原儿茶醛对阪崎克罗诺肠杆菌的抑制作用及机理

本文通过检测原儿茶醛（PC）对阪崎克罗诺肠杆菌的最小抑菌浓度及对生长曲线的影响,分析其抑菌效果;利用场发射扫描电镜,观测PC对阪崎克罗诺肠杆菌细胞形态的影响;利用多种荧光探针检测PC对细菌细胞膜完整性、胞内pH、胞内ATP浓度、膜电位的作用,探明其可能的抑菌机理。结果表明：PC对阪崎肠杆菌的最小抑菌浓度为0.625~1.25 mg/mL,PC使细菌生长速率和最大菌体浓度显著减小。扫描电镜结果表明PC使菌体干瘪皱缩,丧失原本的棒状杆菌形态。同时,浓度为2MIC和4MIC的PC使细胞膜完整性分别降低49.0%和50.7%,使胞内pH由6.87降低为5.67和4.47,使胞内ATP浓度由1.824 μmol/L降低为0.01 μmol/L以下,并且使细菌细胞膜出现去极化。综上所述,PC对阪崎克罗诺肠杆菌有良好的抑制效果,其可能的抑菌机理是影响细胞膜的通透性,原儿茶醛有潜力作为天然抑菌剂在婴幼儿食品或其他食品中使用。     

尿石素A对巨噬细胞极化及巨噬-泡沫细胞形成的作用

旨在探究尿石素A对巨噬细胞极化及对巨噬-泡沫细胞形成的影响及相关的分子机制。结果发现,尿石素A通过调控不同标志基因的表达,不仅能够抑制RAW264.7小鼠巨噬细胞向促炎的M1型巨噬细胞极化,还能促进自然状态巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化;油红O染色发现尿石素A能够显著抑制巨噬-泡沫细胞形成,实时荧光定量聚合酶链式反应检测说明尿石素A能够抑制胆固醇合成基因羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶和脂肪酸合成酶基因的转录;此外,尿石素A显著上调三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1和G1基因的表达,该两个基因表达与促进了胆固醇的排出相关。本研究证明了尿石素A对巨噬细胞极化具有调控作用,同时尿石素A能够抑制巨噬-泡沫细胞形成和胆固醇合成。这些结果揭示了尿石素A具有潜在的抗动脉粥样硬化的作用,为之后深入研究提供了理论参考。     

柠檬醛对副溶血性弧菌的抑制作用

有效预防和控制副溶血性弧菌对食品的污染对于保障公众健康具有重要意义。本研究首先利用琼脂稀释法测定7?种植物源活性物质（丁香酸、阿魏酸、绿原酸、硫辛酸、原儿茶酸、原儿茶醛和柠檬醛）对副溶血性弧菌的最小抑菌浓度,在此基础上选择柠檬醛进行后续实验;通过检测经柠檬醛处理后的副溶血性弧菌生长曲线、细胞膜电位、胞内ATP浓度、细胞膜完整性以及细胞形态的变化,探究柠檬醛对副溶血性弧菌的抑制作用及可能的作用机理。结果表明：柠檬醛相比于其他6?种植物源活性物质对副溶血性弧菌有更好的抑菌效果,其对两株标准菌株和8?株分离菌株的最小抑菌浓度在0.10～0.60?mg/mL范围内;柠檬醛能够引起副溶血性弧菌细胞膜电位去极化、胞内ATP浓度降低及细胞膜完整性下降,同时可使细胞皱缩变形。本研究结果表明柠檬醛具有良好的抑菌功效,并有潜力作为天然的抗菌物质应用于食品工业。     

安石榴苷对金黄色葡萄球菌毒力因子表达的抑制作用

分别采用溶血试验法、凝固酶效价法和酶联免疫反应法检测了安石榴苷处理后金黄色葡萄球菌溶血素、血浆凝固酶和总肠毒素的表达变化,并通过反转录实时荧光定量PCR技术检测毒力相关基因的表达情况。结果表明,安石榴苷能显著减少α-溶血素的产生,但对溶血素的抑制作用未呈现浓度依赖性;在高于1/4 MIC浓度下安石榴苷能降低血浆凝固酶的表达;在高于1/2 MIC浓度下,安石榴苷显著降低总肠毒素的产生;安石榴苷对肠毒素基因sea、溶血素基因hla和调节基因agrA的转录产生显著抑制作用,在1/8 MIC浓度下3个基因的相对表达量分别为对照组的3%,5%,5%。     

反式肉桂醛与温和加热结合对复原婴幼儿牛乳中阪崎克罗诺肠杆菌的抑杀作用

研究反式肉桂醛与温和加热结合对复原婴幼儿牛乳中阪崎克罗诺肠杆菌的抑杀作用。将3 种阪崎克罗诺 肠杆菌的混合菌株（浓度约6.6（lg（CFU/mL）））接种于含有不同质量分数反式肉桂醛（0、0.1%、0.2%、0.3% 和0.4%）的复原婴幼儿牛乳样品中,将样品置于25、45、50、55 ℃培养,并在不同的时间点对样品中存活的阪崎 克罗诺肠杆菌涂布计数。为探究反式肉桂醛与温和加热结合的抑杀机制,实验利用LIVE/DEAD?细菌活性检测试 剂盒和场发射扫描电子显微镜探究细胞膜完整性及细胞形态。结果表明：0.4%的反式肉桂醛在25 ℃处理90 min、 45 ℃处理20 min、50 ℃处理10 min及55 ℃处理10 min使复原婴幼儿牛乳中阪崎克罗诺肠杆菌总数降低至检出限 以下。与反式肉桂醛及温和加热单独作用相比,反式肉桂醛结合温和加热对阪崎克罗诺肠杆菌有显著的抑杀效果 （P＜0.05）,并且随温和加热温度的升高及反式肉桂醛质量分数的增加,效果更加明显。温和加热与反式肉桂醛 结合会影响细胞膜的通透性并使细胞破碎瓦解。以上结果表明：反式肉桂醛与温和加热结合有潜力在冲调乳粉过程 中应用,从而降低阪崎克罗诺肠杆菌的感染风险。     

安石榴苷和绿原酸对金黄色葡萄球菌的协同抑制作用及机理研究

研究安石榴苷和绿原酸对金黄色葡萄球菌的协同抑菌作用及机理,为开发控制金黄色葡萄球菌的新型食品防腐剂提供理论基础。利用"棋盘法"研究安石榴苷和绿原酸对金黄色葡萄球菌的协同抑制作用;通过观察安石榴苷和绿原酸单独作用及协同作用对生长曲线、细胞膜电势、胞内外pH差及细胞形态等影响来探究协同抑菌机理。结果为安石榴苷和绿原酸对金黄色葡萄球菌具有协同抑制作用;与1/4最小抑菌浓度(MIC)安石榴苷或1/16 MIC绿原酸单独作用相比,在1/4 MIC安石榴苷和1/16 MIC绿原酸协同作用下,金黄色葡萄球菌的生长受到抑制,细胞膜发生去极化现象,胞内外pH差发生改变,细胞膜破损,菌体解体。协同作用组的膜电势、胞内外pH差分别与对照组有显著差异(p<0.05)。结果表明,安石榴苷和绿原酸的协同抑菌机理主要是二者协同破坏细胞膜,致使细胞膜破损,从而影响细菌的正常生长和繁殖。     

50种植物源化合物对阪崎克罗诺肠杆菌的抑菌活性评价

阪崎克罗诺肠杆菌（Cronobacter sakazkaii）是一种食源性条件致病菌,它能够引起菌血症、坏死性小肠 结肠炎和新生儿脑膜炎等多种疾病。本研究选取50 种植物源化合物,检测其在含C. sakazkaii培养基中抑菌圈直径 及最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）,旨在评价植物源化合物对C. sakazakii的抑菌作用并筛 查优选高效抑菌剂。结果表明：使C. sakazakii ATCC 29544培养基产生可见抑菌圈的植物源化合物有40 种,其中 7 种（香芹酚、百里醌、百里酚、肉桂醛、柠檬醛、原儿茶醛和原儿茶酸）的抑菌圈平均直径不小于13 mm;在本 研究选取的50 种植物源化合物中,百里酚和香芹酚对C. sakazakii有着最强的抑制作用,对9 株C. sakazkaii的MIC均 为0.1～0.2 mg/mL;百里醌、肉桂醛、柠檬醛和原儿茶醛对C. sakazkaii有良好的抑菌效果,对C. sakazkaii的MIC为 0.30～1.25 mg/mL;阿魏酸、绿原酸、丁香酸、硫辛酸、原儿茶酸、表儿茶素、咖啡酸、丹皮酚和菊苣酸的MIC为 2.50～5.00 mg/mL。以上结果表明,部分植物源化合物对C. sakazakii有良好的抑菌作用,有潜力作为天然抑菌剂应 用于食品加工、流通、贮藏过程中,从而发挥其控制C. sakazakii的作用。     

猕猴桃汁射频杀菌工艺初探

本研究选用鲜榨猕猴桃汁为研究对象,以沙门氏菌为受试菌,使用固定频率为27.12MHz的射频设备进行处理,研究了处理时间、极板间距以及猕猴桃汁厚度对射频杀菌效果的影响。通过正交实验得出射频杀菌的最优条件为:极板间距105mm、处理时间210s、猕猴桃汁厚度为45mm。该条件下射频处理可使猕猴桃汁中的沙门氏菌下降8个以上数量级。同时,本研究还比较了巴氏杀菌和射频杀菌对猕猴桃汁中维生素C含量的影响,结果表明相比巴氏杀菌,射频杀菌能更好地保持猕猴桃汁中维生素C。     

鸡肉源沙门氏菌对(氟)喹诺酮类抗生素的耐药性及相关基因

目的:研究分离于广东、广西、福建和上海4省(市)零售鸡肉源沙门氏菌对萘啶酮酸和部分氟喹诺酮类抗生素的药敏性及相关耐药基因,以更好地了解耐药性的产生和传播途径,确保食品安全。方法:使用临床和实验室标准协会推荐的琼脂稀释法测定沙门氏菌的药敏性,用PCR、基因序列测定和基因库在线比对方法确定耐药沙门氏菌中与(氟)喹诺酮类抗生素耐药相关的gyr A亚基中喹诺酮类抗性决定区,par C亚基中的氨基酸突变状况以及qnr质粒携带的与喹诺酮类抗生素耐药相关基因。结果:358株沙门氏菌中,59.78%的菌株对萘啶酮酸产生抗性,对环丙沙星、左氧氟沙星和加替沙星耐药的菌株比例分别为22.91%,17.88%和16.20%。214株萘啶酮酸抗性菌中,qnr A,qnr B,qnr S和aac(6′)-Ib-cr基因的检出率分别为11.68%,18.22%,3.27%和24.77%。82株环丙沙星抗性菌中,从gyr A和par C基因中共检出135个氨基酸突变点,其中从gyr A基因中检出65个突变点,从par C基因中检出70个突变点。gyr A基因中以Asp87Asn突变最为常见(47.69%;31/82),其次分别为Asp87Gly(38.46%,25/82),Asp87Tyr(4.62%,3/82),Ser83Phe和Asp87Asn双突变(3.80%,1/82),Asp87Asn和Ile89Val双突变(3.80%,1/82),Asp87Asn和Val90Gly双突变(3.80%,1/82)。par C基因中Ser80Arg突变最为常见(90.00%,63/82),其次分别为Met118Ile-Arg119Leu-Thr121Ser三突变(4.29%,1/82),Ser80Arg和Tyr120Phe双突变(2.86%,1/82),Ser80Ile(1.43%,1/82)和Ala81Val(1.43%;1/82)。结论:4省市中鸡肉源沙门氏菌对萘啶酮酸和部分氟喹诺酮类抗生素耐药严重,其中解旋酶和拓扑异构酶基因突变以及沙门氏菌携带的qnr A,qnr B,qnr S和aac(6′)-Ib-cr基因是沙门氏菌耐药的重要原因。     

巴氏灭活嗜黏蛋白阿克曼氏菌对ox-LDL诱导的HAEC细胞损伤的保护作用及机制初探

目的:本研究以巴氏灭活的嗜黏蛋白阿克曼氏菌（pasteurized Akkermansia muciniphila,PAKK）为研究对象,探究其对氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein,ox-LDL）诱导的人主动脉内皮细胞（human aortic endothelial cells,HAEC）损伤的保护作用。方法:首先利用MTT法评价PAKK对细胞活性的影响并确定合适的剂量。建立ox-LDL诱导的细胞损伤模型,并通过测定细胞乳酸脱氢酶、活性氧等评价PAKK对细胞损伤的保护作用,最后通过测定抗氧化酶活力以及Nrf2抗氧化通路相关基因及蛋白表达等,探讨PAKK改善HAEC细胞氧化损伤的可能机制。结果:菌数为105和106 CFU/mL的PAKK不影响HAEC细胞的活性;能显著降低ox-LDL诱导HAEC细胞的乳酸脱氢酶释放率;显著降低细胞内的活性氧水平,提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活力,以及细胞的总抗氧化能力;显著上调细胞内转录因子核因子-E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、血红素氧合酶-1（hemeoxygenase-1, HO-1）、谷胱甘肽巯基转移酶（glutathione S-transferase,GST）以及NADPH醌氧化还原酶1 （NADPH quinine oxidoreductase-1,NQO1）的mRNA表达量;显著上调Nrf2、HO-1、NQO1蛋白的表达。结论:本研究表明巴氏灭活的嗜黏蛋白阿克曼氏菌可缓解ox-LDL对HAEC细胞造成的损伤,且其保护作用可能是通过调节Nrf2信号通路从而增强抗氧化相关基因表达。本研究为开发基于嗜黏蛋白阿克曼氏菌的可用于预防动脉粥样硬化的益生菌相关产品奠定理论基础。