高效液相色谱法同时测定保健食品中的安石榴甙和鞣花酸

目的建立同时测定保健食品中安石榴甙、鞣花酸的高效液相色谱法(HPLC)方法。方法采用迪马钻石Ⅱ(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈+0.2%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,在波长256 nm下进行检测。结果方法的线性范围:α安石榴甙24～240μg/ml;β安石榴甙56.0～560μg/ml;鞣花酸60.0～600μg/ml。相关系数r为0.999 7～0.999 9;检出限:α安石榴甙、β安石榴甙、鞣花酸分别为2.36、2.78、2.67μg/g;定量限:7.08、8.34、8.01μg/g。高低两个浓度水平加标回收率97.5%～104%;相对标准偏差(RSD)均<2.5%。结论本方法简便、快速、准确、重现性好,适用于保健食品中安石榴甙和鞣花酸的测定。     

石榴皮多酚的提取、制备及其应用研究进展

石榴皮作为一种可再生资源,其含有丰富的多酚,在食品中具有广阔的应用前景。该文对石榴皮多酚的提取、纯化、检测和应用研究现状进行综述;并介绍石榴皮中最重要的两种多酚——安石榴苷和鞣花酸的研究现状,特别是对安石榴苷的水解、鞣花酸的提取及制备等进行详细阐述;并以大白鼠为模型,阐明安石榴苷体内代谢的一般途径。     

水质对石榴皮中安石榴苷提取纯化工艺的影响

目的考察水质对石榴皮安石榴苷提取纯化工艺的影响。方法分别用生活饮用水和纯化水对石榴皮粉末中的安石榴苷进行提取分离纯化,安石榴苷含量用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)进行测定。结果生活饮用水对石榴皮粉末提取纯化得到安石榴苷含量为2.65%;纯化水对石榴皮粉末提取纯化得到安石榴苷含量为78.79%。结论生活饮用水对石榴皮安石榴苷提取纯化的影响极大,会加速安石榴苷的氧化。     

安石榴苷和绿原酸对金黄色葡萄球菌的协同抑制作用及机理研究

研究安石榴苷和绿原酸对金黄色葡萄球菌的协同抑菌作用及机理,为开发控制金黄色葡萄球菌的新型食品防腐剂提供理论基础。利用"棋盘法"研究安石榴苷和绿原酸对金黄色葡萄球菌的协同抑制作用;通过观察安石榴苷和绿原酸单独作用及协同作用对生长曲线、细胞膜电势、胞内外pH差及细胞形态等影响来探究协同抑菌机理。结果为安石榴苷和绿原酸对金黄色葡萄球菌具有协同抑制作用;与1/4最小抑菌浓度(MIC)安石榴苷或1/16 MIC绿原酸单独作用相比,在1/4 MIC安石榴苷和1/16 MIC绿原酸协同作用下,金黄色葡萄球菌的生长受到抑制,细胞膜发生去极化现象,胞内外pH差发生改变,细胞膜破损,菌体解体。协同作用组的膜电势、胞内外pH差分别与对照组有显著差异(p<0.05)。结果表明,安石榴苷和绿原酸的协同抑菌机理主要是二者协同破坏细胞膜,致使细胞膜破损,从而影响细菌的正常生长和繁殖。     

响应面优化石榴皮安石榴苷提取工艺及其抗氧化活性研究

为研究石榴皮安石榴苷的超声提取工艺及体外抗氧化活性,在单因素试验的基础上,采用响应面方法（response surface methodology,RSM）,研究乙醇浓度、提取时间、料液比、超声功率及提取次数对提取石榴皮中安石榴苷含量的影响,优化安石榴苷的超声辅助提取工艺;通过测定其对DPPH自由基、羟基自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（·O2-）和ABTS+自由基的清除能力,对安石榴苷提取物的体外抗氧化活性进行研究。结果显示,乙醇浓度和提取时间均对安石榴苷的含量有显著影响,其中乙醇浓度影响最大,料液比影响最小,最佳工艺条件为：乙醇浓度63%、料液比1∶26（g/mL）、超声功率200 W、提取时间40 min,提取1次,在此条件下安石榴苷含量达到（88.16±0.10）mg/g。体外抗氧化试验结果表明,安石榴苷提取物对DPPH自由基、·OH、·O2-和ABTS+自由基的IC50分别为101.0、227.0、341.6、35.81 μg/mL。其抗氧化活性均在一定浓度范围呈剂量效应关系。     

石榴皮多酚体外抗脂质过氧化作用研究

为研究石榴皮多酚的抗脂质过氧化作用及起关键作用的成分,采用3个脂质过氧化研究体系,即卵黄体系、低密度脂蛋白体系和大鼠肝脏匀浆体系,利用硫代巴比妥酸法测定了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷标准品和鞣花酸标准品对体外金属离子诱导性脂质过氧化的抑制作用。结果表明:安石榴苷,鞣花酸和石榴皮多酚纯化物均能有效抑制体外金属离子诱导的脂质过氧化,并且具有良好的剂量效应关系,其抗脂质过氧化的能力强弱顺序依次是:安石榴苷>鞣花酸>石榴皮多酚纯化物>茶多酚,说明安石榴苷是石榴皮多酚中抗脂质过氧化的的关键物质。     

石榴皮安石榴苷提取工艺及抗氧化活性研究

以石榴皮为研究对象,用毒害小的乙醇溶液为提取溶剂,以安石榴苷为分离目标,用高效液相色谱法检测安石榴苷含量,采用Box-Behnken中心组合设计原理设计试验,应用响应面法优化提取工艺条件,通过考察·OH、O_2~-·、DPPH·清除能力,评价提取物的体外抗氧化性。响应面法优化结果显示,安石榴苷提取的最优条件为:乙醇浓度60%,料液比1:25(g/mL),提取温度60℃,提取时间6 h;在此条件下进行验证,安石榴苷的提取量可达到70.89g/kg,各因素对安石榴苷提取的影响顺序为:乙醇浓度提取温度提取时间料液比;自由基清除试验显示,安石榴苷粗提物可以较好地清除·OH、O_2~-·、DPPH·,且对各自由基清除能力明显高于石榴皮原料。     

安石榴苷对金黄色葡萄球菌毒力因子表达的抑制作用

分别采用溶血试验法、凝固酶效价法和酶联免疫反应法检测了安石榴苷处理后金黄色葡萄球菌溶血素、血浆凝固酶和总肠毒素的表达变化,并通过反转录实时荧光定量PCR技术检测毒力相关基因的表达情况。结果表明,安石榴苷能显著减少α-溶血素的产生,但对溶血素的抑制作用未呈现浓度依赖性;在高于1/4 MIC浓度下安石榴苷能降低血浆凝固酶的表达;在高于1/2 MIC浓度下,安石榴苷显著降低总肠毒素的产生;安石榴苷对肠毒素基因sea、溶血素基因hla和调节基因agrA的转录产生显著抑制作用,在1/8 MIC浓度下3个基因的相对表达量分别为对照组的3%,5%,5%。     

安石榴苷的纯化及对金黄色葡萄球菌抑菌作用的研究

采用超声波辅助法从石榴皮中提取单宁类物质,并用Amberlite XAD-16大孔吸附树脂进行柱层析,以甲醇梯度洗脱法进行纯化,经高效液相色谱对其组分进行分析后,以安石榴苷含量最高的组分对金黄色葡萄球菌进行抑菌实验,分别测得抑菌圈直径和最小抑菌浓度,并检测了安石榴苷对金黄色葡萄球菌生长曲线的影响。液相结果表明,随着洗脱剂浓度的升高,安石榴苷的含量呈现先升高后降低的趋势,最高含量达79.6%;抑菌结果表明,安石榴苷纯化物对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌效果,最小抑菌浓度为0.1mg/m L,安石榴苷纯化物以剂量依赖的形式抑制金黄色葡萄球菌的生长。     

石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响

研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变L-02肝细胞胆固醇合成限速酶HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度;体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受施物,继续培养48 h,采用RT-PCR法检测不同受施物对脂变L-02肝细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达的影响;结果显示:石榴皮多酚均能呈剂量依赖性地减弱脂变L-02肝细胞mRNA表达,且以100μg/mL的安石榴苷标品抑制作用最强;表明石榴皮多酚降肝细胞总胆固醇作用是通过降低HMG-CoA还原酶mRNA表达实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。     

石榴皮多酚纯化及其抗氧化活性表征

目的：研究石榴皮多酚的纯化技术以及对石榴皮多酚提取物进行体外抗氧化活性表征。方法：选用国产10种大孔吸附树脂对超声波辅助提取所得的石榴皮粗提物进行分离纯化,并研究吸附动力学特征。采用4种常用体外抗氧化评价方法对纯化的石榴皮多酚进行活性表征。结果：大孔吸附树脂D160和XRD-6使石榴皮多酚粗提物中多酚纯度由35.05%提高到87.81%,其中,安石榴苷的纯度由原来的21.25%提高到73.96%。体外抗氧化实验表明,抗氧化活性与石榴皮提取物中多酚的纯度,尤其是安石榴苷的纯度,呈明显的剂量-效应关系;结论：大孔吸附树脂可以应用于石榴皮多酚的分离纯化;安石榴苷是石榴皮多酚中起抗氧化活性的关键成分。     

石榴皮多酚抗肿瘤活性及其机制研究进展

现代研究表明,石榴皮多酚在预防和治疗癌症方面都表现出了良好的生物学活性,安石榴苷和鞣花酸作为其主要成分也分别具有良好的抗肿瘤活性。本文就近年来国内外对石榴皮多酚、安石榴苷和鞣花酸的抗肿瘤活性和机制研究进展进行综述,以期为石榴资源的充分利用提供参考。     

田口法优化石榴皮中3种活性成分的提取工艺

采用田口法优化乙醇回流提取石榴皮中3种酚酸——安石榴林、安石榴苷和鞣花酸,并使3种成分产率达到最大。通过单因素试验和田口法优化显著影响石榴皮提取的因素,包括乙醇体积分数、提取温度、提取时间、液料比、粒径和提取次数。结果表明,优化后取得的乙醇体积分数、提取温度、提取时间、液料比、粒径和提取次数分别为20%、70℃、2 h、50︰1(mL/g)、0.125 mm和提取2次。在这些最佳条件下,从1 g干燥的石榴皮粉末中可获得17.89±0.27 mg安石榴林、498.66±2.13 mg安石榴苷、7.30±0.05 mg鞣花酸,与预测值17.94 mg安石榴林、497.44 mg安石榴苷、7.26 mg鞣花酸符合。因此,达到利用田口法使安石榴林、安石榴苷和鞣花酸3种成分产率最大的目标。     

石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞胆固醇合成的影响及机制探究

研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变肝细胞胆固醇合成的影响及机制;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度,体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受试物,继续培养48 h,油红O染色定性观察细胞形态和脂滴堆积,高效液相色谱法定量检测细胞内胆固醇含量;紫外分光-速率法检测HMG-CoA还原酶活性变化;结果显示石榴皮多酚均能成剂量依赖性地减少细胞内脂滴的积累、减少细胞内总胆固醇的含量,同时抑制HMG-CoA还原酶的活性,其中以100μg/mL的安石榴苷标品效果最佳。表明石榴皮多酚具有降低肝细胞内总胆固醇的作用,可能是通过抑制HMG-CoA还原酶活性实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。     

石榴的栽培及石榴酒酿造（一）

石榴的栽培及石榴酒酿造（一）张家训（安徽乳泉集团石榴饮品公司）被誉为“天下之奇树、九州之名果”的石榴，两千多年前移植我国。晋人张华《博物志》载：“张骞使西域，得涂林安国榴种以归，故名安石榴。”安石国，即伊朗古国安息。或云自北路输入者名安石榴，自南路泊...     

SIRT3多酚激活剂的筛选及其对UVB诱导HaCaT细胞衰老的修复作用

沉默信息调节因子2相关酶类3（silent mating type information regulation 2 homolog 3,SIRT3）是位于线粒体基质中的一种去乙酰化酶,在线粒体能量代谢、氧化应激调节、延缓衰老等方面具有重要的作用。本研究通过采用SIRT3-EGFP报告基因系统及实时荧光定量聚合酶链式反应技术,从白藜芦醇、山柰酚、石榴皮鞣素、安石榴苷、漆树黄酮、咖啡醇、矢车菊素、飞燕草素葡萄糖苷这8 种多酚类化合物中筛选SIRT3激活剂,并评价筛选得到的SIRT3多酚激活剂对于中波紫外线（ultraviolet radiation B,UVB）诱导的人正常皮肤永生化角质形成细胞（human immortalized keratinocytes,HaCaT）衰老的抑制作用。结果表明,白藜芦醇、山柰酚、安石榴苷、漆树黄酮和咖啡醇具有显著增强SIRT3基因表达水平的作用（P＜0.05）;白藜芦醇、安石榴苷、漆树黄酮以及咖啡醇均能有效降低UVB诱导的细胞内活性氧水平;这5 种多酚均显著提高了谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）/氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione,GSSG）比值（P＜0.05）,白藜芦醇与咖啡醇显著增强了超氧化物歧化酶2活性（P＜0.05、P＜0.01）;此外,安石榴苷不仅可以激活SIRT3,修复细胞的抗氧化系统,且显著降低了细胞衰老标志物SA-β-gal的相对活力（P＜0.05）。结论：白藜芦醇、山柰酚、安石榴苷、漆树黄酮和咖啡醇均能激活SIRT3基因的表达,其中安石榴苷能够显著修复UVB诱导的HaCaT细胞衰老,其抗衰老机制可能与SIRT3-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸-GSH/GSSG抗氧化途径有关。     

三种多酚与牛血清蛋白相互作用的初步研究

采用紫外光谱法、荧光光谱法、圆二色谱法、同步荧光光谱法等方法分析异荭草素、鞣花酸和安石榴苷与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)的相互作用。结果表明,三种多酚类化合物对BSA的荧光猝灭机制主要为静态猝灭;与3种多酚结合后,BSA的构象发生变化,异荭草素与BSA的结合位点比例约为2∶1,安石榴苷、鞣花酸与BSA的结合位点比例约为1∶1;异荭草素、安石榴苷、鞣花酸与BSA相互作用的主要作用力初步确定为疏水作用力,并且此3种多酚与BSA之间的结合主要是吸热和熵驱动的反应。3种多酚均与牛血清蛋白产生不同程度的结合,为蛋白质与多酚复合物的研究提供了理论支撑。     

大孔吸附树脂分离石榴皮中安石榴苷工艺研究

采用大孔吸附树脂分离石榴皮中安石榴苷。对比吸附率和解吸率,筛选大孔吸附树脂;考察梯度洗脱和等度洗脱分离纯化效果,选择分离方式;通过单因素试验,确定分离纯化参数。试验结果显示:选用LX-3010树脂在长径比为5∶1树脂柱中以等度洗脱方式分离纯化可以得到较高的安石榴苷提取量。单因素结果显示,树脂分离条件为:吸附液浓度2.0 mg/m L,吸附时间30 min,吸附流速1.5 m L/min;洗脱乙醇浓度40%,洗脱时间180 min,洗脱流速1.5 m L/min。在此条件下,可以得到纯度为80.12%的安石榴苷纯化产物。     

生活饮用水对石榴皮多酚提取纯化工艺的影响

目的 考察水质对石榴皮多酚提取纯化工艺的影响。方法 分别用生活饮用水和纯化水对石榴皮粉末进行提取分离纯化,对其流分中的石榴皮多酚类物质进行高效液相法(HPLC)测定。结果 生活饮用水对石榴皮粉末提取纯化得到安石榴苷含量为2.65%;纯化水对石榴皮粉末提取纯化得到安石榴苷含量为78.79%。 结论 生活饮用水对石榴皮多酚提取纯化的影响极大,会加速石榴皮多酚类物质的氧化。     

药食两用说石榴

“雾壳作房珠作骨,水晶为粒玉为浆”,这首诗形象地描绘了石榴的晶莹剔透,可口宜人,石榴,为石榴科植物石榴的果实,我国大部分地区均有栽培,又名安石榴、甘石榴、金罂、丹若。 石榴在我国栽培历史悠久,目前大约有70多个品种,分为观赏和