粗壮脉纹孢菌孢子中β-胡萝卜素的提取优化

研究发现粗壮脉纹孢菌孢子中含有丰富的类胡萝卜素,且β-胡萝卜素占类胡萝卜素含量最高,达到20.08%。试验采用丙酮溶剂从粗壮脉纹孢菌孢子中提取β-胡萝卜素,优化了溶剂浸提温度、浸提时间、料液比3个单因素,并通过响应面法结合HPLC-DAD获得了β-胡萝卜素提取最佳工艺。结果表明,β-胡萝卜素最佳提取条件为:丙酮浸提温度54℃、浸提时间59.2 min、料液比1∶100(g/mL)。在此条件下粗壮脉纹孢菌孢子中β-胡萝卜素提取量最高可达561.082μg/g。按所得最佳工艺进行验证试验,实际粗壮脉纹孢菌孢子中β-胡萝卜素提取量结果为570.168±0.02μg/g,与理论值接近。     

粗壮脉纹孢菌孢子中类胡萝卜素的体外发酵特性

模拟人体消化过程对粗壮脉纹孢菌孢子进行消化,通过酸热法提取消化后孢子粉中的类胡萝卜素,进行体外发酵。采用国标法测定发酵液的产气量、pH、NH3-N,采用气相色谱法测量发酵液中短链脂肪酸的含量。通过16SrRNA高通量测序技术分析志愿者肠道菌群,结果发现消化后的粗壮脉纹孢菌孢子粉中类胡萝卜素经体外发酵,pH值趋于6.0~7.2,与人体肠道pH值接近,产气量较少,不易引起胀气,可产生的乙酸、丙酸、丁酸等有益于人体健康的短链脂肪酸,使拟杆菌减少,变性杆菌增加。粗壮脉纹孢菌孢子粉中类胡萝卜素有利于改善人体肠道菌群,优化肠道菌群中各菌属的比例,有益于人体的肠道健康。     

粗壮脉纹孢菌原生质体的制备、再生及转化的条件

为建立原生质体介导的粗壮脉纹孢菌遗传转化系统,本研究主要考察了复合酶解液、菌龄及酶解时间对粗壮脉纹胞菌原生质体生成及再生的影响。结果表明,粗壮脉纹胞菌孢子悬液接种在马铃薯葡萄糖琼脂（potatodextrose agar,PDA）液体培养基中,30 ℃条件下摇床培养10 h的菌丝,采用0.5 g/100 mL蜗牛酶＋0.5 g/100 mL溶壁酶＋1 g/100 mL纤维素酶的复合酶解液、30 ℃条件下酶解10 h,粗壮脉纹胞菌原生质体生成及再生最为适合。在此条件下,原生质体生成数可达4.53×106 个,38#再生培养基中的再生数可达1.41×106 个,再生率达31.71%,聚乙二醇介导PAKHB载体转化NC原生质体,每微克质粒可获得8 个以上的转化子。     

混菌固态发酵山药皮产类胡萝卜素的工艺研究

以江西瑞昌山药皮为主要发酵原料,采用粗壮脉纹孢菌(Neurospora crassa)和植物乳杆菌(Lactobacillus Plantarum)混合固态发酵生产类胡萝卜素。在单因素实验基础上,选取料液比、发酵时间、植物乳杆菌接种量和粗壮脉纹孢菌接种量四个因素进行L9(34)正交实验,确定最优发酵条件为料液比1∶1,发酵时间60h,植物乳杆菌接种量10%,粗壮脉纹孢菌接种量5%。在此条件下,产类胡萝卜素的量为(179.22±1.44)μg/g培养物。     

粗壮脉纹孢菌固态发酵对菜籽粕营养品质的改善

粗壮脉纹孢菌是一种高产纤维素酶和类胡萝卜素的优良菌株。以粗壮脉纹孢菌固态发酵菜籽粕为对象,研究菜籽粕在发酵过程中蛋白质等营养成分、抗营养因子含量的变化。研究结果表明,随着发酵时间的延长,96 h后粗蛋白含量、可溶性蛋白含量、总氨基酸含量极显著增加(P<0.01),分别提高12.50%,232.52%,724.45%,类胡萝卜素含量由0μg/100 g增加到(64.68±1.42)μg/100g,酸溶性蛋白含量先上升后下降至平稳,24 h达到最高值(25.86±0.05) g/100 g,粗纤维含量、单宁、植酸、硫甙整体呈显著(P<0.05)下降趋势,降解率分别为23.48%,24.98%,10.20%,14.79%。粗壮脉纹孢菌固态发酵菜籽粕可大大改善菜籽粕的营养价值。     

粗壮脉纹孢菌固态发酵产类胡萝卜素的条件优化及其抗氧化活性

通过Plackett-Burman试验设计和响应面法优化粗壮脉纹孢菌固态发酵农副产品产类胡萝卜素的工艺条件,并对类胡萝卜素抗氧化能力进行研究。结果表明,固态发酵农副产品产类胡萝卜素的最佳工艺条件为:米糠、甘薯渣和啤酒糟的添加比例分别以34.25%,45.75%和20%,硫酸铵0.51%,初始含水量72.15%,接种量1%,发酵时间120 h,p H 6.5。在此条件下类胡萝卜素的产量达966.21μg/g培养物。粗壮脉纹孢菌所产类胡萝卜素对DPPH自由基、超氧自由基、羟基自由基均有较强的清除能力,比同浓度的番茄红素、β-胡萝卜素清除自由基能力强。此外,还具有较高的总抗氧化能力和较强的金属螯合能力。本研究为类胡萝卜素的开发利用提供了理论基础。     

粗壮脉纹孢菌发酵豆渣所产类胡萝卜素的研究

通过浓硫酸显色、TLC分析、紫外扫描及高效液相色谱等技术对传统发酵豆渣食品中分离出的目标茵株粗壮脉纹孢茵(Neurospora.crassa)所产类胡萝卜素进行定性及定量检测,结论如下:豆渣经粗壮脉纹孢茵发酵后,类胡萝卜素含量大大增加,且主要为β-胡萝卜素,紫外扫描测得孢子中β-胡萝卜素含量达158.50μg/g孢子,产量为8.06μg/g培养基干重;高效液相色谱检测得含量达140.98μg/g孢子,产量为7.14μg/g培养基干重,两者结论基本一致.     

粗壮脉纹胞菌发酵产类胡萝卜素的研究进展

在归纳整理现有的关于粗壮脉纹胞菌产类胡萝卜素的文献的基础上,论述了粗壮脉纹胞菌产类胡萝卜素的生成途径、途径中涉及到的酶以及相关的基因,同时探讨了国内外已发现的影响粗壮脉纹胞菌产类胡萝卜素的影响因素,最后分析了当前研究中存在的问题,指出了进一步研究的方向。     

粗壮脉纹孢菌发酵稻谷加工副产物生产类胡萝卜素培养基的优化

采用响应面法对粗壮脉纹孢菌发酵稻谷加工副产物(砻糠和脱脂米糠)生产类胡萝卜素的培养基进行了优化。通过Plackett-Burman设计法,研究了脱脂米糠、(NH4)2SO4、KH2PO4、MgSO4、MnSO4、CaCl2等6个因素对粗壮脉纹孢菌产类胡萝卜素的影响,筛选显著影响因素。然后通过响应面法优化发酵培养基组成。研究表明,脱脂米糠和(NH4)2SO4为类胡萝卜素发酵的主要影响因素。得到优化培养基为:脱脂米糠64.58%、砻糠33.85%、(NH4)2SO41.57%。在优化发酵工艺下,色素产量达到366mg/kg培养物。     

粗壮脉纹胞菌复合多菌种发酵茶粕产纤维素酶的研究

用粗壮脉纹胞菌分别复合东方伊莎酵母、里氏木霉、绿色木霉、乳酸杆菌固态发酵已去除茶皂素的茶粕,通过测定发酵产物中3种纤维素酶：外切葡聚糖酶（C1）、内切葡聚糖酶（Cx）、β-葡萄糖苷酶（β-G）及总酶滤纸酶（filter paper activity,FPA）的酶活力来探讨其分解粗纤维素的协同作用。粗壮脉纹胞菌和绿色木霉混合发酵产生的C1酶酶活力较粗壮脉纹胞菌单菌发酵提高了51.09%,粗壮脉纹胞菌和绿色木霉复合发酵较单菌发酵延长了其纤维素酶分泌的周期,96 h时FPA酶活力达到2.782 U/g;粗壮脉纹胞菌复合里氏木霉、绿色木霉混合发酵组在发酵10 d后对茶粕粗纤维的最终降解率分别达到了64.19%和61.59%;接种量对单菌和混合菌发酵产纤维素酶影响总体趋势是随着接种量增加酶活力提高,但粗壮脉纹胞菌单菌发酵纤维素酶酶活力在接种量超过9 mL/100 g后开始下降。表明粗壮脉纹胞菌复合里氏木霉、绿色木霉混合发酵降解纤维素具有协同作用。     

膳食结构对柑橘类胡萝卜素生物利用度和抗氧化活性的影响

为探究不同膳食结构（正常膳食、高蛋白膳食、高脂膳食和高糖膳食）对柑橘类胡萝卜素生物利用度和抗氧化活性的影响,本实验通过模拟体外消化,对柑橘消化过程中类胡萝卜素含量、铁离子还原力、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力和2,2’-联氨-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力等变化进行监测,并进行类胡萝卜素含量和抗氧化活性变化相关性分析。结果显示,随着消化的进行,各膳食结构组中总类胡萝卜素含量及其两种类胡萝卜素单体含量均呈不断下降的趋势,同时各膳食结构组的类胡萝卜素抗氧化能力也显著下降（P<0.05）。4种膳食结构中,高脂膳食组的类胡萝卜素在不同消化阶段均保持较高含量,同时其在不同消化阶段的抗氧化能力也较强。相关性研究发现,柑橘类胡萝卜素的抗氧化活性与其含量之间呈显著正相关（P<0.05）。综合分析可知,膳食结构对柑橘类萝卜素生物利用度和抗氧化活性影响较大,高脂膳食组的类胡萝卜素生物利用度（（24.08±1.78）%）显著高于正常膳食组（（19.26±1.06）%）(P<0.05),其抗氧化活性也最强,高蛋白膳食组的类胡萝卜素生物利用度（（15.27±...     

体外模拟消化液对金钗石斛的作用

采用体外模拟消化液,分别对金钗石斛超微/普通粉、水/醇提物、粗石斛碱和多糖进行实验,探究实 验组模拟消化液中化学成分的变化。实验测定石斛碱、多糖溶出率;运用高效液相色谱、3,5-二硝基水杨酸法 和阴离子色谱对多糖消化产物的分子质量、还原糖质量浓度和单糖组成进行分析;采用液相色谱-质谱联用仪对 多酚类化合物成分进行分析。结果表明：消化组中石斛碱溶出率不断增大,超微粉肠道消化液组溶出率最高达 （21.46±0.52）%,粗石斛碱消化液最低为（8.74±0.50）%;水提物组多糖溶出率高,在口腔和胃消化液中,超 微粉多糖溶出率比普通粉高;肠道消化液中的情况与之相反;多糖在消化过程中分子质量降低,还原糖质量浓度上 升,无单糖检出;多酚类物质的质量浓度普遍在模拟胃液中升高,在模拟肠液中降低。     

破壁灵芝孢子的体外模拟消化特性研究

为探究破壁灵芝孢子在口腔和胃肠道中的消化吸收情况以及对肠道环境的影响。以机械碾压法、微波法和超声法破壁的灵芝孢子（Ganoderma lucidum spore,GLS）为研究对象,经体外模拟人体口腔、胃、小肠消化系统及透析模型,随后将消化后的底物进行体外发酵。测定消化各个阶段的灵芝孢子失质量率、多糖和三萜化合物释放量、生物可接受率和透析率以及小肠消化底物在0、6、12、24、48 h体外发酵过程中pH变化。结果显示,胃和小肠是灵芝孢子的主要消化场所,破壁组平均失质量率达到23.84%,其中机械碾压组更易被消化,其失质量率为29.46%。97%的多糖在胃肠液中溶出,机械碾压组多糖的生物可接受率具有最高水平,为87.33%。三萜只在破壁组小肠模拟消化中有微量溶出,平均约1.50±0.04 mg/g,95.2%的三萜随沉淀进入结肠。体外发酵结果显示,发酵液pH在0~12 h持续下降,并在12 h基本到达发酵终点。对比三种破壁灵芝孢子的消化特性,机械碾压法破壁的品质可观,不失为企业规模化破壁生产的优选。综上所述,破壁有利于提高灵芝孢子的有效成分在人体消化环境内释放量和生物可接受率,促进结肠发酵产酸,有助于调节人体肠道环境。     

不同破壁方法对灵芝孢子粗多糖抗氧化活性的影响

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除法、羟自由基清除法、2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基（2,2’-azinobis(3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnicacid)diammonium salt,ABTS＋·）清除法和铁氰化钾法以及酵母细胞氧化损伤保护模型,分别对未破壁灵芝孢子（unbroken Ganoderma lucidum spore,UGS）、机械法破壁灵芝孢子（mechanically broken Ganoderma lucidum spore,MGS）、生物法与机械法复合破壁的灵芝孢子（biologically and mechanically broken Ganoderma lucidum spore,BGS）提取粗多糖进行体外抗氧化活性评价。结果表明,3 种处理方法的灵芝孢子粗多糖表现出不同的抗氧化活性,且抗氧化活性与多糖质量浓度呈一定效量关系,多糖质量浓度越高,抗氧化活性越强。BGS所得粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、ABTS＋?的清除能力以及还原力在3 种处理方法中均为最强。多糖质量浓度为5.0 mg/mL时,对3 种自由基的清除率分别为84.6%、91.0%、99.9%,还原力为1.09;BGS所得粗多糖对紫外损伤酵母细胞保护能力也相对较强。表明BGS粗多糖具有较高的抗氧化活性。     

Mild thermal treatment and in-vitro digestion of three forms of bovine lactoferrin: Effects on functional properties

In-vitro digestion behaviour of iron saturated (holo)-, native- and iron depleted (apo)- bovine lactoferrin (LF) was studied in simulated oral, gastric and intestinal digestion conditions. All LFs were hydrolysed to <10 kDa peptides; 93% of iron was released from holo-LF within 2 h of gastric digestion. Iron binding ability of all the three LFs was decreased by 80–90% during gastric digestion, while antioxidant activities at the end of gastric digestion were 3–8 times higher than those at the end of oral and intestinal digestion. Antioxidant activity of apo-LF was higher than that of holo-LF after gastric and intestinal digestion. Gastric and intestinal digestion of all the three forms of LF produced negatively charged peptides or amino acids. There were only minor differences among the three forms of LF in terms surface charge, hydrolysis patterns and iron binding/release characteristics between heated and unheated LF samples after gastric digestion.     

五种食用花卉体外模拟消化过程中多酚、黄酮含量及抗氧化活性的变化

目的：为探究五种食用花卉经体外模拟胃肠消化后酚类物质及抗氧化活性的变化规律。方法：以五种可食用花卉(桂花、万寿菊、栀子花、紫玉兰花、木槿花)为研究对象,通过对比消化前、体外模拟胃消化、体外模拟肠消化五种食用花卉多酚、黄酮含量及其体外抗氧化活性变化规律。结果：五种可食用花卉的黄酮、多酚含量及抗氧化活性在模拟胃消化阶段增长不大,而在模拟肠消化阶段呈现出较大的增长趋势。通过整个模拟胃肠消化,多酚增长了127.55%(桂花)～461.70%(万寿菊),黄酮增长幅度为46.50%(玉兰)～218.46%(万寿菊),其中以万寿菊的多酚和黄酮的含量最多,分别达到了(8.95±0.03) mg没食子酸当量(GAE)/g和(83.01±0.01) mg儿茶素当量(CE)/g。三种抗氧化活性中,DPPH自由基清除能力上升了77.0%(木槿)～158.05%(栀子花),铁离子还原能力上升幅度为15.30%(桂花)～163.92%(桅子花),ABTS⁺自由基清除能力增长幅度为142.35%(玉兰花)～274.18%(桅子花)。结论：五种可食用花卉具有较好的生物利用潜力,有望作为天然抗氧化...     

绿茶、橘皮、大豆中酚类物质体外消化前后稳定性及抗氧化活性的研究

本研究以富含3类代表性酚类化合物（黄烷醇、黄烷酮和异黄酮）的3种食物（绿茶、橘皮、大豆）作为原料,模拟其在人体口胃肠中的体外消化过程。采用高效液相色谱-二极管阵列检测器/电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱检测器（HPLC-DAD/ESI-Q-TOF-MS）检测体外消化前后酚类化合物的种类及含量变化,同时测定不同消化阶段总酚含量（TPC）、总黄酮含量（TFC）以及抗氧化活性（DPPH、ABTS、FRAP、ORAC）的变化。结果表明,绿茶提取物中检测出4种酚类化合物（表没食子儿茶素、(+)-儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯）,大豆提取物中检测出4种酚类化合物（大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素）,橘皮提取物中检测出2种酚类化合物（柚皮苷和橙皮苷）;三种食物提取物中,经过体外消化后,绿茶提取物中的酚类化合物最不稳定,除(+)-儿茶素外,其余3种酚类物质几乎降解完全,损失率均达95%以上。绿茶、橘皮、大豆提取物的TPC在胃消化阶段显著升高（P<0.05）,在肠消化阶段显著降低（P<0.05）。绿茶提取物TFC在口腔和胃消化阶段显著升高（P<0.05）,在肠消化阶段显著降低（P<0.05）。橘皮、大豆提取物TFC与TPC变化趋势一致。绿茶提取物的四种抗氧化活性经胃肠消化后呈先升高再降低的趋势。大豆提取液体外消化前后ABTS、FRAP抗氧化活性在口腔阶段显著降低（P<0.05）,DPPH、ORAC抗氧化活性在口腔、胃消化阶段显著升高（P<0.05）,在肠消化阶段显著降低（P<0.05）。橘皮提取液ORAC抗氧化活性在肠消化阶段显著升高（P<0.05）,ABTS、FRAP抗氧化活性在体外消化阶段均表现出和总酚含量变化一致的趋势。