苏云金芽孢杆菌(Bt)生物技术在仓储烟草害虫防治中的作用

根据烟草的类型和起源 ,干烟叶的微生物含量在 10 3～ 10 7CFU(群落形成单位 ) /g之间变化。烟叶上发现 3种微生物 :细菌、酵母和真菌。PhilipMorris欧洲实验室的工作表明 ,将收获后的烟叶进行热处理和干燥 ,几乎只能选出有抗性的形成孢子的杆菌属革兰氏阳性菌。干烟叶上的优势种是短小芽孢杆菌、枯草杆菌、巨芽孢杆菌和地衣型芽孢杆菌。其他杆菌 ,如短杆菌、环状芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、强固芽孢杆菌、凝固芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌 ,也能以较低的频率检测到。这种细菌种群绝大多数是由休眠孢子组成的。非病原性附生细菌的利用 ,表明有机会在寄主植物叶片上目标性地使用生物杀真菌剂和生物杀虫剂。苏云金芽孢杆菌是一种在产孢期产生杀虫结晶蛋白 (ICP)的细菌 ,用于防治食植性害虫。尽管苏云金芽孢杆菌主要是存在于土壤中 ,但近来已从各种叶表面上分离出这种细菌的不同菌株 ,表明可以认为该菌是许多植物叶面微生物的一部分。我们已从复烤烟叶上分离出大量对烟草甲虫 [Lasiodermaserricorne(F .) ;鞘翅目 :窃蠹科 ]这种分布最广和危害最大的仓储烟草害虫的幼虫有杀虫活力的苏云金芽孢杆菌     

苏云金芽孢杆菌对大曲害虫大谷盗的毒杀效果研究

采用苏云金杆菌防治大曲害虫,研究结果表明:在30℃条件下,苏云金芽孢杆菌液体制剂达到0.004mL/g的剂量,可使大谷盗毒的校正死亡率达91.8%,且杀虫后大曲的糖化力、发酵力、微生物的数量变化极小.     

苏云金芽孢杆菌对酒曲害虫黑菌虫的毒杀效果研究

利用生物杀虫剂苏云金杆菌防治大曲害虫,具有高效性、安全性、经济性、科学性等优点.研究结果表明:在30℃条件下,苏云金芽孢杆菌液体制剂达到0.10mL/g的剂量时,可使黑菌虫的校正死亡率达100%,且杀虫后大曲的糖化力、发酵力、微生物的数量变化极小.     

苏云金杆菌杀虫剂对土耳其扁谷盗毒杀效果的研究

苏云金杆菌芽孢杆菌能产生对害虫有毒杀作用的晶体蛋白。土耳其扁谷盗是危害大曲的主要酒曲害虫。研究结果表明，苏云金芽孢杆菌干粉制荆和磷化铝以1．0mg／L：0．006mg／L、液体制剂以0．5mL／L：0．004mg／L混合，在30℃条件下能杀死土耳其扁谷盗。该法具有降低虫害损失，保护环境的优点。     

贮烟仓库中苏云金芽孢杆菌对烟草甲的杀灭活性

为研究苏云金芽孢杆菌(Bt)防治贮烟害虫的可行性,从全国7个主要卷烟厂的不同贮烟仓库中采集到不同类型的样品521份,采用醋酸钠抑制选择法从其中的225份样品中分离获得Bt952株,其分布率为100%,检出率为43.19%,用其中600株的发酵液对2~3龄烟草甲幼虫进行了初步毒力测定。结果表明,有18株分离株对烟草甲幼虫具有较高的生物活性,药后9d烟草甲幼虫的校正死亡率均达73%以上。     

化学药剂与苏云金杆菌综合防治法对大曲质量的影响研究

苏云金芽孢杆菌能产生对害虫有专一性毒杀作用的晶体蛋白,具有对人类健康和环境安全的优点。土耳其扁谷盗是危害大曲的主要酒曲害虫。研究结果表明:苏云金芽孢杆菌杀虫剂和磷化铝以0.4ml/L:0.006mg/L混合,在30℃条件下能杀死土耳其扁谷盗,且杀虫后大曲的糖化力、发酵力、微生物的数量变化极小。     

7种杀虫剂对斑须蝽及烟青虫防效的试验

定期选择杀虫剂进行防效试验研究,既是科学检测市售药剂质量的有效方法之一,也是指导烟农在烟草害虫防治中科学合理用药,提高环境保护意识及防治水平的有效手段.研究结果表明,供试的7种杀虫剂对斑须蝽、烟青虫均有良好防效.当地只要用药适时,在常规用量下即可达到一次性施药,兼治两种或多种害虫的目的.同时亦表明苏云金杆菌制剂灭蛾灵和特异性杀虫剂IKI-7899(又名抑太保、定虫隆)较之化学农药具有同等杀虫效果,在烟草害虫防治中有良好应用前景.     

生物有机肥对烟草青枯病的防效及对土壤细菌群落的影响

烟草青枯病是一种危害严重的土传性病害,为了防治烟草青枯病,筛选了3株拮抗青枯雷尔氏菌的芽孢杆菌（甲基营养型芽孢杆菌JK3、枯草芽孢杆菌JK4和解淀粉芽孢杆菌JK10）,将其发酵液添加到有机肥中,经二次发酵后获得生物有机肥（SF2、SF4）,施入烟田。结果表明,生物有机肥能较好地防治烟草青枯病,同时促进烟株的生长,SF2、SF4处理的防效分别为82.18%、68.82%。同时,采用高通量测序技术分析了土壤细菌的群落结构,发现生物有机肥显著影响了土壤细菌的群落结构,促进了土壤中有益菌（如鞘氨醇单胞菌属、类芽孢杆菌属、耐热芽孢杆菌、梭菌属等）的增殖。芽孢杆菌和链霉菌的数量也明显增加,推测链霉菌和芽孢杆菌可抑制青枯雷尔氏菌的繁殖,进而控制烟草青枯病的发生。施用添加拮抗芽孢杆菌的生物有机肥是防治烟草青枯病的一项有效措施。     

我国复烤烟叶苏云金杆菌的分离及杀虫特性测定

采用4%NaCl培养基选择分离法,从我国10个烟区采集的801个复烤烟样中,分离出苏云金芽孢杆菌736株.分离出的Bt菌经PCR毒素蛋白基因鉴定,其中含cry Ⅰ毒素蛋白基因的Bt菌有7株,出菌率为0.95%;含cryⅤ毒素蛋白基因的Bt菌21株,出菌率为2.85%;没有含cryⅢ毒素蛋白基因的Bt菌.对含毒蛋白基因cry Ⅰ或cryⅤ的28个Bt菌株用二龄烟草甲虫进行生物毒力测定,试验后9 d有18个Bt菌株生物毒力测定校正死亡率均超过80%;试验后12 d有9个Bt菌株生物毒力测定校正死亡率均超过95%.可见,用苏云金芽孢杆菌防治烟叶仓贮害虫是有潜力的.     

烟草根际固氮菌的筛选、鉴定及优化培养

对四川广元烟草主产区三个种植基地的烟草根际固氮菌进行筛选, 分离出28 株具有固氮活性的菌株。 经扩增rDNA 限制性酶切片段分析法(ARDRA) 初步分类, 共获得5 个操作分类单元(OTU), 并由16S rDNA 序列进行了分析鉴定。结果表明不同分类单元分别是:苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和炭疽杆菌。优化了N7 菌株(巨大芽孢杆菌) 培养条件, 确定其最佳碳源为蔗糖, 最适宜初始pH 值为7.5, 最适温度为30℃。      

苏云金芽孢杆菌防治法对大曲质量的影响

对苏云金杆菌防治大曲害虫过程的杀虫效果与大曲质量影响进行了研究。结果表明，利用苏云金杆菌毒杀大曲害虫，大曲的糖化力、液化力、发酵力与试验前相比略有下降，分别为7．8％，11．6％，8．0％；而对照组与试验前相比，3个指标明显下降了31．2％，29．2％，40．4％；对微生物的影响甚微。     

防腐剂复配对苏云金芽孢杆菌抑菌效果研究

目的 获得最佳的复配防腐剂抑制苏云金芽孢杆菌效果.方法 选择不同的防腐剂,通过药敏纸片法、最小抑菌浓度(MIC)法测定苏云金芽孢杆菌对其敏感性,利用正交设计筛选最佳防腐剂组合,并对获得的最佳防腐剂组合抑菌效果进行验证.结果 苏云金芽孢杆菌对乳酸链球菌素、聚赖氨酸、尼泊金乙酯较为敏感,其MIC分别为0.01、0.078和0.039 mg/ml,但是对乳酸钠、山梨酸钾不敏感.正交试验结果表明,当乳酸链球菌素、聚赖氨酸和尼泊金乙酯浓度分别为0.313、0.039和0.25 mg/ml时效果最佳,可使基质中苏云金芽孢杆菌降低2.35个数量级.结论 选择这一最佳组合在室温( 25℃)条件下,猕猴桃汁、里脊肉糜、牛乳中细菌数在4d时分别增长1.61、2.95、2.16个数量级;在0～4℃贮藏5d时分别增长1.24、0.94、0.14个数量级.     

松萝酸的抑菌作用研究

研究松萝酸对金黄色葡萄球菌、短链芽孢杆菌、枯草芽胞杆菌、苏云金杆菌、大肠杆菌的抑菌作用,并将其抑菌效果与苯甲酸和山梨酸对比。结果表明,松萝酸的抑菌效果强于苯甲酸和山梨酸;对苏云金杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽杆菌、短链芽孢杆菌、大肠杆菌的最小抑制浓度分别为0.500、0.557、0.557、0.525、1.76mg/ml,对它们的抑菌能力由大到小为：金黄色葡萄球菌＞短链芽孢杆菌＞枯草芽孢杆菌＞苏云金杆菌＞大肠杆菌。     

不同芽孢杆菌对烟株根际土壤细菌群落及根结线虫防控效果的影响

为筛选出可有效防治烟草根结线虫的微生物菌剂,选用3株不同种类的芽孢杆菌（B3蜡样芽孢杆菌、B9蜡样芽孢杆菌和S2蕈状芽孢杆菌）微生物菌剂施于烟田,利用宏基因组测序技术分析了不同芽孢杆菌对烟株根际土壤细菌群落的影响及其对根结线虫的防控效果。结果表明,芽孢杆菌可增加土壤中细菌种数,且施用B3蜡样芽孢杆菌的土壤中细菌种数最多。相比施用清水（对照）,B3蜡样芽孢杆菌能增加土壤中有益菌门硝化螺旋菌门（Nitrospirae）、有益菌属贪噬菌属（Variovorax）和罗思河小杆菌属（Rhodanobacter）的丰度,B9蜡样芽孢杆菌能增加有益菌属亚硝化螺菌属（Nitrosospira）的丰度,S2蕈状芽孢杆菌能增加有益菌属红假单胞菌属（Rhodopseudomonas）、中慢生根瘤菌属（Mesorhizobium）的丰度。假单胞菌科（Pseudomonadaceae）对根结线虫的防治有益,且在B3蜡样芽孢杆菌处理中其丰度显著高于对照。3种芽孢杆菌对烟株根结线虫病害均有一定的防治效果,但B3蜡样芽孢杆菌的效果最好。      

烟草VA菌根研究进展

综述了烟草VA菌根真菌资源 ,VA菌根真菌对烟草病虫害的影响、作用机理及在烟草防虫防病中的应用。     

餐厨垃圾原位处理菌株的筛选和鉴定

按照产酶能力强、菌株间无拮抗性的原则,从本实验室27株菌中筛选到2株淀粉酶产生菌;苏云金芽孢杆（Bacillus thuringiensis、TKFW r8）和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis、TKFW 10004）,2株蛋白酶产生菌;蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereu. frankland 、TWKF 11014）和纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto、TWKF 11002）。将该4株菌与植物乳酸菌(Lactobacillus plantarum、TWKF 12006)和酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae Hansen、TKFW 13024）等比例组合,试验结果表明处理后的餐厨垃圾没有恶味,蚊虫较少,具有淡淡的酒香味,能够抑制病原微生物的生长,具有一定的减量效果。为了保证菌株的生物安全性,对未知菌TKFW r8进行观察和鉴定,通过16S rDNA序列分析,确定为苏云金芽孢杆菌。     

烟草青枯病拮抗菌在有机肥中的定殖效率及田间防治效果

为有效防治青枯病,采用多种拮抗菌复配菌剂添加至生物有机肥,施用于烟田,研究其对烟田土壤中有益微生物、病原微生物的影响及对青枯病的控制效果。结果显示,30%茶枯+70%烟草秸秆粉碎物（生物有机肥C）中添加的拮抗菌有较好的定殖率,枯草芽胞杆菌JK-4、解淀粉芽胞杆菌JK-10菌株在生物有机肥C中的定殖率分别达到了945.7%、1970%,链霉菌LC-7菌株在生物有机肥C中定殖率达到496.7%,同时其防治青枯病的效果最好,在烟草旺长期防治效果达到57.40%,在青枯病发病高峰期防治效果为37.11%。     

海南雪茄烟叶霉变微生物鉴定及拮抗菌株筛选

为明确引起海南雪茄烟叶霉变的微生物种类并筛选其拮抗菌株防治烟叶霉变,分别从海南霉变雪茄烟叶表面分离、纯化得到霉变微生物和拮抗微生物,采用形态学和分子生物学相结合的方法鉴定微生物种类。鉴定和筛选结果表明,引起海南雪茄烟叶霉变的微生物主要为篮状菌属、帚霉属和曲霉属,得到3株霉变菌株分别为Talaromyces funiculosus、Scopulariopsis brevicaulis和Aspergillus occultus。筛选到2株拮抗效果良好的拮抗菌株,分别为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和耐盐芽孢杆菌（Bacillus halotolerans）。引起海南雪茄烟叶霉变的微生物主要为篮状菌属、帚霉属和曲霉属菌株,筛选到的2株芽孢杆菌对致霉菌有良好的拮抗作用,为雪茄烟叶霉变的防治提供了参考。      

烟草黑胫病不同植物源生防菌的筛选及防效测定

植物内生菌是生防菌剂的宝贵资源,在作物病害生物防治中具有重要作用。本文采用稀释平板法从8种不同植物茎组织中分离内生菌,采用二次平板对峙法筛选拮抗菌,通过形态观察、生理生化反应及16S rDNA分析鉴定菌种,利用盆栽和田间试验检验其生防防效,并测定其促生作用。结果表明:分离出内生菌共89株,其中烟草疫霉菌拮抗效果较好的菌株6株,分别为J11、J21（构树）,T3、T23（马铃薯）,G3（枸杞）和KY（烟草）。KY被鉴定为亚麻假单胞菌（Pseudomonas lini）,J11、G3和T3为蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）,T23为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）,J21为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。KY、T23及J11的相对防效较好,盆栽相对防效分别为75.41%、63.93%、70.49%,大田相对防效分别为63.62%、51.11%、52.67%,且对烟株的株高、茎围均有促生作用。