超高效液相色谱法(UPLC)测定猪肉中9种生物胺含量

目的:建立了超高效液相色谱法(UPLC)测定猪肉中色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、章鱼胺、酪胺、亚精胺、精胺含量的方法,并对该检测方法进行优化。方法:样品用5% TCA提取,经丹磺酰氯衍生后,采用C₁₈(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色谱柱;以乙腈-10 mmol/L乙酸铵为流动相;流速:0.3 mL/min;检测波长为245 nm,柱温:35 ℃;进样量3.0 μL。结果:在该色谱条件下,9种生物胺在5.0~100.0 μg/mL范围内呈良好的线性关系,r≥0.999,最低检测限为0.028~0.29 mg/kg;仪器精密度较好,RSD(n=6)≤3.72%,其平均回收率为 70.70%~111.80%。结论:所建立的方法灵敏、准确、简便、重现性好,出峰时间短,对于批量快速准确检测猪肉中生物胺具有很好的应用前景。     

毛细管电泳-电化学发光法测定腐胺与亚精胺

基于葡萄酒发酵产生的生物胺会影响人的健康,且腐胺与亚精胺均可明显增强三联吡啶钌[Ru(bpy)32+]的电化学发光强度,建立一种以直径500μm的Pt盘为工作电极的毛细管电泳-电化学发光法测定腐胺与亚精胺含量的分析方法;该方法具有灵敏度高、线性范围广、分离效率高、分析速度快等特点。实验获得的优化条件为,检测电位:1.15 V;Ru(bpy)32+浓度5 mmol/L(pH=9.5);进样时间10 s;进样高压10 kV;运行高压:13 kV;运行缓冲液:pH9.5050 mmol/L磷酸盐缓冲溶液。结果表明:在最优条件下,腐胺在0.1 mmol/L～4 mmol/L浓度范围内与发光强度呈良好的线性关系,相关系数为0.994 9,检出限为(S/N=3)为0.1 mmol/L;亚精胺在0.05 mmol/L～2 mmol/L浓度范围内与发光强度呈良好的线性关系,相关系数为0.992 5,检出限为(S/N=3)为0.05 mmol/L。用该方法对葡萄酒样品中的腐胺与亚精胺进行了平行测定,其中亚精胺的迁移时间和峰高的相对标准偏差(RSD)分别为0.13%和7.29%,样品中没有腐胺。     

毛细管电泳-电化学发光联用分离检测水产品中的组胺和亚精胺

基于生物胺类物质对三联吡啶钌([Ru(bpy)32+])的电化学发光性有显著的增敏作用,建立1种新型毛细管电泳-电化学发光联用分离检测生物胺的方法。以[Ru(bpy)32+]的电化学发光信号为基础,重点考察检测池条件。结果表明,最佳条件是:检测电位1.15 V,[Ru(bpy)32+],浓度5 mmol/L(p H 7.00),进样时间10 s,进样电压13k V,运行缓冲液为p H 7.00的50 mmol/L磷酸盐缓冲液。在最优条件下,二盐酸组胺标准品在1~100μmol/L浓度范围内的电化学强度与组胺浓度呈良好的线性关系,线性方程为I=150.78c+44.54,相关系数r=0.9975(n=5),检出限(S/N=3)为0.496μmol/L;亚精胺标准品在1.5~7.5μmol/L浓度范围内电化学发光强度与亚精胺浓度呈良好的线性范围,线性方程I=6 426.7c+4.72,相关系数r=0.9978(n=5),检出限(S/N=3)为0.6μmol/L。在最优条件下测定样品中的组胺和亚精胺,结果均未检测到组胺。青蛾中亚精胺峰高和迁移时间的RSD值分别为0.83%和1.58%,加标回收率115.14%~118.02%;花蛤中亚精胺峰高和迁移时间的相对标准偏差(RSD)值分别为0.48%和1.67%,加标回收率108.82%~112.34%;海瓜子中亚精胺峰高和迁移时间的相对标准偏差(RSD)值分别为2.03%和1.82%,加标回收率107.26%~119.50%。     

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定水果中高氯酸盐

目的 建立一种测定水果中高氯酸盐的超高效液相色谱-串联质谱的分析方法。方法 水果经乙腈-水(1:1, V:V)提取, C18和GCB净化后, Waters Torus DEA色谱柱(2.1×100 mm, 1.7 μm)色谱分离, 0.9%(v/v)甲酸乙腈- 50mmol/L甲酸铵(pH 2.9)溶液进行梯度洗脱, 电喷雾负离子模式下, 多反应监测(MRM)方式进行测定, 内标法定量。结果 实验表明, 高氯酸盐在0.5~20 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系, 相关系数r=0.9987, 方法检出限为0.8 μg/kg, 定量限为2.5 μg/kg。在浓度分别为10、20、100 μg/kg加标水平下, 高氯酸盐的回收率范围为87.7%~102%, 相对标准偏差小于6.1%。结论 该方法简单快捷、准确可靠, 适用于水果中高氯酸盐的测定。     

水产品中腐胺和亚精胺的快速分离与检测

基于腐胺、亚精胺能够与Ru(bpy)32+发生电化学反应,显著增强Ru(bpy)32+的发光强度,通过毛细管电泳-电化学发光联用,对水产品中的腐胺和亚精胺进行快速分离检测。经试验得到最优条件:检测电位1.15 V;Ru(bpy)32+浓度5 mmol/L(溶于p H 7.50磷酸盐缓冲液);运行高压16 k V;进样电压10 k V,进样时间10 s;运行缓冲液使用p H 7.00,50 mmol/L磷酸盐缓冲液。在此条件下,5×10-5~1×10-2mg/L的腐胺标准品浓度与发光强度呈良好的线性关系,线性方程为I=57.524c+292.88,相关系数r=0.9888(n=5),最低检出限(S/N=3)为1×10-7mg/L。1×10-5~1×10-3mg/L的亚精胺标准品浓度与发光强度呈良好的线性关系,线性方程I=7 581.2c+1 155.6,相关系数r=0.9967(n=5),最低检出限(S/N=3)为1×10-8 mg/L。在最优条件下对样品中腐胺、亚精胺进行分离、检测,4种样品中均未发现亚精胺,沙丁鱼、巴浪鱼中未发现腐胺。带鱼中腐胺的峰高、迁移时间的相对标准偏差分别为2.35%,0.71%,加标回收率,102.76%~103.2%;秋刀鱼中腐胺的峰高、迁移时间的相对标准偏差分别为3.41%,0.52%,加标回收率96.1%~117.76%。     

过氧化氢-茚三酮体系荧光光度法检测食品中的焦磷酸盐

摄入过多的焦磷酸盐会对人体健康产生严重影响，因此控制食品中焦磷酸盐的含量十分重要。在酸性介质中，Cu2+能催化过氧化氢-茚三酮体系间的氧化-还原反应而产生较强的荧光。当在该体系中加入少量焦磷酸盐后，Cu2+-H2O₂-茚三酮体系的荧光强度显著减弱。基于此，建立一种荧光光度法检测焦磷酸盐含量。考察过氧化氢浓度、茚三酮浓度、Cu2+浓度、反应时间及反应温度等条件对荧光强度的影响。结果表明，最优条件为过氧化氢浓度3.0×10-5 mol/L，茚三酮浓度2.0×10-3 mol/L，Cu2+浓度6.0×10-5 mol/L，反应时间40 min，反应温度30 ℃，在此条件下，减弱的荧光强度与焦磷酸盐浓度在3.0×10-7～8.0×10-6 mol/L范围内的对数值呈良好的线性相关。方法的检出限与相对标准偏差(RSD)分别为3.2×10-8 mol/L，4.9%(C=1.0×10-6 mol/L，n=11)。采用该方法测定虾仁与带鱼样品中焦磷酸盐含量并做加标回收试验，平均回收率在93.00%～97.80%范围，表明该方法可用于实际食品样品中焦磷酸盐含量的准确检测。     

流动注射-化学发光法测定双氧水的分解率

在铁氰化钾-亚铁氰化钾存在的氢氧化钠碱性介质中,双氧水可氧化鲁米诺产生化学发光,结合流动注射技术,建立了一种测定双氧水漂白过程中双氧水分解率的新方法.该方法测定双氧水的检出限为1.75×10~(-5)mol/L,线性范围为2.1×10~(-5)～1.7×10~(-2)mol/L.相对标准偏差为2.9％(5.8×10~(-3)mol/L,n=11).     

毛细管电泳-电化学检测测定荞麦中表儿茶素、芦丁、槲皮素的含量

用毛细管电泳-电化学检测的方法研究了荞麦中黄酮类物质:表儿茶素、芦丁、槲皮素的含量,研究了电极电位、缓冲液的pH值、分离电压及进样时间对电泳的影响,得到优化的测定条件。以直径为300μm的碳圆盘电极为检测电极,工作电极电位为0.95V(vs.SCE),在50mmol/L硼砂(pH8.5)运行缓冲液中,上述3组分在12min内完全分离。表儿茶素、芦丁、槲皮素线性范围分别为5×10-7￣1×10-4g/mL、1×10-6￣1×10-4g/mL、1×10-6￣1×10-4g/mL;检出限分别为1.83×10-7g/mL、2.9×10-8g/mL、1.00×10-7g/mL;3种标样7次平行进样的相对标准偏差(RSD)小于2.5%;回收率表儿茶素100.4%、芦丁98.1%、槲皮素100.1%(n=3)。该法灵敏可靠,结果令人满意。     

萃取光度法测定制革废水总铬含量

在含氯离子的酸性溶液中,用醋酸戊酯萃取二甲基吲哚二羰花青(DIDC)染料与Cr(Ⅵ)配合物,从而建立一种新的测定Cr(Ⅵ)的方法。结果表明:在3.5~5.0mol/L的HCl介质中,醋酸戊酯对配合物的萃取率最高;最大吸收波长为640nm;摩尔吸光系数为3.6×105L·mol-1·cm-1,检出限为2.0×10-3mg/L,有色溶液的吸光度与Cr(Ⅵ)含量在0·01~2.1mg/L范围内符合比尔定律,加标回收率为96.8%~104.5%(n=6),Cr(Ⅵ)∶Cl-∶DIDC的摩尔比为1∶1∶1。本法较为准确地测定了制革废水中的总铬含量。     

促进龙胆紫褪色光度法测定饲料中牛磺酸含量

根据牛磺酸具有促进高碘酸钾氧化龙胆紫褪色的原理,考察酸度、高碘酸钾用量、龙胆紫用量、温度和时间对反应的影响,建立分光光度法测定饲料中牛磺酸的新方法。结果表明:最佳反应条件为在10 ml比色管中加入pH1.99盐酸 乙酸钠缓冲溶液1.0 ml、2.5×10-3 mol/L高碘酸钾溶液1.0 ml和2.5×10-4 mol/L龙胆紫溶液1.0 ml,室温下反应11 min。在波长570 nm处,吸光度减小值与牛磺酸质量浓度在0~0.25 μg/ml范围内呈良好的线性关系,表观摩尔吸光系数为3.88×105L/（mol·cm）,检出限为1.91 μg/L;结合超声波提取和离子交换法预分离技术,采用牛磺酸促进高碘酸钾氧化龙胆紫褪色光度法测定饲料中牛磺酸含量,结果与高效液相色谱法一致,标准偏差为0.82%~1.29%(n=5),回收率为98.6%~101.9%。     

银掺杂甘氨酸膜电极对食品中V_C的选择性测定

利用循环伏安法(CV)制备了薄而稳定的银和甘氨酸聚合物膜修饰电极,研究了VC在此电极上的电化学行为,建立了循环伏安法测定食品中VC的新方法。银和甘氨酸复合膜修饰电极对VC的电化学氧化具有明显的催化作用。在pH 5.0磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,氧化峰电流(ipa)与其浓度(c)在1.6×10-6～3.0×10-3mol/L内呈良好的线性关系,线性方程为:ipa=-8.48×10-7+0.023 c(mol/L),相关系数为0.999 9;检出限为1.2×10-7mol/L。银掺杂甘氨酸膜电极可以消除食品中一些共存物质如VA、柠檬酸和苹果酸等的干扰,修饰电极具有良好的灵敏度、选择性和稳定性,试验中用于辣椒中VC的测定,结果满意。     

基于石墨烯构建的电化学传感器测定抗坏血酸

制备石墨烯修饰电极建立电化学方法实现对抗坏血酸的测定。采用电化学还原技术,通过一步电沉积制备石墨烯修饰玻碳电极(ERGO/GCE),并用循环伏安法研究抗坏血酸(ascorbicacid,AA)在该修饰电极上的电化学行为,结果表明,所制备的石墨烯修饰电极较裸玻碳电极对抗坏血酸有显著的电催化效果。在p H=6.5的磷酸盐缓冲溶液中,AA在-0.4 V～0.8 V扫描电位范围内有1个不可逆的氧化峰出现。在优化的实验条件下,AA的浓度在1.7×10-3 mol/L～2×10-5 mol/L范围内与其氧化峰电流值呈良好的线性关系,相关系数为0.991,最低检出限为9×10-6mol/L(S/N=3)。探究了修饰电极的稳定性、抗干扰性,结果表明电极稳定性良好,抗干扰能力较强。用此修饰电极对橙汁中的AA含量进行检测,加标回收率在97.95%～98.68%之间。用本文建立的电化学方法可用于橙汁中AA的测定,结果比较满意。     

基于石石墨烯的丁酰胆碱酯酶传感器法快速测定水产品中的孔雀石绿

本文以壳聚糖（Chitosan）和石墨烯GS为复合修饰材料,通过交联技术固定化丁酰胆碱酯酶（BuChE）制备了BuChE/CS/GS/GCE纳米酶传感器,建立了一种快速而灵敏测定水产品中孔雀石绿（Malachite Green,MG）的方法。研究了BuChE/CS/GS/GCE纳米酶传感器修饰材料、电解质、固定酶量、抑制时间等对酶传感器响应电流的影响,优化了酶传感器法测定MG的试验条件,结果如下：修饰材料CS与GS之比为1:2、0.10 mol/L的PBS为电解质、pH 7、抑制时间为11 min、酶活是4.0 U/mL。在此条件下,该酶传感器的响应电流与电解质溶液中MG的浓度在1.0×10-7~1.1×10-6 mol/L范围内成线性关系（Ip=-6.97 C MG+22.81,R2=0.9885）,最低检测限为2.80×10-8 mol/L（S/N=3）,加标回收率在96.36%~99.78%。该方法用于水产品中MG的测定具有简捷、灵敏度高、选择性好、稳定性好、重复性好等优点,用于水产品中孔雀石绿的快速检测是可行的。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定小黄花鱼中9种生物胺

为快速检测水产品中精胺、亚精胺、腐胺、尸胺、组胺、色胺、章鱼胺、酪胺、2-苯乙胺9种生物胺含量,本研究以小黄花鱼为基质,优化了流动相组成和样品提取溶剂,建立了超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱同时检测方法。样品经0.1%三氯乙酸水溶液重复提取两遍,合并上清液过0.22 μm聚四氟乙烯滤膜。以HSS T3为色谱柱,流动相A为0.1%甲酸乙腈,流动相B为10 mmol/L甲酸铵水溶液含0.2%甲酸,在电喷雾正离子电离、多反应监测模式下,9种生物胺在4 min内得到分离。根据响应强度不同,9种生物胺分成酪胺、2-苯乙胺,腐胺、尸胺、组胺、色胺、章鱼胺,精胺、亚精胺三组,以1:5:25浓度比配制多浓度混合标准中间液。该方法对三组生物胺的线性范围分别为1~40 ng/mL、5~200 ng/mL和25~1000 ng/mL;方法定量限依次为0.01、0.05和0.25 mg/kg。低、中、高三个浓度水平加标回收率分别为81.7%~111.2%、80.0%~110.3%、80.0%~99.0%;精密度（n=6）依次为1.7%~7.3%、1.3%~9.1%、0.7%~4.6%。总体而言,该方法简便、快速,具有良好的灵敏度、回收率和精密度,适用于小黄花鱼中生物胺的测定。     

高效液相色谱法检测富硒酵母中的硒代蛋氨酸

建立了高效液相色谱法测定富硒酵母中硒代蛋氨酸的分析方法。采用酶解提取法提取富硒酵母样品中的硒代蛋氨酸,丹磺酰氯柱前衍生,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm i.d.,5μm)分离,以10 mmol/L磷酸二氢钠缓冲液(含4%N,N-二甲基甲酰胺,pH=6.55)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,荧光检测(激发波长:320 nm;发射波长:523nm)。硒代蛋氨酸的检出限为(S/N=3)1μg/L,定量限为(S/N=10)5μg/L。在1 mg/L~50 mg/L范围内的线性关系良好(R≥0.999 6)。加标回收率在91.12%~107.83%,方法相对标准偏差<1.2%。本方法具有专属性好,灵敏度高,适用于富硒酵母原料及相关产品中的硒代蛋氨酸的定量测定。     

亲水作用色谱-串联质谱法测定婴幼儿乳粉中的牛磺酸

目的:建立婴幼儿乳粉中牛磺酸直接测定的亲水作用色谱-串联质谱(HILIC-MS/MS)检测方法。方法:样品经提取后,采用乙腈和10 mmol/L甲酸铵(0.05%甲酸)作为流动相进行梯度洗脱,质谱在负离子模式下采用多反应监测(MRM),对牛磺酸进行定量测定。结果:牛磺酸在10~200 ng/mL浓度范围线性关系良好,相关系数r为0.9997,检出限为0.04 mg/kg,回收率在81.2~90.5%之间,相对标准偏差小于4.0%。结论:该方法快速、准确、灵敏度高,可用于婴幼儿乳粉中中牛磺酸的直接测定。     

Simultaneous Determination of 11 Food Additives by Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography

A micellar electrokinetic chromatographic (MEKC) method was developed for simultaneous determination of 11 food additives which are commonly used in beverage, yogurt, and candied fruit samples. An uncoated fused-silica capillary with 50 μm i.d. and 70 cm total length (effective length: 60 cm) was used for the separation. The separation buffer consisted of 20 mmol/L sodium tetraborate, 42 mmol/L boric acid (pH 8.83), and 100 mmol/L sodium deoxycholate. The separation voltage was 23 kV, and the detection wavelength was 214 nm. The limits of detection were in the ranges of 0.25 to 2.5 mg/L. The corrected peak areas (Ac) and the concentrations of the 11 additives showed linear relationships within the ranges of 0.6–400 mg/L with linear correlation coefficients (r) above 0.99. The recoveries ranging from 81.6 to 115.0 % with relative standard deviations (RSDs) all lower than 5 % were obtained, which demonstrated the accuracy of the proposed method. A Food Analysis Performance Assessment Scheme (FAPAS®) proficiency test sample was analyzed. The results showed that the current method with simple sample pretreatment could meet the needs for routine analysis of the 11 additives in beverage, yogurt, and candied fruit samples.     

钛胶柱反相高效液相色谱法测定饮料中的阿斯巴甜

建立基于钛胶柱对无糖可乐中甜味剂阿斯巴甜的高效液相色谱快速测定方法。色谱条件：分离柱为Titania Sachtopore-RP柱(250mm×4.6m,5μm),柱温70℃,流动相为V[15mmol/L磷酸铵缓冲溶液,(NH4)2HPO4:NH4H2PO4＝6:4;10mmol/L氟化铵]-V(甲醇)＝70:30,流速1mL/min,检测波长217nm。线性范围为10～2500μg/mL,最低检出限为0.08μg/mL,回收率为92.5%～97.4%,相对标准偏差(n＝8)小于0.72%。本法准确度和精密度均可满足饮料中阿斯巴甜的测定要求。     

高效液相色谱法测定酱油中的5-羟甲基糠醛

采用高效液相色谱法测定酱油中5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量.样品经乙酸乙酯提取后,用C18色谱柱分离,以甲醇-水(体积比为5:95)为流动相,在UV 284 nm波长条件下进行检测.该方法快速、准确,在0.5～20 mg/L范围内线性相关系数为r2=0.9992,平均回收率为82.4%～ 86.9%,相对标准偏差为3.2%～5.1%.方法的最低检测浓度为0.1 mg/L.