HPLC测定刺梨果实中维生素C含量方法的优化

以"贵农5号"刺梨果实为材料,在已有的高效液相色谱(HPLC)测定维生素C(Vc)方法的基础上,对提取液、提取次数、提取液保存温度及色谱条件等方面进行了改进和优化,以期筛选出从这种高含量维生素C果实中提取测定Vc含量的适宜方法。结果表明:6%的偏磷酸较之添加2 mM EDTA、1%pvpp的提取液更适合刺梨果实Vc的提取;二次提取在刺梨果实Vc提取中很有必要;8 h内,刺梨果实Vc提取液适合在4℃保存,如果需过夜保存,应选择-20℃;所选择高效液相色谱法Vc含量在40~400μg/mL(r=0.9997)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为101.80%(RSD=1.01%),可用于刺梨果实及其他高Vc含量植物材料Vc的测定。     

高效液相色谱测定灵芝刺梨颗粒中维生素C含量

目的建立测定灵芝刺梨颗粒中主要功效成分维生素C含量的高效液相色谱(HPLC)方法。方法采用Welch Ultimate XB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,检测波长246 nm,流速1 mL/min,流动相为0.1%草酸。结果维生素C在0.04168~0.25008μg范围内呈良好的线性关系(r=1.0000);平均加样回收率为102.35%,RSD为0.40%。结论本文所建立的方法简便、准确、重现性好,可用于灵芝刺梨颗粒及同类产品的质量控制。     

高产β-葡萄糖苷酶酵母菌的诱变选育及对刺梨果酒香气特性的影响

为分析β-葡萄糖苷酶对刺梨果酒香气特性的影响,以一株产β-葡萄糖苷酶异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus, W.anomalus）C4菌株为出发菌株,采用化学诱变剂甲基磺酸乙酯对其进行化学诱变,以进一步提高其β-葡萄糖苷酶活性。将W.anomalus C4菌株、突变菌株W.anomalus E3菌株纯种或与酿酒酵母以混合发酵形式发酵刺梨果酒。对硝基苯基-β-D 吡喃葡萄糖苷显色法（p-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside,p-NPG）检测刺梨果酒发酵过程中β-糖苷酶活性变化;顶空固相微萃取-气相质谱联用法测定各组刺梨果酒挥发性香气成分。甲基磺酸乙酯诱变得到一株产β-葡萄糖苷酶性能稳定,酶活为（55.05±0.74）U/L的突变菌株W.anomalus E3。与W.anomalus C4菌株相比,W.anomalus E3菌株的酶活提高了31.70%。在刺梨果酒发酵过程中,W.anomalus β-葡萄糖苷酶活性逐渐增大,第10 d达到最大值,然后迅速降低。接种W. anomalus C4、及其突变菌株E3可降低刺梨果酒包括总酸、挥发酸、pH在内的酸度值以及总糖含量;同时还可增加刺梨果酒中挥发性酯类、醇类物质的种类和含量以及主要香气成分风味活性值（OAV）。因此,接种产β-葡萄糖苷酶W. anomalus菌株有助于调节刺梨果酒的香气特性,增加刺梨果酒的复杂性和丰富度。     

刺梨中质量标记物的提取工艺优化及其含量同时测定

利用响应面法优化刺梨中质量标记物的提取工艺,并建立HPLC法同时测定其含量。以刺梨根为原料,利用单因素实验与响应面试验优化了刺梨中4个质量标志物（三萜类化合物）的提取工艺,并比较分析刺梨不同部位（根、茎、叶子和果实）的质量标志物含量差异。结果表明,单因素实验确定了影响刺梨萜类物质得率的重要因素为溶剂用量、乙醇浓度、提取时间和提取次数。以刺梨中4个质量标志物的总含量为综合考察指标,采用响应面试验确定了刺梨三萜化合物的最适提取工艺条件为:按照溶剂用量为1:25 g/mL加入体积分数为70%的乙醇,先超声30 min,再将料液进行加热回流2 h,在此条件下,刺梨叶中4个质量标志物的总含量为2.64%,其中刺梨苷含量为0.99%、野蔷薇苷含量为0.72%、蔷薇酸含量为0.43%、委陵菜酸含量为0.51%;刺梨不同部位的4个质量标志物总含量为刺梨叶>刺梨根>刺梨茎>刺梨果。本研究为刺梨的质量评价及其总三萜的开发利用提供科学参考。     

液相色谱-质谱联用法同时测定保健食品中维生素D3和维生素K1的含量

目的 建立液质串联法同时测定维生素D3和维生素K1的含量。方法 样品经过前处理, 5mmol/L甲酸铵甲醇为流动相, 等度洗脱, 经C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，2.6 μm）分离, 并于相应条件下进行检测。结果 维生素D3在浓度0.05461~0.5461μg/mL之间呈现良好的线性关系, r=0.9990, 平均回收率为92.15%~98.99%, 相对标准偏差为2.4%；维生素K1在浓度0.1337~1.3370 μg/mL之间呈现良好的线性关系, r=0.9990, 平均回收率在94.15%~101.01%之间, 相对标准偏差为2.2%。结论 该方法能同时测定维生素D3和维生素K1含量, 耗时短、操作简便、准确、重现性好，可在实验室推广。     

前处理对液相色谱法测定婴幼儿配方奶粉中维生素C含量的影响

目的研究液相色谱操作条件、标准溶液配制及保存、样品提取等前处理对液相色谱法测定婴幼儿配方奶粉中维生素C含量的影响。方法测定不同流动相下维生素C峰面积及保留时间;比较不同酸性溶液配制的标准溶液保存一定时间后峰面积的变化;用不同浓度的乙酸溶液作为提取液,在不同水浴温度、超声时间下对奶粉样品进行提取,测定其峰面积。结果样品溶液在0.05 mol/L磷酸二氢钾(pH=3.0)甲醇流动相下,经Tech Mate ST-C_(18)色谱柱分离,在245 nm条件下进行检测,可获得较大的响应值及合适的保留时间。维生素C的最佳提取条件为:提取液为1%乙酸溶液、水浴温度不宜超过20℃、提取时超声时间为20 min。采用确定的条件对婴幼儿配方奶粉中维生素C含量进行测定,维生素C在1~100 mg/L范围内线性良好,r~2大于0.999。加标回收率在76.5%~91.4%之间,RSD在5%以下。结论本研究建立的前处理方法能够满足维生素C的测定要求。     

反相高效液相色谱法测定刺梨中芦丁和槲皮素的含量

建立反相高效液相色谱法测定刺梨中芦丁和槲皮素的含量。采用WatersSunfire ODS C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸缓冲溶液(60:40),流速1.0 mL/min,检测波长360nm,柱温30℃,进样量10μL。结果表明,在上述色谱条件下,芦丁和槲皮素良好分离,质量浓度分别在2~100μg/mL(R2=0.9991)和1~100μg/mL(R2=0.9992)之间线性关系良好。平均加标回收率分别为98.27%和99.15%,相对标准偏差(RSD)分别为2.98%和3.76%,重现性实验RSD分别为芦丁2.18%(n=5),槲皮素1.76%(n=5)。测得刺梨中芦丁和槲皮素的平均含量分别为7.070mg/g和1.352mg/g。RP-HPLC法简便快捷、灵敏,结果准确,可用于刺梨中黄酮成分含量的检测。     

新型紫外可见光法测定沙田柚中维生素C的含量

目的建立一种测定沙田柚中维生素C含量的新方法。方法采用紫外turn on法在510 nm处测定维生素C含量。优化氯化铁和邻菲啰啉的浓度、反应时间等因素。结果获得氯化铁最佳浓度是0.01 mol/L,反应时间为1 h。在最佳条件下,获得校准曲线方程Y=2971X+0.0218(r=0.9997),灵敏度为0.1μg/m L,并用于测定桂东南的沙田柚中的维生素C,结果显示沙田柚中维生素C的含量为78.58 mg/100 g,该结果与文献报道一致。结论该方法快速、准确、灵敏,适合水果、蔬菜的维生素C含量的测定。     

HPLC测定维敏酸钾洗眼液中维生素B_6的含量及有关物质

目的建立HPLC测定维敏酸钾洗眼液中维生素B6含量及有关物质的方法。方法采用ZorbaxSB-C18色谱柱（4.6mm×150mm,5μm）,流动相己烷基磺酸钠缓冲液-甲醇（92：8）,流速1.0mL/min,柱温35℃;检测波长含量测定291nm,有关物质检查275nm。结果维生素B6在9.976～498.8μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=1.0000,n=6）,平均回收率100.82%（n=9,RSD=0.63%）,最低检测限3.7ng。结论该方法简便、灵敏、准确,专属性强、重现性好,可用于测定维敏酸钾洗眼液中维生素B6的含量及有关物质。     

HPLC测定维敏酸钾洗眼液中维生素B_6的含量及有关物质

目的建立HPLC测定维敏酸钾洗眼液中维生素B6含量及有关物质的方法。方法采用ZorbaxSB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相己烷基磺酸钠缓冲液-甲醇(92:8),流速1.0mL/min,柱温35℃;检测波长含量测定291nm,有关物质检查275nm。结果维生素B6在9.976～498.8μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=1.0000,n=6),平均回收率100.82%(n=9,RSD=0.63%),最低检测限3.7ng。结论该方法简便、灵敏、准确,专属性强、重现性好,可用于测定维敏酸钾洗眼液中维生素B6的含量及有关物质。