鲜马奶乳清蛋白抗氧化肽分离纯化及其活性研究

分离纯化鲜马奶抗氧化活性肽并检测其抗氧化活性。以胰蛋白酶为酶源酶解鲜马奶乳清蛋白,采用3KDa、10KDa、30KDa不同分子量范围超滤膜对水解液进行分离,分子量在3~10KDa段的酶解液还原能力、DPPH清除能力、羟自由基清除能力,超氧阴离子清除能力均较高,分别为0.8949、63.19%、77.13%、70.08%。用SephadexG-50葡聚糖凝胶色谱纯化鲜马奶抗氧化活性肽并检测其抗氧化活性,得到A、B两个组分,B组分的还原能力、DPPH清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力均高于A,分别为0.9814、55.28%、74.25%、56.67%。说明鲜马奶乳清蛋白酶解液具有一定的抗氧化活性,为鲜马奶抗氧化肽进一步纯化、结构鉴定及其生物活性研究提供基础。     

鲢鱼肽美拉德反应产物超滤组分的抗氧化活性研究

鲢鱼肽美拉德反应产物(MRPs)经5 k Da、1 k Da超滤膜分离、然后再经溶剂分级后,获得了不同组分,分析其抗氧化活性与理化特性。通过对不同组分的DPPH自由基清除活性、金属离子螯合活性和总抗氧化能力的测定可以看出,水溶性组分中的高分子量化合物比低分子量化合物具有较高抗氧化活性,而醇溶性组分中高分子量的抗氧化活性比低分子量的低。MRPs中水溶性组分F-3(5 k Da)对DPPH自由基清除活性、对金属离子的螯合活性和总抗氧化力最高;水溶性组分中F-3和F-2(1 k Da~5 k Da)的褐变程度较高,F-3的荧光强度最高;FI-IR分析发现,F-2和F-3在860.01 cm-1和948.61 cm-1处有强烈的吸收峰,这表明肽因美拉德反应发生了结构的变化。因此,鲢鱼肽MRPs中起主要抗氧化作用的为水溶性物质,且其中相对高分子量的有色水溶性产物抗氧化活性较强。     

牦牛血抗氧化肽制备方法对比及分离纯化研究

为研究牦牛血抗氧化肽最佳制备方法,以牦牛血为原料,分别采用枯草芽孢杆菌发酵法、碱性蛋白酶解法、菌酶联合法制备3种牦牛血抗氧化肽,依次简写为BF、AP、BA。应用羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O_2-)清除能力,脂质过氧化抑制能力、还原力4种体外抗氧化实验,对比3种牦牛血抗氧化肽的抗氧化活性。以超滤、凝胶层析法对制备的较高活性产物进行分离。结果表明:3种抗氧化肽活性大小为BABFAP,BA有最大的·O_2-清除能力、脂质过氧化抑制能力及还原力,表明制备牦牛血抗氧化肽的最佳制备方法为菌酶联合法;超滤分离菌酶联合制备产物获得分子量5 kD的抗氧化肽活性高于分子量10 kDa、介于5~10 kDa的抗氧化肽,对·OH的IC50值为1.62 mg/mL;该组分经凝胶层析分离后得到4个组分,其最高活性组分Ⅰ对·OH的IC50值达到0.72 mg/mL。     

新疆阿魏菇抗氧化肽分离纯化及抗氧化性质

采用超滤法、离子交换层析和凝胶过滤层析分离阿魏菇抗氧化多肽,研究其抗氧化性能。以胃蛋白酶-胰蛋白酶联合酶解阿魏菇多肽水解物为原料,采用超滤法分离阿魏菇水解液,使用10 000的超滤膜,将阿魏菇水解液分离成10 000以下的多肽组分和大于10 000的多肽组分,小于10 000的多肽组分的·OH自由基清除能力和DPPH·自由基清除能力较高。小于10 000的多肽组分经DEAE-32纤维素分离,得到3个洗脱峰,其中P3组分的羟基清除能力较高,达到50.22%。P3组分采用葡聚糖凝胶Sephadex G-25分离,在220 nm处得到5个洗脱峰,组分P3-2的羟自由基清除最高,达到77.23%,具有较高的抗氧化活性,其相对分子质量大约为1 862。     

不同分子质量米糠多肽的抗氧化活性

采用截留分子质量为10000、3000D超滤膜对碱性蛋白酶水解米糠蛋白的水解液进行分离,获得不同分子质量(Mw)的米糠多肽混合物组分,以6种抗氧化活性指标对米糠多肽混合物组分的抗氧化活性进行评价。结果表明:米糠多肽的抗氧化活性与蛋白分子质量大小密切相关。Mw>10kD的米糠多肽对.OH的清除能力最强,属于活性氧自由基清除的抗氧化机制;Mw3～10kD的米糠多肽对Fe3+螯合能力最强,属于金属离子螯合的抗氧化机制;Mw<3kD的米糠多肽对O-2.的清除能力、DPPH自由基的清除能力、ABTS+.清除能力和Fe3+还原能力最强,属于电子转移(SET)的抗氧化机制。不同分子质量的米糠多肽抗氧化活性随多肽质量浓度的增加而增加。     

玉米胚芽脱脂粕水解物的分离及抗氧化性质研究

文章主要采用超滤、凝胶层析对脱脂玉米胚芽粕水解物进行分离,评价玉米胚芽粕水解物及分离所获得的组分的抗氧化活性。结果表明,玉米胚芽粕水解液经超滤分级后,筛选得到分子量6kDa的组分抗氧化活性较强,进一步采用Sephadex G-15凝胶层析分离,得到G1、G2、G3、G4 4个抗氧化活性组分,其中G2组分抗氧化活性最强。玉米胚芽粕水解物具有较强的清除超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH·能力、抗油脂氧化能力和还原力。     

海洋胶原低聚肽的分离纯化及其抗氧化活性研究

通过总抗氧化能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力及还原能力实验,对海洋胶原低聚肽的体外抗氧化活性进行考察,然后采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对海洋胶原低聚肽进行分离纯化,测定收集得到的11个组分的总抗氧化能力。结果表明,海洋胶原低聚肽具有一定的总抗氧化能力、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除能力,并且具有一定的还原能力;RP-HPLC分离纯化后,5个组分的抗氧化活性显著提高,对总肽整体的抗氧化活性起到了重要的作用,并且疏水性肽组分对抗氧化活性的贡献大于亲水性肽组分。     

草鱼鱼皮不同分子量肽段体外抗氧化性能的研究

采用碱性蛋白酶对草鱼皮进行水解,并将水解产物通过截留分子量为10、5和3 k Da的超滤膜,得到10、5~10、3~5和3 k Da四种不同分子量肽段组分。主要研究了粗蛋白水解产物经截留后不同分子量肽段的体外抗氧化活性及其功能,结果表明相同浓度下3~5和3 k Da肽段组分在清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基方面比蛋白水解产物或其它肽段组分的效果显著(p0.05),而10 k Da肽段组分与Fe2+螯合能力最强。然而,与还原型的L-谷胱甘肽相比,10、5~10、3~5 k Da肽段组分具有较弱的清除超氧阴离子自由基能力,肽的氨基酸序列在其抗氧化活性中起到关键作用。结果表明,3 k Da肽段组分可作为功能性天然抗氧化剂添加到保健食品中。     

克东腐乳中低聚肽的分离及其抗氧化活性研究

为研究克东腐乳中低聚肽的分离、纯化方法,评价其抗氧化活性,分别选取3 000 u及10 000 u超滤膜利用超滤、柱层析等方法从腐乳粗提液中分离、提取低聚肽,并结合硫代巴比妥酸法和DPPH法测定腐乳中低聚肽的抗氧化活性。结果表明:超滤后获得分子质量范围在3 000 u以下的粗提物较分子质量范围在3 000 u~10 000 u粗提物具有较强的抗氧化能力。经Sephadex G-25纯化后获得5个吸收峰,测定其抗氧活性,清除自由基能力最大可达38.68%,脂质体系抗氧化能力最大可达0.397 mg/kg。     

不同分子量黑籽瓜种子多肽抗氧化能力的研究

目的:研究不同分子量黑籽瓜种子多肽的抗氧化能力的差异。方法:利用超滤技术对黑籽瓜种子蛋白酶解产物(SWSPs)进行多级分离,得到不同分子量分布的五种组分(SWSPs-L、SWSPs-1、SWSPs-3、SWSPs-5、SWSPs-10),然后以七种抗氧化能力评价体系分别对五种组分进行评价。结果:不同分子量黑籽瓜种子多肽的抗氧化能力不尽相同,分子量在1~3 ku的组分SWSPs-1对超氧阴离子自由基的清除能力最强,而分子量1 ku的组分SWSPs-L则表现出了多重抗氧化机制,该组分与等浓度的EDTA具有相近的螯合效果。结论:黑籽瓜种子多肽的抗氧化能力与其分子量分布和氨基酸组成密切相关,是各方面综合作用的结果。