烟草种子附生真菌群落结构与多样性

为了解烟草种子附生真菌的群落结构和多样性。采用Illumina MiSeq高通量测序技术测定K326、云烟85、L8、301种子的附生真菌。结果表明K326种子的优势属为链格孢属（Alternaria）、赤霉菌属（Gibberella）、隐球菌属（Cryptococcus）、镰刀菌属（Fusarium）及红酵母属（Rhodotorula）等;云烟85的优势属为赤霉菌属、小画线壳属（Monographella）、链格孢属、红酵母属及镰刀菌属;301的优势属为链格孢属;L8的优势属为链格孢属、曲霉菌属、镰刀菌属、赤霉菌属及隐球菌属等。      

烟草种子内生真菌群落结构和多样性分析

种子内生菌对种子的生长发育具有重要作用。为深入了解烟草种子内生真菌群落结构与多样性,以ITS区的rDNA为靶标序列,采用Illumina MiSeq测序技术对K326、云烟85和云烟87烟草种子内生真菌群落结构组成和多样性进行测定分析。结果表明,3个品种烟草种子共获得342 264条序列,聚类到110个分类操作单元（OTU）,分别属于5个门、13个纲、24个目、34个科、56个属。品种K326和云烟85种子内生真菌群落结构相似,多样性均高于云烟87。其中赤霉菌属Gibberella、小画线壳属Monographella、链格孢菌属Alternaria、镰刀菌属Fusarium、红酵母菌属Rhodotorula、炭疽菌属Colletotrichum、隐球菌属Cryptococcus和曲霉菌属Aspergillus等在烟草种子中丰度较高。FUNGuild功能预测结果显示,烟草种子内生真菌包括以下功能菌群：植物病原菌、动物病原菌、内生菌、木材腐生菌、地衣寄生菌、土壤腐生菌、木材腐生菌等。烟草种子有丰富的内生真菌定殖,其中潜在的有益功能菌群包括镰刀菌、炭疽菌、隐球酵母菌、赤霉菌、曲霉菌等。     

不同烤烟品种根系丛枝菌根真菌(AMF)群落结构和组成的差异分析

为了探明不同烤烟品种根系丛枝菌根真菌(AMF)多样性及群落结构的差异,以云南主栽烤烟品种云烟202、云烟87、云烟85和K326为材料,构建每个品种根系AMF 18S r RNA基因克隆文库。结果表明,在4个烤烟品种的文库中共发现了21个操作分类单元(OTU),云烟202、云烟87、云烟85和K326克隆文库的OTU数分别为6、9、8和8;OTU在烟草根系中的分布显示,OTU1和OTU2是4个烟草品种根系的主要类型,OTU3为常见类型,OTU4只在云烟85和K326中有分布,而其余类型仅在一个烟草品种根系中出现;系统发育分析表明,9个OTU类型可划分到属,其中球囊霉属(Glomus)5种,无梗囊霉属(Acaulospora)2种,硬囊霉属(Sclerocystis)2种,其余12个OTU类型具体分类地位不明确,可能为新的AMF种类。多样性分析结果表明,云烟87根系AMF多样性最为丰富,云烟85和K326品种间差异不明显,而云烟202中物种类型则最少。可见,侵染4个烟草品种根系的主要AMF类型相同,但稀有AMF类型则明显不同。     

雪茄烟叶工业发酵过程中细菌群落多样性和结构变化

为揭示雪茄烟叶工业发酵过程中细菌群落多样性和结构变化的规律，采集雪茄茄芯烟叶混配堆积发酵过程中的样品，采用Illumina MiSeq高通量测序技术分析细菌群落多样性和结构。结果表明：(1)在雪茄烟叶发酵过程中，与混配发酵前相比，混配发酵完成后样品细菌群落的OTU数量和物种丰富度降低，物种多样性提高；(2)优势菌门由厚壁菌门（Firmicutes）转变为变形菌门（Proteobacteria）；优势菌属由海洋芽胞杆菌属（Oceanobacillus）、丛毛单胞菌属（Comamonas）、芽胞杆菌属（Bacillus）转变为丛毛单胞菌属（Comamonas）、鞘氨醇杆菌属（Sphingobacterium）、Georgenia、类芽胞杆菌属（Paenibacillus）；(3)10个菌属的平均相对丰度显著增加，分别为鞘氨醇杆菌属（Sphingobacterium）、Georgenia、类芽胞杆菌属（Paenibacillus）、细粒类极小单胞菌属（Parapusillimonas）、假单胞菌属（Pseudomonas）、DSSF69、溶杆菌属（Lysobacter）、假黄色单胞菌属（Ps...     

不同类型与品种烟草烟籽油的产量与成分对比研究

[目的]确定适宜生产烟籽油的烟草类型与品种.[方法]比较分析了烤烟、白肋烟和晾晒烟的种子产量性状、含油率、脂肪酸比例.[结果](1)参试晾晒烟、烤烟的种子单位面积产量高于白肋烟,晾晒烟品种泉烟种子产量较高,其次是K346、云烟85、黑蜜柳烟、CP2012等;(2)晾晒烟和烤烟的烟籽平均含油率高于白肋烟,黑蜜柳烟和松阳晒...     

高低海拔生产的烟草种子其活力及出苗、成苗时间差异

为阐明高海拔和低海拔产地生产的烟草种子是否存在活力及出苗差异,将低海拔产地（西双版纳）和高海拔产地（曲靖、昭通）生产的MS云烟85、MS云烟87、MS K326种子在光照培养箱中分别进行常温（26℃）、低温（13℃）萌发,2012—2013年分别在6个高海拔烟叶产区进行漂浮育苗,比较不同产地收获的种子室内发芽以及室外出苗和成苗速率。结果表明,不同海拔产地生产的烟草种子在常温下萌发,其发芽时间、发芽率没有明显差异,低温条件下,低海拔产地（西双版纳）生产的MS云烟85和MS云烟87种子的发芽率分别优于高海拔产地（曲靖、昭通）生产的种子;不同海拔产地生产的烟草种子在同一年份同一烟区的出苗时间差异不大,成苗时间相同。因此,种子产地的海拔高度不影响烟草种子的活力及出苗速率,种子活力的高低以及出苗的快慢与萌发及出苗时的温度有关。     

应用AMMI模型评价烤烟品种产量适宜性

利用AMMI模型对2010年昭通烟区8个烤烟品种区域试验的产量性状进行统计分析,结果表明:在8个参试品种中,各品种产量的基因型(品种)效应、环境效应和基因型(品种)×环境互作效应均达极显著水平.云烟97平均产量最高,PVH19平均产量最低,丰产性表现顺序为:云烟97＞云烟99＞云烟203＞云烟87＞ KRK26＞ K326＞红花大金元＞PVH19;稳定性表现顺序为:云烟99＞ K326＞云烟97＞云烟203＞云烟87＞ KRK26＞ PVH19＞红花大金元;在参试地点环境范围内,品种云烟97和云烟99表现较佳,模型分析结果与各品种实际表现情况一致.     

诱导烟草早花的PVX-FT系统的建立

FT(Flowering locus T)基因是控制植物开花的一个关键基因,而PVX(Potato virus X)载体能够使外源基因在植物体内高水平瞬时表达。本文构建了拟南芥FT基因PVX病毒瞬时表达载体,通过农杆菌渗滤感染不同类型烟草品种,使拟南芥FT基因在烟草中瞬时表达。结果表明,该系统能够诱导烤烟品种K326、云烟87和红花大金元,香料烟品种TEVB及白肋烟品种TN90早花。本文研究结果将为FT基因应用于烟草育种,缩短育种进程提供技术支撑。      

复合盐处理对不同烤烟品种发芽特性的影响

为了考察烟草品种的耐盐性,筛选出烤烟耐盐品种,以5个烤烟品种(红花大金元、K326、云烟87、云烟97和中烟100)为材料,设置不同质量浓度(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和1.0%)的复合盐(NaCl和Na_2SO_4物质的量比为1∶1)处理烟草种子,并测定了不同烟草品种的发芽特性指标。结果表明:(1)低浓度的复合盐溶液可促进部分烤烟品种(云烟87、K326、云烟97、中烟100)的种子萌发,而高浓度的盐处理对供试品种的种子萌发有强烈抑制作用。(2)不同烤烟品种对盐分的耐受力不同。在0.2%~0.6%质量浓度的中低盐度处理下,各品种的发芽指数及活力指数差异不大,云烟97和云烟87的发芽率相对较高,中烟100的发芽势较低,而云烟97则较高;在0.8%和1.0%质量浓度的高盐度处理下,云烟87的各发芽指标表现良好,红花大金元、云烟97次之,中烟100、K326的发芽指数显著下降。     

复合盐碱处理下烤烟品种发芽特性及耐盐性评价

为探讨不同烤烟种子萌发期耐盐特性,以5个烟草品种为供试材料,在发芽期采用不同质量浓度的复合盐碱处理,研究其对烟草品种主要发芽特性的影响。结果表明,低浓度盐碱(0.2%、0.4%)不同程度提高了K326、红花大金元和云烟97的发芽率和发芽势,红花大金元和K326的发芽指数也较对照有所增高;中高浓度盐碱(≥0.6%)降低了各品种种子的发芽率、发芽势及发芽指数,而干重始终随盐碱浓度增大而减小,盐害率则随浓度增大而增大。低浓度的复合盐碱促进部分烤烟品种(K326、红花大金元、云烟97)萌发,而高浓度盐碱对供试品种的萌发有强烈的抑制作用。不同品种对盐碱的耐受力不同,低盐碱下红花大金元、云烟87和K326表现相似且良好,云烟97次之,中烟100较弱;中高盐碱处理下,K326和云烟87、云烟97表现较好,红花大金元次之,中烟100较弱。     

我国烤烟主栽品种在陕南烟区的农艺适应性和品质差异研究

为探讨相近生态条件下,不同烤烟品种烟叶品质适合卷烟叶组配方的程度,对目前我国主要种植的云烟85、云烟87和K326烤烟品种进行了田间生长、烟叶产量、烘烤和品质的特性对比研究。结果表明,云烟85的大田生育期最短,云烟87与K326田间长势接近;云烟87产量最高;除云烟85和云烟87上部烟叶烟碱含量偏高外,其余化学成分基本协调;评吸结果表明,3个品种烟气香气质均较好,杂气较轻,云烟85在甜度上略好。     

不同烤烟品种中部叶的显微结构分析

为揭示烟叶叶片结构的品种间差异,在相同栽培条件下,选择烤烟主栽品种K326、红花大金元(HD)、云烟87(Y87)、云烟85(Y85)、G80、中烟14(Z14),以及地方品种湘烟1号(X1)等具有一定代表性的中部适熟烟叶,采用石蜡切片等技术详细分析了烟叶叶片的显微结构。结果发现,叶片厚度以Y85和X1最厚,HD,Y87,Z14最薄,Z14栅栏/海绵组织最大、间隙度较大,但差别不明显,品种间的气孔形态指标差异较大,可以部分反映出品种的环境适应性,K326叶片结构与气孔形态各项指标处于适中状态。不同品种的基因差异以及生态适应性是造成叶片结构差异的主要因素。     

烤烟中草酸、苹果酸和柠檬酸含量的分析研究

以云南、四川、河南、重庆4个烟区云烟85、K326和红大3个品种的B2L、C2L、X2L等级烟叶为材料,采用GC法测定了169个烤烟烟叶样品中草酸、苹果酸和柠檬酸的含量,并对不同产地、品种、等级和部位烤烟烟叶的多元有机酸含量进行了统计分析,结果表明:①同一地区、K326和云烟85的相同等级烤烟烟叶中草酸、苹果酸和柠檬酸含量均没有显著差异;红大和云烟85的苹果酸含量没有显著差异,而红大的草酸和柠檬酸含量均高于云烟85;②不同地区、相同品种和等级的烤烟叶中,草酸含量均没有显著性差异;苹果酸、柠檬酸含量差异显著,含量的变化趋势为:河南重庆云南和四川;③同一地区和品种、不同部位的烤烟叶中,草酸含量均为上部明显高于中部和下部,而中部和下部相当;苹果酸含量在3个部位均有较大差别,依次为:上部中部下部;柠檬酸含量下部最高,中部与上部无显著差异。     

云南烤烟主要推广品种适宜种植区域划分

对11个参试品种在云南省11个地州60个试验点的综合表现进行了分析,将参试品种的试验点划分为6个生态相似区,并提出了不同品种在不同生态相似区的品质特征和适种程度,建议云南烟区以云烟85、云烟87和K326为主栽品种,搭配种植红花大金元、K346、G28等,局部烟区搭配种植云烟317、V2、RG11等品种。     

不同烤烟品种的类胡萝卜素、多酚含量及感官品质的比较

采用反相高效液相色语法对2009年云南种植的5个烤烟品种烟叶的类胡萝卜素和多酚含量进行了测定,并进行了感官评吸.结果表明:①不同品种烤烟的类胡萝卜素和多酚含量存在一定差异,烟叶类胡萝卜素含量以云烟85最高,K326最低,NC297,KRK26和云烟87居中;多酚含量以云烟87最高,NC297次之,KRK26最低.②各烤烟品种不同部位的含量差异表现为:云烟85、云烟87,K326和NC297的中部叶类胡萝卜素含量高于上部叶,KRK26的上部叶高于中部叶;各烤烟品种多酚类含量均为上部叶高于中部叶.③烤烟品种云烟87、云烟85和KRK26的感官质量优于NC297和K326,多酚类物质含量越高对感官质量越不利,类胡萝卜素含量过高或过低对烟叶的感官质量也不利.初步试验结果,类胡萝卜素的适宜含量为115～133μg/g,在此范围内多酚含量越低,烤烟感官品质越好.     

不同烤烟品种主要挥发性香气物质含量的比较与分析

采用同时蒸馏萃取-气相色谱/质谱法对云南主要烟区4个主栽品种红花大金元、K326、云烟87和云烟85共计390个样品的主要挥发性香气物质进行了分析。结果表明,红花大金元和K326品种上部和中部烟叶中主要挥发性香气物质总量、新植二烯和呋喃类化合物含量均显著高于云烟87和云烟85;红花大金元上部和中部烟叶的醇类和酚类化合物含量均显著高于K326、云烟87和云烟85,氮杂环类化合物含量则显著低于后3个品种。     

国产烤烟挥发酸含量的对比分析

测定了2002、2003年全国6产区170个烤烟烟叶样品的总挥发酸含量,并对其差异显著性进行了分析。结果表明:①各产区烟叶挥发酸含量集中在0.20%~0.40%范围内,各产区烤烟挥发酸含量差异极显著,含量由高到低依次是福建、四川会理、贵州毕节、山东临沂、河南宜阳;②同一地区相同等级不同品种烟叶挥发酸含量差异不大,其中福建永定的云烟85略高于福建长汀的K326,河南宜阳的中烟101略高于中烟100;③四川会理K326和贵州毕节云烟85三个部位相同等级烟叶的挥发酸含量均是2002年的高于2003年的,且云烟85高的幅度较大,但山东临沂NC82两年的差异不明显;④上部烟叶的挥发酸含量最高,中部叶次之,下部叶最低。不同产区烟叶挥发酸含量的部位差异幅度不一样。     

烤烟品种的RAPD分析

利用RAPD标记研究了29个烤烟品种的分子指纹和遗传关系。100个随机引物经10个品种筛选,选出18个随机引物对29个品种基因组DNA进行扩增,得到了29个烤烟品种的分子指纹图谱,参照这些图谱,可对不同烤烟品种进行真实性鉴定。以扩增到的79条多态性DNA片段为基础计算29个品种间遗传相似系数,利用UPGMA法作聚类图,可将参试品种分为3个类群。云南省主栽品种K326与近年选育的品种V2、云烟85、云烟317等被归为一类,遗传基础过于狭窄,建议选用一些遗传关系较远的品种进行亲本选配、品种布局;北方烟区主栽品种NC89、地方品种净叶黄及G140等则归为另一类。