纳洛酮保护和纳洛酮治疗后6 h 制作缺血心肌匀浆, 采用放射免疫法分别测定β-EP 的含量。结果: 心肌缺血2 h 后血浆β-EP 含量逐渐下降, 较缺血前显著降低(P<0.05) ;而心肌匀浆上清液β-EP 含量也降低。缺血再灌注后各时段β-EP 含量明显高于缺血前(P<0.05或P<0.01) ;纳洛酮保护组在4 h 后血浆β-EP 含量逐渐下降, 与缺血前比较无显著性差异(P >0.05) ;纳洛酮治疗组β-EP在缺血后各时间点与缺血前比较均无显著性差异(P >0.05) 。3 组心肌匀浆上清液β-EP 含量与缺血前的含量比较无明显变化。结论: 纳洛酮可有效降低心肌缺血及缺血再灌注损伤时血浆β-EP 水平;从而减轻β-EP 对血管和心肌组织的损伤作用。     

阿奇霉素对支气管哮喘患者肺功能及血清结缔组织生长因子的影响

目的: 观察阿奇霉素治疗支气管哮喘的临床疗效,及其对肺功能、血清结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)的影响。方法: 48例哮喘患者随机分入常规治疗组(A组),阿奇霉素治疗组(B组);两组均吸入布地奈德,B组加服阿奇霉素,18名健康体检者做对照组(C组);ELISA法检测受试者血清中CTGF水平。评估治疗前后,各组患者哮喘控制测试评分、肺功能、血清CTGF的变化。结果: 治疗8周后,A、B两组患者的哮喘控制测试评分、肺功能指标均较治疗前有明显改善,血清中CTGF浓度亦明显下降,差异有统计学意义(P均<0.05);治疗8周后,B组哮喘控制测试评分、肺功能指标均明显高于A组,但血清CTGF浓度明显低于A组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论: 阿奇霉素可能通过抑制CTGF的表达,抑制气道重塑,改善肺功能,控制哮喘。     

参麦注射液对肺缺血-再灌注损伤时Fas/FasL 表达的影响

目的 探讨参麦注射液对肺缺血-再灌注损伤(PIRI) 时Fas/FasL 配体(Fas/FasL) 表达的影响。方法 采用在体兔单肺原位缺血-再灌注模型。实验兔30 只, 随机分为假手术对照组(sham,n=10) 、肺缺血-再灌注组(I-R, n=10) 和肺缺血-再灌注加参麦注射液组(SM, n=10)。分别于再灌注3 h 取左肺组织, 观察Fas/FasL mRNA 定位表达、凋亡指数(AI) 、肺组织湿干重比(W D) 、肺损伤组织学定量评价指标(IQA) 及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果 SM 组Fas/FasL mRNA在肺小动脉内(外) 膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及肺支气管上皮呈弱阳性表达, 明显低于I-R 组(P<0.05);AI 、W D 和IQA 值显著低于I-R 组(P <0.01 和P <0.05);肺组织形态学异常改变程度减轻。结论 参麦注射液可下调肺组织Fas/FasLmRNA 的表达而减轻细胞凋亡, 对PIRI 发挥积极的防治作用。