海洋胶原低聚肽的分离纯化及其抗氧化活性研究

通过总抗氧化能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力及还原能力实验,对海洋胶原低聚肽的体外抗氧化活性进行考察,然后采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对海洋胶原低聚肽进行分离纯化,测定收集得到的11个组分的总抗氧化能力。结果表明,海洋胶原低聚肽具有一定的总抗氧化能力、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除能力,并且具有一定的还原能力;RP-HPLC分离纯化后,5个组分的抗氧化活性显著提高,对总肽整体的抗氧化活性起到了重要的作用,并且疏水性肽组分对抗氧化活性的贡献大于亲水性肽组分。     

体外模拟消化对海洋鱼骨胶原低聚肽结构和抗氧化活性的影响

该研究以海洋鱼骨胶原低聚肽为研究对象,通过体外模拟肠胃液消化,分析了消化前后海洋鱼骨胶原低聚肽的分子质量分布,其中模拟先胃液后肠液消化后分子质量<1 000 u的组分和重均分子量降低最多(约23.95%),其他消化模式处理组分子质量变化较稳定;紫外全波长扫描显示,消化前后溶液中酪氨酸变化量小于5%;圆二色光谱分析结果表明,模拟先胃液后肠液消化后反平行式β-折叠减少最多,为24.12%,其余二级结构,变化不超过8.33%,同时其余处理组二级结构组成相对稳定,表明海洋鱼骨胶原低聚肽能够在一定程度上耐受胃肠道中胃蛋白酶和胰蛋白酶作用。通过测定DPPH自由基清除率、ABTS阳离子自由基清除率、铁离子还原能力及氧自由基吸收能力4个指标,推测出海洋鱼骨胶原低聚肽不仅在分子质量和结构方面具有抗消化稳定性,其抗氧化能力也具有抗消化稳定性。这为海洋鱼骨胶原低聚肽在天然抗氧化功能食品中的应用提供了理论基础。     

大豆低聚肽分子质量分布的测定及体外消化实验

为验证国产化大豆低聚肽产品分子质量分布和产品在体内经消化道后的稳定性,对该产品进行了分子质量分布测定及体外消化实验,目的是为以大豆低聚肽为原料开发功能性保健系列产品提供产品稳定性的理论依据。研究结果显示,国产大豆低聚肽分子质量均低于1 000 Da;经胃蛋白酶处理后,该大豆低聚肽95%以上未被消化,经胰蛋白酶处理后,约90%未被消化,说明该产品具有良好的稳定性,在体内大部分将以多肽的形式被直接吸收。同时应用该大豆低聚肽产品开发功能性食品时,其本身所具有的各项生理功能将不会发生改变。     

三种果蔬发酵液抗氧化和免疫调节功能研究

对比研究A、B、C三种果蔬发酵液产品的抗氧化能力和免疫调节能力。采用偶氮二异丁脒盐酸盐(AAPH)诱导的HepG2细胞氧化应激模型评价三种发酵液产品对细胞内活性氧簇(ROS)的影响,应用刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)诱导小鼠T/B淋巴细胞,检测其增殖能力,应用LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞,检测其吞噬能力和NO释放量。结果表明:三种果蔬发酵液具有较强的降低细胞内ROS含量的能力,果蔬发酵液A可使胞内ROS含量降低至55%;三种果蔬发酵液可提高淋巴细胞的增殖能力和腹腔巨噬细胞的吞噬能力,促进NO释放,在稀释倍数为104时果蔬发酵液A处理组NO释放量最高(4.06μmol/L)。三种果蔬发酵液具有较好的抗氧化活性和增强免疫的功能。     

牡蛎肽和紫苏籽肽及其复配物对环磷酰胺致雄性大鼠性功能损伤的改善作用

目的：通过血清激素水平、肾脏和睾丸脏器指数、肾脏和睾丸氧化应激状态以及组织结构变化评价牡蛎肽和紫苏籽肽以及二者复配对大鼠性功能损伤的改善作用。方法：制备牡蛎肽和紫苏籽肽,检测二者的氨基酸组成及相对分子质量;大鼠腹腔注射环磷酰胺建立性功能损伤模型,通过灌胃不同剂量的肽及复配组评价大鼠肾脏和睾丸指数,检测大鼠血清相关指标,肾脏和睾丸氧化应激状态和组织结构变化,分析肽对模型大鼠上述指标的影响。结果：牡蛎肽和紫苏籽肽及复配组都可不同程度地提高大鼠血清相关指标和脏器指数,改善肾脏和睾丸氧化应激状态,调节病理形态。结论：牡蛎肽和紫苏籽肽以及复配组都对大鼠性功能有一定的改善和调节作用,复配组的综合作用效果优于单一肽干预组。     

柑橘皮发酵液抗氧化活性及对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响

目的:评价柑橘皮发酵液的抗氧化能力,并通过建立体外肝细胞脂肪堆积模型评价橘皮发酵液清除肝细胞脂肪堆积能力。方法:通过乳酸菌发酵获得柑橘皮发酵液,并测定发酵液对DPPH与羟自由基的清除能力;依次采用70%乙醇、正丁醇、乙酸乙酯对柑橘皮发酵液进行提取获得相应提取物,利用油酸诱导Hep G2细胞并建立细胞脂肪堆积模型,从噻唑蓝染色吸光度(MTT值)、甘油三酯(TG值)、细胞内脂滴形态3方面评价柑橘皮发酵液提取物的作用。结果:发酵后的柑橘皮对DPPH及羟自由基具有一定的清除能力,发酵液提取物可减轻细胞内脂质堆积现象,显著降低细胞内TG的积累量,其中200μg/mL正丁醇与乙酸乙酯提取物对细胞内TG清除率分别达40.35%和41.64%。结论:柑橘皮发酵液具有良好的体外抗氧化与降脂活性,对非酒精性脂肪肝具有良好的预防效果。     

紫苏籽肽对环磷酰胺致性功能损伤大鼠的改善作用

目的：研究紫苏籽肽对环磷酰胺造模大鼠性功能损伤的改善作用。方法：80 只SPF级6 周龄雄性SD大鼠随机分为8 组,每组10 只。除空白组外,其余各组大鼠通过注射20 mg/（kg mb·d）环磷酰胺造模,随后各干预组大鼠经不同剂量的紫苏籽肽和紫苏籽蛋白灌胃处理。用酶联免疫吸附测定、实时荧光定量聚合酶链式反应、苏木精-伊红染色分别检测大鼠血清中相关细胞因子、蛋白和激素水平,睾丸中相关基因表达量以及睾丸和肾脏组织的病理形态变化,同时检测睾丸和肾脏中超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量,测定睾丸和肾脏以及免疫器官的脏器指数。结果：模型组与空白组相比,大鼠血清睾酮、游离睾酮、促黄体生成素、卵泡刺激素、白细胞介素2、干扰素γ、免疫球蛋白G水平均显著下降,相关基因表达量显著降低,超氧化物歧化酶活力显著降低,丙二醛含量显著升高,脏器指数显著下降（P＜0.05）;不同剂量紫苏籽肽和蛋白处理组大鼠的上述指标均有不同程度改善,其中紫苏籽肽对于睾丸和肾脏氧化应激状态以及血清激素水平的影响显著（P＜0.05）。结论：紫苏籽肽可以有效改善环磷酰胺造成的大鼠生殖损伤状况从而达到改善性功能的作用,并提高大鼠血清白细胞介素2、干扰素γ、免疫球蛋白G水平和免疫器官脏器指数。     

豌豆低聚肽硒螯合物的稳定性研究

以豌豆低聚肽和亚硒酸钠为原料制备豌豆低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮、分子质量分布的基础理化性质进行研究,然后以分子质量分布和硒含量为指标对螯合物的热稳定性、酸碱稳定性、消化稳定性进行考察。结果表明,豌豆低聚肽硒螯合物水分含量为(14. 17±1. 12)%(质量分数),酸溶蛋白含量为(23. 22±0. 12)%(质量分数),总氮含量为(23. 87±0. 30)%,分子质量分布在1 000 Da以下的占比超过76%。在温度25～100℃时,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于2%,硒含量变化不显著。在pH=3～11,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于3%,硒含量虽有一定变化,但含量仍在78%以上。经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和2种酶共同消化后,分子质量在1 000 Da以下的部分比例均都在90%以上,而硒含量变化不显著。这说明豌豆低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

玉米低聚肽中ACE抑制肽的分离纯化及结构鉴定

为了考察玉米低聚肽中血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的活性和结构,以玉米黄粉为原料,采用两步酶解法制备出玉米低聚肽,在对其基础理化成分进行分析的基础上,测定其总抗氧化活性。结果表明,玉米低聚肽中总蛋白质含量为92.15%±5.26%,酸溶蛋白质含量为87.57%±5.98%,脂肪含量为0.06%±0.01%,灰分含量为3.12%±0.38%,水分含量为3.54%±0.29%。玉米低聚肽的ACI抑制活性为0.55±0.03 mg/mL。利用反相高效液相色谱对玉米低聚肽进行分离纯化,选择ACE抑制活性最高的组分峰,利用质谱仪测定肽段序列,鉴定出4个ACE抑制肽段:AY、SAP、NAP、VNAP, IC50值分别为0.036±0.005, 0.039±0.004, 0.112±0.010和0.205±0.018 mg/mL,大约是玉米低聚肽的15.3, 14.1, 4.9和2.7倍,是具有较高ACE抑制活性的肽段。     

牡蛎生物活性肽的研究进展

生物活性肽是来源于蛋白质的多功能化合物,是可以调节生物机体的生命活动或具有生理活性作用的一类肽的总称。牡蛎肽又是生物活性肽的重要组成部分,含有丰富的蛋白质、人体必需的8种氨基酸、牛磺酸、维生素以及锌、硒、铁、铜、碘等微量元素;随着现代生物技术和医学技术的发展,制备牡蛎活性肽的方法多种,且牡蛎肽在抗氧化、降血糖、抗肿瘤、抑制血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)活性等方面具备特殊的生理活性。本文就牡蛎肽的制备以及牡蛎肽的生物活性等研究进行概述,为今后牡蛎肽的应用提供参考。