通过大豆蛋白的酶水解作用来制成功能性低聚肽(缩氨酸)

本文系统地研究了用蛋白酶和AS.1398中性蛋白酶对大豆蛋白进行水解而制成功能性低聚肽的加工工艺。详细地介绍了主要的工艺步骤,包括大豆蛋白溶液的预处理、大豆蛋白的酶水解、水解物的脱苦和脱盐等。重点讨论了通过大豆蛋白水解作用生产功能性低聚肽时,影响其生产的各种因素如基质的浓度、酶的剂量、反应温度及时间.PH值等。在最佳条件下,大豆蛋白的水解程度可达到35%。大豆低聚肽链会有2-4氨基酸。     

酶法制备大豆活性肽的工艺研究

大豆活性肽不仅保持了大豆蛋白质的营养性，而且具有独特的加工功能和生物活性。酶法制备大豆活性肽比酸碱水解法和生物合成法更有优势，酶法制备大豆活性肽的工艺，包括大豆蛋白和蛋白酶的选择、大豆蛋白的预处理、酶水解参数和酶水解方式的确定、水解度的控制、灭酶活方法、精制等操作单元。     

酶法大豆蛋白水解程度控制研究

通过研究不同蛋白酶对大豆分离蛋白的水解程度和最佳水解条件以及对水解后大豆蛋白功能性的影响研究，确立了酶水解法制备不同功能性大豆蛋白的工艺路线和工艺条件，即分散性较好、具有凝胶性的大豆分离蛋白采用木瓜蛋白酶或中性蛋白酶水解，水解度控制在5％～6％；乳用(高分散性)大豆分离蛋白采用NoVo复合蛋白酶水解，水解度控制在14％～15％，并可强化钙作为特殊产品需要。     

不同蛋白酶水解能力的比较研究

蛋白酶的水解能力在酶解大豆蛋白制备大豆肽中非常重要。本文通过测定酶解大豆蛋白的水解度，比较6种蛋白酶的水解能力，其中碱性蛋白酶的水解能力最强。将6种蛋白酶中的两种相组合，分别水解大豆蛋白，大豆蛋白的水解度最高达21．3％。两种蛋白酶所酶解大豆蛋白的水解度大于其中一种蛋白酶的水解度．但是小于两种蛋白酶的水解度之和。     

枯草芽孢杆菌蛋白酶水解大豆蛋白的研究

本研究选用枯草芽孢杆菌蛋白酶对大豆蛋白进行水解,分别研究了酶浓度、温度、pH和底物浓度等对酶解效果的影响,得出高水解度低聚肽酶解的最佳工艺条件为:酶浓度8000u/g、温度55℃、pH7.0、底物浓度2%、水解时间4h。     

大豆蛋白水解度与大豆肽抗氧化力关系研究

通过研究酶解大豆蛋白的水解度与大豆肽的抗氧化力大小,探索大豆蛋白水解度与大豆肽抗氧化力的关系。结果表明,两种组合蛋白酶所水解大豆蛋白的水解度大于其中任一种蛋白酶的水解度,小于两种蛋白酶的水解度之和;组合蛋白酶制备的大豆肽抗氧化力也大于其中任一种蛋白酶制备的大豆肽抗氧化力,小于两种蛋白酶制备的大豆肽抗氧化力之和;大豆肽抗氧化力的大小和大豆蛋白的水解度、单一蛋白酶及组合蛋白酶的种类有关,大豆肽抗氧化力有最佳水解度范围（18%~19%）,大豆蛋白水解度过大或过小时,大豆肽抗氧化力都会下降。     

固定化风味蛋白酶水解法生产高水解度大豆肽

采用固定化风味蛋白酶水解大豆蛋白生产大豆肽,以降低生产成本,同时提高水解度。通过单因素实验和响应面法对固定化风味蛋白酶法生产大豆肽的条件进行优化。结果表明,固定化风味蛋白酶法生产大豆肽的优化水解条件是65℃、p H值8.0、加酶量50 g/L,酶解7 h,水解度可达17.72%。固定化风味蛋白酶重复使用7次,相对酶活力仍高达79.1%。交联壳聚糖法制备的固定化风味蛋白酶具有良好的稳定性,可以重复多次使用,用于生产高水解度大豆肽是可行的,有利于降低生产成本。     

双酶法酶解大豆蛋白制备大豆低分子肽的研究

以水解度为考察指标,研究了枯草杆菌AS1．398中性蛋白酶、木瓜蛋白酶制备大豆肽的工艺参数。结果表明,利用AS1．398中性蛋白酶与木瓜蛋白酶协同水解大豆蛋白制取低分子肽的方法是可行的,木瓜蛋白酶与AS1．398蛋白酶酶活力之比为1：1情况下水解效果较佳。双酶水解的最佳条件是底物浓度100g/L,温度40℃,加酶量为12500U／g,pH为7．5。在此条件下,研究了水解时间与低分子肽得率的关系,表明水解4．5h即可。     

内切酶与端肽酶协同水解大豆蛋白的研究

大豆蛋白酶解常常会产生苦味,端肽酶可有效水解苦味肽,但它们对于完整的蛋白大分子几乎没有作用,因此必须与内切酶联合使用或在其后使用。研究了内切酶枯草杆菌碱性蛋白酶(Alcalase 2.4L)与端肽酶黑曲霉酸性蛋白酶(3000U/g)协同水解大豆蛋白制备寡肽的可行性,结果表明:采用端肽酶黑曲霉酸性蛋白酶与内切酶枯草杆菌碱性蛋白酶协同作用水解大豆蛋白,不但水解液的苦味值显著下降,而且大豆蛋白降解率和水解液水解度显著提高。     

酶法水解生产大豆多肽研究

本文研究了Alcalase酶对大豆蛋白的有限水解作用 ,分析了酶加量、pH值、温度、底物浓度、反应时间等因素对大豆蛋白酶水解的影响 ,确定了Alcalase蛋白酶水解大豆蛋白的较佳条件范围 ;同时研究了Flavourzyme酶对大豆多肽的水解作用 ,及对大豆多肽风味的影响 ,提出了采用Alcalase酶和Flavourzyme酶双酶法分步酶解工艺来生产低苦味大豆多肽的方法     

大豆蛋白酶解制寡肽过程中褐变的抑制

通过添加不同美拉德反应抑制剂,研究了进行大豆蛋白酶水解制备寡肽反应中美拉德褐变抑制的规律。研究表明,在水解条件下,抑制剂(包括氧化剂和还原剂)能有效抑制美拉德反应在大豆蛋白水解过程中的发生,减少色素物质生成,且不影响大豆蛋白的降解率和水解液的水解度。其中H2O2的抑制效果最好。     

大豆低聚肽对自发性高血压大鼠血压及血浆血管紧张素的影响

目的：探究大豆低聚肽对于大鼠血压及血浆血管紧张素的影响。方法：采用酶法制备大豆低聚肽,随后进行体外血管紧张素I转换酶（angiotensin I converting enzyme,ACE）活性抑制实验及体内实验,实验设正常对照组（正常血压大鼠（WKY大鼠）饲喂高剂量大豆低聚肽）、阴性对照组（自发性高血压大鼠（SHR大鼠））、阳性对照组（SHR大鼠饲喂卡托普利）和低、中、高剂量组（SHR大鼠饲喂0.90、1.80、4.50 g/kg大豆低聚肽）,喂养30 d后,观察大鼠血压、心率、尿蛋白质量、血管紧张素II质量浓度等指标的变化。结果：大豆蛋白最佳酶解条件为：碱性蛋白酶和中性蛋白酶质量分数各0.1%、50 ℃酶解4 h,此条件下10 mg/mL大豆低聚肽ACE活性抑制率达到71.2%。经饲喂不同剂量大豆低聚肽30 d后,WKY大鼠血压变化不显著（P＞0.05）,SHR大鼠血压有下降趋势;饲喂高剂量大豆低聚肽在第4周时可以显著降低SHR大鼠血压和血管紧张素II质量浓度（P＜0.05）,但对于大鼠心率和尿蛋白质量无显著影响（P＞0.05）。结论：体外实验证明,与大豆蛋白相比,大豆低聚肽对于ACE活性的抑制效果更好;体内实验证明大豆低聚肽可以降低SHR大鼠的血压和血管紧张素II质量浓度,且对正常大鼠血压无明显影响,推测大豆低聚肽通过抑制ACE活性的方式发挥降压功效。     

分步酶解法制备黄浆水活性肽

黄浆水是传统豆制品点脑成型过程压榨出的废弃物,富含低聚糖、蛋白质等营养成分。该研究通过比较酶种类及用量、酶解温度、酶解时间对黄浆水蛋白质水解度的影响,采用正交试验优化获得黄浆水短肽最佳分步酶解工艺：（1）酸性蛋白酶加酶量2 000 U/g,pH 4.0,温度55 ℃,水解2 h;（2）中性蛋白酶8 000 U/g,pH 6.0,温度50 ℃,水解6 h。在此条件下进行验证,水解度可达25.95%,血管紧张素转化酶体外抑制活性达92.0%。采用酸性蛋白酶和中性蛋白酶分步酶解黄浆水制备短肽,制备条件温和,水解度高,可为豆制品加工废弃物的高值化利用奠定基础。     

富硒大豆低聚肽的制备及其抗疲劳功能的研究

为探究富硒大豆低聚肽对抗运动性疲劳的影响,实验以富硒大豆为原料制备大豆分离蛋白,并以超滤萃取辅助中性蛋白酶和风味蛋白酶双酶酶解法制取富硒大豆低聚肽,并通过ICP-MS对硒含量进行鉴定,最后通过小鼠运动性疲劳实验综合评估富硒大豆低聚肽的抗疲劳活性。结果显示：富硒大豆低聚肽的总硒含量为90.03±3.23 mg/kg,主要形态为硒代蛋氨酸、硒代半胱氨酸。在运动性疲劳小鼠模型下,四组剂量组均能够延长小鼠负重力竭游泳时长,其中富硒大豆低聚肽高剂量组时间最长约为37.47±1.33 min,同时,血清生化指标显示小鼠的SOD酶、GSH-Px酶活性相较于模型组显著提高(P<0.05),MDA含量显著降低,肌糖原与肝糖原含量提高。综上,表明富硒大豆低聚肽对小鼠抗运动性疲劳具有积极作用,在100mg/kg.bw.d剂量组下抗疲劳效果显著。     

功能性短肽的分类及其酶解制备方法

近年来,蛋白质中功能性短肽的营养、功能性、生理活性和其应用价值越来越引起人们的关注。功能性短肽来源广泛,通过合适的蛋白酶酶解得到的功能性短肽,具有诸如降血压、提高免疫力、促进消化、抗氧化、神经调节和抗菌等生物活性。本文综述了功能性短肽的来源和分类,讨论了植物蛋白源短肽和动物蛋白源短肽的特点,通过选择蛋白酶和优化酶解条件分析了酶解制备短肽的方法,为开发和深入研究功能性短肽产品提供理论依据。     

大豆蛋白与大豆低聚肽对负氮平衡老年小鼠表皮创伤感染下的免疫调节作用

目的：探讨大豆蛋白与大豆低聚肽对负氮平衡老年小鼠在金黄色葡萄球菌表皮创伤感染下的免疫调节 及炎症抑制的影响。方法：实验设空白组（正氮平衡）、模型组（负氮平衡）、蛋白组（负氮平衡灌胃大豆蛋 白）、低聚肽组（负氮平衡灌胃大豆低聚肽）,其中,蛋白组与低聚肽组灌胃液体总含氮量相等,以体质量计 为650 mg/kg。经过背部表皮创伤感染金黄色葡萄球菌后灌胃,观察大豆蛋白与大豆低聚肽对小鼠体液免疫水 平、炎症抑制水平、股直肌质量等的影响。结果：低蛋白饲料喂养能显著降低小鼠体质量、氮摄入量及血清总 蛋白质量浓度（P＜0.05）,大豆蛋白与大豆低聚肽能显著提高小鼠血清免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）M、 IgG及IgA质量浓度（P＜0.05）,显著降低巨噬细胞炎性、RANTES质量浓度（P＜0.05）,可降低炎症因子白细胞 介素（inter leukin,IL）-1β、IL-6和TNF-α质量浓度,差异不显著,能显著提高股直肌湿质量与体质量 比（P＜0.05）,大豆低聚肽与大豆蛋白相比,可显著提高IgG质量浓度,显著降低蛋白-2质量浓度。结论：大豆蛋 白与大豆低聚肽对体液免疫功能有显著的提高作用,对炎症反应有一定抑制作用,对肌肉萎缩有一定恢复作用,大 豆低聚肽较大豆蛋白对体液免疫功能的提高以及早期炎症抑制作用更加显著。     

高收率低苦味值大豆低聚肽的制备

以大豆分离蛋白为原料,以酶解收率为指标对最优的酶解工艺进行研究。在单酶水解的基础上,用复合碱性蛋白酶,中性蛋白酶,胰蛋白酶进行水解,通过正交试验确定了复合酶的最佳水解条件为:碱性蛋白酶/中性蛋白酶/胰蛋白酶加酶1∶2∶3,温度50℃,酶解时间4.5h,在此最佳条件下,酶解收率为86.76%,大豆低聚肽含量为93.49%,苦味值比单酶水解明显降低。     

几种常见植物蛋白生物活性肽的研究概述

对大豆、大米、小麦、玉米四种植物蛋白的生物活性肽进行了介绍，主要包括：降血压肽、阿片样活性肽、类阿片样拮抗肽、免疫调节肽等。这些活性肽的发现为今后进一步利用植物蛋白资源，生产功能性食品基料或药品提供了一条新途径。