叶酸在放射性核素标记研究中的应用

叶酸在人体内有重要的生理功能,它能特异性结合过度表达于许多肿瘤（卵巢癌、乳腺癌、直肠癌等）细胞膜表面的叶酸受体.在肿瘤靶向药物输运体系中,包括输运放射性核素标记的叶酸螯合物显像剂,叶酸受体是一种潜在的分子靶.近年来,有关放射性核素标记的叶酸螯合物显像剂的研究越来越多.本文着重介绍了放射性核素^111In、^67Ga和99Tc^m（Re）标记叶酸的螯合物显像剂以及它们在肿瘤诊断方面的临床应用.这些资料表明,99Tc^m标记叶酸的螯合物是一种比较有发展前途的显像剂.     

放射性核素标记胃泌素及其类似物在肿瘤显像和治疗中的研究进展

胃泌素是一种脑肠肽,在中枢神经系统中可以作为神经递质,在外周组织中尤其是胃肠道可以看作是激素。胃泌素的功能是通过与细胞胆囊收缩素-B/胃泌素受体相互作用实现的。在核医学靶向诊断和治疗中已将胆囊收缩素-B/胃泌素受体作为靶组织来研究。胆囊收缩素-B/胃泌素受体可以在甲状腺髓样癌、小细胞肺癌、卵巢癌和胃肠内分泌肿瘤等胃泌素受体阳性的肿瘤中过度表达。放射性核素标记的胃泌素可以与多种肿瘤组织的胃泌素受体特异性地结合,可诊断和治疗胃泌素受体阳性肿瘤。本文对胃泌素及类似物在肿瘤的显像和治疗的应用进行了综述。     

几种治疗核素标记抗体在肿瘤治疗方面的应用与进展

放射性核素标记的单克隆抗体不仅具有可以减少因外照射引起的正常组织损伤及全身性副作用,而且还能杀灭McAb不能达到的癌细胞以及受抗原修饰作用小等优点,因此逐渐成为实用价值较大的导向治疗方法。迄今,用于肿瘤放射免疫治疗(RIT)的放射性核素主要有131I,90Y,188Re,186Re,153Sm,211At等。文章主要介绍了几个治疗核素标记抗体在肿瘤治疗方面的应用与进展。     

单克隆抗体的放射性标记

单克隆抗体技术是当代免疫学的一项重大革命。用放射性核素标记单克隆抗体,起始于70年代末期。将单克隆抗体作“导弹”,可将放射性核素在体内较为集中地携带到表面具有癌胚抗原、甲胎蛋白、人绒毛膜促性激素等抗原的肿瘤组织细胞,小剂量的光子发射作可用作体外显象诊断;大剂量的β、α粒子发射体可以进行治疗。     

抗乳腺癌单克隆抗体6C6和人-鼠嵌合抗体6C6CHI的放射性标记及动物实验研究

为了研究99Tcm标记的抗乳腺癌单抗6C6及嵌合抗体6C6CHI在动物体内的生物学分布及在荷瘤裸鼠肿瘤中的摄取情况,采用改进的Schwartz法进行99Tcm标记抗体。标记后的抗体由小鼠尾静脉注射,观察不同时间的小鼠血液清除、全身清除以及两种99Tcm标记的抗体在荷人乳腺癌MCF7细胞的裸鼠中肿瘤的摄取情况,并在γ相机下于注射后不同时间显像。结果表明,99Tcm标记两种抗体的标记率均大于90％,标记抗体的免疫活性大于80％。99Tcm-6C6的全身清除半衰期为4.1 h,在血液中的半衰期分别为Tα=0.55 h、Tβ=12.42 h;99Tcm-6C6CHI的全身清除半衰期为4.28h,在血液中半衰期分别为Tα=0.98h、Tβ=12.42h。在荷人乳腺癌裸鼠中的体内分布结果是:在注射99Tcm-6C6后23h肿瘤和血的％ID·g-1分别为7.42±0.85和5.67±1.44。除肾外,T/NT(肿瘤/非肿瘤)比值均大于1。在注射99Tcm-6C6CHI后23h肿瘤和血的％ID·g-1分别为4.23±0.64和6.97±0.23,除瘤/血、瘤/肾比值小于1外,其余组织的T/NT均大于1。荷瘤鼠γ显像结果显示:在注射标记抗体后24h,肿瘤显像清晰,除肾外其它脏器无异常浓聚。抗乳腺癌单抗6C6在肿瘤中有较好的特异性,而人源化抗体6C6-CHI的肿瘤摄取稍低于6C6抗体,且血中放射性比6C6抗体高,但肿瘤显像清晰,而其它脏器的T/NT比值大于1,     

^131I标记肿瘤血管靶向多肽的实验研究

设计合成含精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）序列的多肽，并用氯胺-T法对其进行^131I标记，标记率约60％，放化纯度〉99％。体外放置24h放化纯度仍≥90％。肿瘤对^131I标记多肽的摄取在注射后明显高于其他器官，注药后24h，肿瘤对^131I-多肽的摄取约为0．65％ID／g，肿瘤与肌肉的放射性摄取比（T／NT）达9．08。以上结果表明：通过氯胺-T法对该多肽进行^131I标记是可行的，标记物可在体外稳定存放24h；^131I-多肽可以靶向肿瘤血管，有进一步研究的价值。     

肿瘤核素诊治现状与进展

对近年来肿瘤核素诊治现状及进展进行了论述，着重介绍了放射性核素非特异性亲肿瘤显像，肿瘤代谢显像、乏氧显像、多耐药显像，肿瘤前哨淋巴结显像和肿瘤放射免疫显像与放射免疫治疗、肿瘤受体显像与受体介导靶向治疗、基因表达显像与基因治疗及肿瘤分子显像探针等应用研究的进展。     

NGR短肽的188Re标记及其在荷瘤裸鼠体内的生物分布和SPECT显像

采用¹⁸⁸Re标记含有天冬酰胺、甘氨酸、精氨酸（Asn-Gly-Arg,NGR）序列的肿瘤血管靶向性短肽,得到¹⁸⁸Re-NGR,观察了¹⁸⁸Re-NGR在荷HepG2肝癌细胞严重联合免疫缺陷（Severe Combined Immunodeficiency,SCID）裸鼠肿瘤模型中的生物分布,并对其进行了SPECT显像。结果显示,¹⁸⁸Re-NGR的标记率>85%,放化纯度>90%。¹⁸⁸Re-NGR在肿瘤模型鼠体内的生物分布显示,注射¹⁸⁸Re-NGR后12 h,肿瘤放射性摄取达最高,为(4.62±0.71)%ID/g,24 h时仍有(2.01±0.38)%ID/g,说明标记物在肿瘤内停留时间较长;竞争性抑制组中,12 h肿瘤放射性摄取为(1.43±0.61)%ID/g,明显低于实验组。肿瘤与肌肉组织的放射性摄取比(T/NT) 12 h为4.76。注射后1 h肿瘤可显像,4～8 h显像逐渐清晰,12 h时更为清晰。以上结果提示,¹⁸⁸Re-NGR具有良好的肿瘤血管靶向性。     

~(18)F标记正电子分子探针在肿瘤受体显像的应用

肿瘤受体显像具有高亲和性、高特异性、高选择性及良好的药代动力学特性,在肿瘤的诊断和分期中具有重要作用。本文根据不同的肿瘤受体,对生长抑素(SST)受体、血管活性肠肽(VIP)受体、肿瘤生长因子受体、类固醇激素(SH)受体类肿瘤受体显像剂的18F标记的正电子分子探针进行了综述。     

叶酸受体PET显像剂18F-叶酸对氟苯乙酮酯的合成

在冷试验确定最佳反应条件、鉴定反应产物的基础上,对硝基苯乙酮采用亲核法进行18F标记,经溴代、酯化将标记物与叶酸偶联,生成18F-叶酸对氟苯乙酮酯,实现叶酸的18F标记.18F-叶酸对氟苯乙酮酯与叶酸结合蛋白的结合特性及在荷瘤裸鼠体内的分布结果显示:18F-叶酸对氟苯乙酮酯能够与叶酸的结合蛋白β-乳球蛋白特异性结合,在荷瘤裸鼠的肿瘤组织有聚集现象.表明合成的18F-叶酸对氟苯乙酮酯标记率高、稳定性好,且由于不直接对叶酸分子进行氟标记,避免了高温对结构的破坏.合成的衍生物能够与β-乳球蛋白特异结合.通过肿瘤表面过度表达的叶酸受体介导,浓集于肿瘤组织,用于肿瘤的PET显像.     

两个99Tcm标记胸苷衍生物在小鼠体内分布的比较

为了找到适合肿瘤显像的99Tcm标记胸苷衍生物,制备了2个标记物99Tcm-ANMdU和99Tcm-NHT,标记率均大于95％,且稳定性好.生物分布结果显示:99 Tcm-ANMdU主要经肾脏代谢,在体内清除比较迅速;99Tcm-ANMdU注射60 min后,荷瘤鼠体内肿瘤的放射性摄取与肌肉、骨和血的放射性摄取的比值达...     

血管抑素的131I标记及其对裸鼠A549肺肿瘤的作用

采用一步法从人血浆中分离血管抑素(Angiostatin,AS),并用L-Lysine Sepharose 4B作亲和层析纯化;将提纯的AS用Iodogen固相法进行131I标记,分析131I-AS的标记率、比活度,并评价其体外稳定性;32只荷A549肺肿瘤的裸鼠随机分为4组,腹腔注射131I-AS(含11.1 MBq131I,AS为12.5 mg/kg)1、31I 11.1MBq、AS 12.5 mg/kg和生理盐水0.3 mL,1次/周,治疗4周,观察28 d内肿瘤体积的变化。结果显示,131I-AS标记率为77.8%~86.7%,比活度为1.28~3.96 TBq/g,放化纯度为98.6±0.26%。标记产物-20℃存放7 d,放化纯度降至72%;治疗28 d后,131I-AS组1、31I组、AS组和生理盐水组小鼠肿瘤的体积分别是(1 956±98)(、5 284±123)(、3 948±115)(、7 350±153)mm3。以上结果提示,131I-AS能较强地抑制小鼠体内移植肿瘤的生长,其抑制作用优于单纯应用等浓度的AS及131I,131I-AS在治疗肿瘤中有潜在的应用前景。     

用^111In标记单克隆抗体和动物分布与显象研究

研究了用~(111)In通过DTPA环二酸酐标记单克隆抗体(McAb)的各个实验环节,制备了超纯~(111)In,得到了高比活度1.11GBq/mgMcAb、具有免疫反应活性的~(111)In-McAb。对用~(111)In标记的抗CEA McAb C14-C50、抗人结肠癌McAb 2C10和鼠IgG在荷瘤裸鼠模型体内分布及体外显象进行了研究。注射单抗的动物得到清晰的肿瘤显象,而注射普通IsG的动物的肿瘤不显象。     

不同电荷肿瘤乏氧显像剂的合成及生物分布

电荷是药物分子的重要性质,可以影响其在体内的生物学行为。为了研究不同电性质的肿瘤乏氧显像剂在体内的生物分布行为,合成了3种带有不同电荷的肿瘤乏氧显像剂(S)-3-(4-羟基苯基)-2-(3-(2-硝基咪唑基)丙酰胺基)丙酸甲酯(NI-Y-M)、(S)-3-(4-羟基苯基)-2-(3-(2-硝基咪唑基)丙酰胺基)丙酸(NI-Y)和(S)-N-(3-胺丙基)-3-(4-羟基苯基)-2-(3-(2-硝基咪唑基)丙酰胺基)丙酰胺(NI-Y-A),并进行了131I标记。3种化合物的标记率均大于95%,体外稳定性好。纸上电泳结果表明,在生理条件下,[131I]NI-Y-M为中性分子,[131I]NI-Y和[131I]NI-Y-A则分别呈现负电和正电的电性质。从荷S180肉瘤小鼠体内分布结果发现:3种标记物在肿瘤组织呈现出快摄取慢清除的趋势,并且在肿瘤中的放射性活度明显高于肌肉和心、脑、脾等组织;随着时间的延长,肿瘤的相对摄取率提高;4h时,动物肿瘤与肌肉、肿瘤与血液放射性摄取的比值数据显示,带正电荷的标记物[131I]NI-Y-A是最优的肿瘤乏氧显像剂。     

^99Tc^m标记的肿瘤血管化特异性多肽的实验研究

本文旨在寻找一种的99Tcm标记的抗肿瘤血管化的显像剂.将具抗肿瘤血管化的多肽适当修饰后,用99Tcm标记,并在肿瘤荷鼠体内筛选比较.选择在肿瘤部位放射性浓聚明显的多肽,进行肿瘤荷鼠的体内分布和竞争试验.GPRPAA(D)A(D)-HYNIC-99Tcm标记率高、产物稳定,放化纯度>98%,室温下6 h后>93%.能在荷鼠肿瘤组织较快浓聚,0.5h时肿瘤%ID/g为13.5973±1.3642,清除较慢,6h肿瘤%ID/g仍有4.0399±0.5876;血及其它血供丰富的组织清除较快,1 h时血ID/g为1.7035±0.2742,心%ID/g为3.2578±1.3121,肿瘤在2 h显像清晰.GPRPAA(D)A(D)-HYNIC-99Tc有希望成为一种肿瘤血管化显像剂.     

新型多肽示踪剂131I-RRL肿瘤分子显像研究

研究能与肿瘤血管内皮细胞特异结合的小分子多肽显像剂精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）对黑色素瘤小鼠模型的肿瘤分子显像应用价值。采用氯胺-T法对小分子多肽RRL进行¹³¹I标记,并对标记条件进行了优化;最佳标记条件为：RRL用量50 μg,Na¹³¹I用量10 μL（74 MBq）,氯胺-T用量90 μg,反应总体积100 μL,振荡反应 3 min。标记率＞69%。用Sephadex G25柱对标记产物进行纯化,纯化后放化纯度＞95%。采用绿色荧光素（FITC）标记RRL,并进行体外细胞结合实验,通过荧光信号的强弱观察RRL在不同细胞中的结合能力。体外细胞结合实验结果显示,RRL不仅能够特异性结合于肿瘤来源的血管内皮细胞,而且能够与肿瘤实质细胞结合;¹³¹I-RRL对黑色素瘤动物模型进行SPECT显像结果显示,¹³¹I-RRL能够特异性浓聚于肿瘤组织,24 h后放射性浓聚灶清晰可见。以上结果表明,小分子多肽RRL是一种很有潜力的肿瘤放射性核素分子显像与治疗的载体。     

~(131)Ⅰ标记NGR聚乙二醇修饰物及其生物分布

天门冬酰胺酰甘氨酰精氨酸(NGR)是特异性地定位于肿瘤新生血管受体的多肽基序,在肿瘤诊断和治疗方面具有潜在的应用前景.首先用两种单甲基化聚乙二醇(mPEG1900,mPEG5000)对YGGCNGRC环肽进行化学修饰,并进行131 Ⅰ标记.考察了这些标记物在正常小鼠以及荷乳腺癌MCF-7裸鼠体内的分布.结果表明,131 Ⅰ-mPEG 1900-YGGCNGRC和131 Ⅰ-mPEG5000-YGGCNGRC在各个器官和组织中的摄取率与131 Ⅰ-YGGCNGRC相比都有所降低,但在肾脏中的摄取率增高.血液初始摄取稍有下降,从血液中清除的速率则无显著差别.用mPEG5000修饰的NGR环肽显著地降低了131 Ⅰ的脱落.虽然131 Ⅰ-mPEG5000-YGGCNGRC在肿瘤中的摄取比131 Ⅰ-YGGCNGRC稍低,但肿瘤组织与正常组织的摄取比对多数器官和组织都有所提高,其中肿瘤与肌肉的摄取比由3.5±1.7提高到5.7±2.2.修饰与否对肿瘤与血的摄取比影响不大,由0.73±0.33变化至0.80±0.22.     

生长抑素类似物EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA的99Tcm标记及动物实验

本文设计合成了新的生长抑素类似物99Tcm-EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA,并进行了正常小鼠及荷瘤裸鼠体内分布和显像,以探讨99Tcm-EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA作为生长抑素受体阳性肿瘤显像药物的可能性。合成了Nε-HYNIC-Lys0-TOCA及其中间产物,并经核磁共振谱和质谱等分析确证。在优化的标记条件下,99Tcm-EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA的标记率为96%左右,经Sep-Pak柱纯化后,放化纯达99%以上。体外稳定性实验及小鼠尿样分析表明标记物具有很好的体内外稳定性。99Tcm-EDDA/HYNIC-Lys0-TOCA在正常小鼠体内的清除非常迅速(血液半衰期为20min左右),主要通过肾脏途径代谢,同时在胃、肺和肾上腺也有相对较高的放射性摄取。荷瘤裸鼠体内分布实验显示该药物在肿瘤组织有较高的放射性摄取,给药1h后肿瘤与血、肌肉等组织有较高的T/NT比值。γ显像表明,在给药后1h至2h,肿瘤组织有明显的放射性摄取,显像清晰。初步研究结果显示,该药物有望发展成为生长抑素受体阳性肿瘤的显像剂。     

Tyr^3—octreotide的^131I标记条件研究及其在小鼠体内的生物分布

进行了＾１３１Ｉ标记Ｔｙｒ＾３－ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ最佳标记条件的研究，包括反应量，反应时间，反应体积等对标记率的影响，ＨＰＬＣ分析最高标记率可达８２％，用ＳＥＰ－ＰＡＫ柱处理后，ＨＰＬＣ分析放化纯度〉９９％，对纯化后标记物在小鼠人的生物分布也进行了研究，结果表明，血液清除快，标记物通过标胆排泄，标记物在肿瘤内有一定浓聚，在注入后３ｈ内显像效果较好。     

氚标记N-(3-甲基丁基)-N-(1-甲基丙酮基)亚硝胺(MAMBNA)的合成

霉菌与肿瘤发生的关系已成为肿瘤病因学的重要研究课题。中国医学科学院肿瘤研究所的科研人员将食道癌高发区林县常见的霉菌如串珠镰刀菌等,接种在玉米面饼上培养8天。再加入少量亚硝酸钠,发现有二甲基亚硝胺、二乙基亚硝胺、甲基苄基亚硝胺产生。此外,还新发现了一种亚硝胺,即N-(3-甲基丁基)-N-(1-甲基丙酮基)亚硝胺(MAMBNA),