富硒青钱柳多糖对糖尿病模型小鼠血糖、血脂和免疫力的影响

研究富硒青钱柳多糖(selenium polysaccharide from Cyclocarya paliurus(Batal)Ijinskaja,Se-CPP)对糖尿病模型小鼠血糖、血脂和免疫力的影响。高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌霉素建立小鼠糖尿病模型,以生理盐水、青钱柳多糖(Cyclocarya paliurus(Batal)Ijinskaja polysaccharide,CPP)、CPP+亚硒酸钠、亚硒酸钠、Se-CPP低、中、高剂量(0.2、0.6、1.8 g/(kg·d))、消渴丸连续灌胃给药42 d。末次给药后检测小鼠葡萄糖耐量、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)含量、甘油三酯(triglyceride,TG)含量、抗氧化酶活力、免疫器官指数及小鼠脾淋巴细胞转化指数。结果表明:连续给药42 d后,Se-CPP低、中剂量组小鼠血糖、血清TC和TG水平均低于CPP组和CPP+亚硒酸钠组,Se-CPP较CPP具有更好的抗氧化活力和提高糖尿病小鼠免疫力的功效。     

青钱柳活性成分对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量及α-葡萄糖苷酶活性的影响

研究青钱柳多糖（CPP）和青钱柳黄酮（CPF）对胰岛素抵抗的人源肝癌细胞（IR-HepG2）葡萄糖消耗量及α-葡萄糖苷酶活性影响。用高浓度胰岛素诱导培养HepG2细胞,建立IR-HepG2细胞模型,将IR-HepG2细胞分为模型组、CPP高、中、低剂量组、CPF高、中、低剂量组和二甲双胍组,各组以相应药物孵育24 h,采用葡萄糖试剂盒测定细胞葡萄糖消耗量（ΔGC）,MTT法测定单位细胞葡萄糖消耗量（ΔGC/OD）;以阿卡波糖为阳性对照,比较不同浓度梯度的CPP与CPF对α-葡萄糖苷酶活性影响。与模型组比较,阴性对照组、二甲双胍组、CPP组与CPF组细胞?驻GC与ΔGC/OD显著性升高;不同浓度的CPP与CPF对α-葡萄糖苷酶均有抑制作用。提示青钱柳活性提取物降血糖功效与其提高细胞葡萄糖摄取量,抑制α-葡萄糖苷酶活性有关。     

不同产地青钱柳多糖的体外抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性

本研究以清除DPPH自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性能力为指标,初步评价不同产地青钱柳多糖的体外抗氧化及降血糖活性。结果表明:不同产地青钱柳的多糖含量存在显著差异(p<0.05),其中江西修水县青钱柳的多糖含量最高,为5.85%±0.02%,贵州榕江县平阳乡多糖含量最低,为3.50%±0.10%。不同产地青钱柳多糖的DPPH自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)能力及α-葡萄糖苷酶抑制活性有所差异,且与多糖的浓度呈一定剂量关系,即随多糖浓度的增大,多糖的抗氧化及抑制α-葡萄糖苷酶活性能力增强。青钱柳多糖具有良好的体外抗氧化和降血糖活性,可对其进一步开发利用。     

桦褐孔菌纯化多糖体外降血糖活性研究

采用水提醇沉法得到桦褐孔菌发酵粗多糖,将粗多糖过DEAE-52纤维素柱分离纯化得到两种多糖(EIOP1、EIOP2),本文以α-葡萄糖苷酶抑制活性、正常HepG2细胞及胰岛素抵抗HepG2细胞的单位细胞葡萄糖消耗量为主要指标,探究桦褐孔菌两种纯化多糖不同浓度(10、20、40、80、160和320 μg/mL)的降血糖活性,其中α-葡萄糖苷酶抑制活性以阿卡波糖作为阳性对照,葡萄糖消耗实验以二甲双胍作为阳性对照。结果表明,EIOP1、EIOP2的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照组阿卡波糖与粗多糖,IC₅₀值分别为39.18、29.87 μg/mL。EIOP1在浓度为80 μg/mL时,对HepG2细胞的葡萄糖消耗量极显著高于对照组,促进效果最好,比对照组提高了30.62%(P<0.01);EIOP2在浓度在40 μg/mL时,葡萄糖消耗量极显著高于对照组,比对照提高了75.99%(P<0.01);对胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗实验发现EIOP1在浓度为40 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了30.00%,EIOP2在浓度为80 μg/mL时,促进效果最好,比胰岛素抵抗组提高了90.49%,高于Met组(P<0.01)。因此,桦褐孔菌纯化多糖对正常HepG2细胞和胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗均具有促进作用,对α-葡萄糖苷酶的抑制活性显著高于粗多糖。     

绞股蓝内生真菌多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的:探究绞股蓝内生真菌JY25多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为绞股蓝内生真菌多糖的应用提供基础数据。方法:确定4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-N-trophenyl-α-D-glu-copyranoside,PNPG)比色法检测α-葡萄糖苷酶活力的最佳条件,以阿卡波糖为阳性对照,采用优化后的最佳条件测定JY25多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并确定抑制类型、计算抑制常数;以Caco-2细胞作为体外产α-葡萄糖苷酶模型,测定JY25多糖的抑制效果。结果:反应时间30 min、反应温度44℃、pH 6.8、底物(PNPG)浓度5 mmol/L为PNPG比色法的最佳反应条件。以此优化条件进行比色,当JY25多糖质量浓度为6.15 mg/mL时,对α-葡萄糖苷酶抑制率达到最大(68.21%);JY25多糖的半数抑制浓度(IC_(50))为(2.46±0.42)mg/mL,抑制常数Ki为1.15 mg/mL,JY25多糖为竞争性抑制剂。在JY25多糖质量浓度为10.00 mg/mL时,对培养16 d的Caco-2细胞所产α-葡萄糖苷酶的抑制率达到16.48%。结论:体外实验证实JY25多糖具有竞争性抑制α-葡萄糖苷酶的作用。     

黑木耳β-葡聚糖/纳米硒复合物（DNT-Se）的制备工艺优化及活性评价

探索黑木耳β-葡聚糖/纳米硒复合物(DNT-Se)的最佳制备条件，并探究其安全性。以多糖(DNTs)浓度、维生素C(VC)与亚硒酸钠配比、亚硒酸钠浓度、反应时间、反应温度作为实验因素，采用双波长比色法及马尔文粒径测定法表征DNT-Se中Se NPs的粒径变化，以Se NPs的粒径大小为评价指标，采用单因素及正交试验设计的方法考察DNT-Se的制备工艺，并采用CCK-8法评价DNT-Se对293T人胚胎肾细胞和AML-12小鼠正常肝细胞的毒性。DNTs浓度1.0 mg/mL，维生素C与亚硒酸钠配比为6:1，亚硒酸钠浓度为1.0 mg/mL、反应时间12 h、反应温度25℃为制备DNT-Se的最佳条件。该条件下制备的DNT-Se中Se NPs的粒径大小均值为34.50 nm，细胞增殖实验结果表明，DNT-Se对293T人胚胎肾细胞和AML-12小鼠正常肝细胞在200μg/mL时细胞存活率仍高于82%，同时DNT-Se能够抑制HepG2细胞的增殖，在72 h时对HepG2细胞的IC₅₀值为42.54μg/mL。本研究成功确定了DNT-Se的最优制备工艺，所得纳米硒粒径较...     

南方红豆杉多糖的含量测定及体外降血糖活性研究

采用水提醇沉法提取南方红豆杉多糖,硫酸-苯酚法测定多糖含量;采用HepG2细胞和α-葡萄糖苷酶作为体外受体模型,研究南方红豆杉多糖的降血糖效果.结果表明:南方红豆杉药材中多糖的含量为1.75％,无水葡萄糖在1.507～13.563 μg/mL内呈良好线性关系,平均回收率97.54％,RSD为1.60％;以二甲双胍和阿卡波糖作为阳性药,南方红豆杉粗多糖对胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗具有促进作用,对α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制活性,粗多糖抑制活性(IC50 38.61 mg/L)明显高于阳性对照药(IC50 1081.41mg/L),且呈现剂量依赖性.     

枸杞硒多糖的合成及对人体肝癌HepG2细胞增殖的体外抑制作用评价

根据有机硒化合物的合成方法,本文以枸杞多糖和亚硒酸钠为原料,采用响应面法优化枸杞硒多糖的工艺条件。利用原子荧光、体外化学反应等分析技术测定了枸杞硒多糖中的硒含量,并用MTT法对枸杞硒多糖抑制人体肝癌细胞增殖的活性进行了初步评价。结果表明:制备枸杞硒多糖的最优条件是按照LBP为1 g计算,加入0.62 g Na₂SeO₃,用1% HNO₃充分溶解,再加入BaCl₂ 1 g,74 ℃反应9 h。在此条件下,枸杞硒多糖中的硒含量为648.65 μg/g。活性结果显示,枸杞多糖和枸杞硒多糖对HepG2细胞均有一定的抑制作用,所有枸杞硒多糖的抑制作用明显优于枸杞多糖,并且硒含量最高的Se-LBP₄组对肿瘤细胞HepG2的抑制效果最佳,抑制率为38.15%。枸杞硒多糖抑制HepG2增殖能力与其硒的含量呈正相关,有望作为食品、保健食品和医药的原料进一步开发。     

硒对啤酒酵母细胞生长的影响

目的研究不同硒浓度对啤酒酵母细胞生长的影响,确定适宜的硒添加量。方法用分光光度计测定不同硒浓度时酵母细胞培养液在不同时间的吸收度,绘制生长曲线,比较硒浓度不同时酵母细胞的生长情况。结果亚硒酸钠的添加浓度小于20μg/mL时,有促进酵母菌生长的作用;亚硒酸钠浓度高于30μg/mL时,对酵母菌生长有明显的抑制作用;亚硒酸钠浓度在20μg/mL时酵母菌可以正常生长。结论亚硒酸钠的添加浓度应在20μg/mL左右。     

青钱柳抑制α-葡萄糖苷酶有效成分筛选及其对Ⅱ型糖尿病小鼠血糖的影响

研究青钱柳(Cyclocaryapaliurus(Batal.)Ijinskaja)抑制α-葡萄糖苷酶有效成分及其对正常小鼠糖耐量的改善和对Ⅱ型糖尿病小鼠的空腹血糖(FBG)、血清总胆固醇(TC)和总甘油三酯(TG)的影响。用聚酰胺柱富集青钱柳醇提取物中总黄酮和总三萜,用水提醇沉法和sevag法制备青钱柳总多糖;以阿卡波糖为对照体外检测各组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用;通过STZ联合高糖高脂饲料诱导Ⅱ型糖尿病小鼠模型,分不同剂量组给青钱柳总黄酮(CPF),四周后检测各生化指标。结果表明:富集后CPF中黄酮含量达到55.66%,对α-葡萄糖苷酶有很好的抑制作用,其IC50值60.477mg/L接近阿卡波糖的IC50值58.608mg/L;能明显改善正常小鼠糖耐量,降低餐后血糖;能降低糖尿病小鼠的FBG、TC、TG。CPF能抑制α-葡萄糖苷酶活性,降低糖尿病小鼠的血糖。     

耐硒菌株Cytobacillus firmus N4的筛选及其对α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响

微生物制备纳米硒具有低毒、温和等优点,具有广阔的应用前景。从武汉施加硒肥的土壤中分离纯化得到一株能将亚硒酸钠还原成纳米硒的菌株,对其进行菌种鉴定,测定其耐硒能力和生长动力学曲线,利用扫描电镜对制备的纳米硒颗粒进行表征,并将转化得到的纳米硒及菌株次生代谢产物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性进行初步探究。结果表明,在分离纯化的16株菌株中,坚强芽孢杆菌N4（Cytobacillus firmus N4）对亚硒酸钠的最大耐受性为36 mg/mL,产生的纳米硒粒径为150~220 nm。纳米硒质量浓度为0.625 mg/mL时对α-葡萄糖苷酶的抑制率为25.42%±0.69%;次生代谢产物质量浓度为2.500 mg/mL时,抑制率达到73.83%±4.63%。Cytobacillus firmus N4具有高耐硒性质,可为纳米硒的生物转化提供基础,且其次生代谢产物有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性,值得进一步深入研究。     

胶红酵母CICC 33013胞外多糖抑制肝癌细胞活性研究

采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法对胶红酵母胞外多糖组分(Rhodotorula mucilaginosa exo-polysaccharide2-A,REPS2-A)抑制10种常见癌细胞(血癌细胞K562、胃癌细胞BGC823、胃癌细胞SGC7901、胃癌细胞MKN28、肝癌细胞HepG2、BEL7402、Hep3B、胰腺癌细胞HS66T、乳腺癌细胞SKBR3、宫颈癌细胞HeLa)能力进行了筛选,结果证明胞外多糖组分REPS2-A对肝癌细胞HepG2有较好的抑制效果。通过胞外多糖组分REPS2-A对HepG2细胞抑制作用最佳浓度及时效性的研究,探讨胞外多糖组分REPS2-A对肝癌HepG2细胞的生长抑制及其作用机制。结果表明:当胞外多糖组分REPS2-A的浓度为1mg/mL时,肝癌细胞HepG2的抑制率高于IC50时的抑制率,抑制效果明显优于其他浓度。肝癌细胞HepG2的自发凋亡率为0.40%,当胞外多糖组分REPS2-A浓度为1mg/mL,分别处理24,48,72h,肝癌细胞HepG2的凋亡率依次为77.70%,88.18%,97.08%。胞外多糖组分REPS2-A能有效抑制肝癌细胞的增殖,使肝癌细胞HepG2阻滞发生在G1/S期,并诱导肝癌细胞HepG2凋亡,且存在剂量效应。     

簕菜青钱柳复合多糖饮料研制及体外抗氧化降血糖作用

目的 优化簕菜青钱柳复合多糖饮料配方,并评价其体外抗氧化活性和降血糖作用。方法 以对α-葡萄糖苷酶抑制率为评价指标,确定簕菜多糖与青钱柳多糖的最佳配比;以感官评分和离心沉淀率为评价指标,通过单因素实验、响应面实验和正交实验,优化簕菜青钱柳复合多糖饮料的最佳配方;对复合多糖饮料进行体外抗氧化及降血糖功能相关指标的测定。结果 簕菜多糖与青钱柳多糖最佳比率为2:3 (m:m),复合多糖添加量3.80%、柠檬酸添加量0.04%、木糖醇添加量9.50%、海藻酸钠添加量0.03%、果胶添加量0.04%、羧甲基纤维素钠添加量0.03%;当复合多糖饮料质量浓度为0.05mg/mL时,对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS]、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和羟基(hydroxylradical,OH)自由基清除率分别为91.06%、78.26%和43.26%,对α-葡萄糖苷酶抑制率达46.86%。结论 所制得的簕菜青钱柳复合多糖饮料色泽浅黄、入口回甘、风味独特、稳定性好,具有较显著的体外抗氧化、降血糖作用。研究结果可为簕菜、青钱柳茶的精深加工利用提供参考和借鉴。     

霍山石斛与铁皮石斛的体外生物活性比较

目的:比较霍山石斛与铁皮石斛(乐清、云南)3种石斛提取物对体外免疫、抗氧化、细胞氧化损伤、抗肿瘤和抑制α-葡萄糖苷酶活性的影响。方法:将3种石斛水提物配置成不同浓度溶液,分别与对照品一起进行体外测定刺激巨噬细胞RAW264.7释放NO的活性,清除ABTS自由基、FRAP法抗氧化能力和阻止H_2O_2诱导PC12细胞衰老能力,抑制肝癌细胞HepG2活性和胰岛素抵抗HepG2模型细胞内α-葡萄糖苷酶的活性研究。结果:霍山石斛提取物具有最优的体外刺激RAW264.7细胞释放NO的活性,更好的ABTS自由基清除能力和FRAP能力。200μg·mL~(-1)霍山石斛提取物对H_2O_2诱导的PC12细胞具有保护作用,修复率为40.52%。此外3种石斛提取物均具有一定的抑制HepG2肿瘤细胞增值的活性。与胰岛素抵抗模型组相比,在低浓度(100μg·mL~(-1))时,3个样品均对细胞内α-葡萄糖苷酶的活性无抑制作用,在中高浓度时霍山石斛提取物(200和400μg·mL~(-1))具有一定的抑制活性,表现出较好的降血糖作用。结论:霍山石斛相较于铁皮石斛在增强免疫、抗肿瘤、抗氧化、延缓衰老及降血糖等体外生物活性方面具有更好的作用。     

羊肚菌菌丝体富硒条件优化及其硒多糖抗氧化活性研究

对羊肚菌菌丝体液体深层发酵富硒条件进行优化,考察培养基中硒浓度、温度、装液量和p H值对富硒率的影响。采用Fenton法、邻苯三酚自氧化法和DPPH(1,1-二苯基-2-苦基肼)还原法对羊肚菌菌丝体多糖的体外抗氧化活性进行了研究。羊肚菌菌丝体富硒的适宜培养条件为:亚硒酸钠质量浓度为10 mg/L,温度25℃,装液量100 m L/250 m L,初始p H值7。在此条件下,富硒率最大达9.10%。羊肚菌菌丝体多糖和羊肚菌菌丝体硒多糖清除羟自由基(·OH)IC50分别为:0.62 mg/m L和0.42 mg/m L;清除超氧阴离子(O2-·)IC50分别为:0.85mg/m L和0.59 mg/m L;清除DPPH自由基IC50分别为:0.66 mg/m L和0.49 mg/m L。羊肚菌菌丝体多糖具有较强的体外抗氧化活性,且随着多糖浓度的增大其抗氧化活性逐渐增强,羊肚菌菌丝体硒多糖抗氧化作用更强。     

藏黄连多糖-硒纳米颗粒的制备、结构表征及体外抗炎活性

该研究通过绿色合成中药多糖-硒纳米颗粒,筛选具有抗氧化、抗炎功能的富硒中药多糖保健食品,满足人们生活水平不断提高的要求和养生保健的愿望。通过藏黄连多糖（CTP）绿色还原亚硒酸钠成功构建藏黄连多糖-硒纳米颗粒（CTP-SeNPs）,表征其结构,并探索其体外抗氧化与抗炎活性。结果表明,通过FT-IR和XRD验证该研究中成功构建了CTP-SeNPs;EDS-SEM和DLS显示,CTP-SeNPs呈现厚片状,边缘圆润,硒含量为11.66%,粒径约101.96 nm;体外抗氧化试验显示,在0~10 mg/mL浓度范围内,随CTP-SeNPs浓度的增加,其清除自由基能力逐渐增大,最大清除率均能达到60%以上,且体外抗氧化效果优于CTP组;体外细胞试验显示,在250~500 μg/mL浓度范围内,CTP-SeNPs促进RAW264.7细胞增殖的能力显著优于CTP,在250~1 000 μg/mL浓度范围内,CTP-SeNPs抗炎效果显著高于CTP。综上所述,藏黄连多糖绿色还原亚硒酸钠成功构建的藏黄连多糖-硒纳米颗粒具有抗氧化、促抗炎的活性,可为研发富硒中药多糖保健食品提供理论依据。     

硒化天麻多糖的制备、结构表征及其抗氧化活性评价

本文以天麻多糖(Gastrodia elata Blume polysaccharides,GEP)和亚硒酸钠为原料,以硒含量为指标,利用单因素实验和响应面试验优化硝酸-亚硒酸钠(HNO₃-Na₂SeO₃)法制备硒化天麻多糖(Selenated Gastrodia elata polysaccharides,SeGEP)的工艺。采用紫外光谱、红外光谱、核磁共振、粒径和Zeta电位、刚果红试验、碘-碘化钾试验、扫描电镜等对GEP和SeGEP进行结构表征分析;并采用体外抗氧化活性试验研究硒化修饰对天麻多糖的活性影响。结果表明,硒化天麻多糖最佳制备工艺条件为：反应温度74℃、硝酸浓度0.041%、反应时间8.4 h,在此条件下SeGEP的硒含量为3891.05±10.86μg/g;结构表征结果显示天麻多糖被成功硒化修饰,硒化修饰后可使GEP粒径降低、Zeta电位的绝对值变大、多糖溶液的稳定性改善,同时发现GEP和SeGEP可能具备三股螺旋结构,且含有较长的侧链和支链结构;扫描电镜分析显示硒化修饰可改变GEP的微观形态。体外抗氧...     

款冬花硒多糖的制备及抗氧化性研究

本文对款冬花多糖(TFPs)进行硒化修饰工艺优化研究,并初步探讨了其抗氧化活性.研究采用亚硒酸钠硒化法,制备款冬花硒化多糖(STFPs);以多糖中硒含量为指标,采用响应面法对制备工艺条件进行优化;并进行STFPs清除DPPH·、O2-·和OH·的实验,研究其体外抗氧化活性.得到最佳硒化条件为:硒化试剂质量比(m(亚硒酸钠)∶m(款冬花多糖))=1.06∶1,反应温度70℃,时间11h,硝酸体积分数0.5％.此时STFPs中的平均硒含量为3.84mg/g,与TFPs相比,清除DPPH自由基的能力显著提高,对O2-,OH·的清除能力也有一定程度的提高.     

竹叶椒对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及机制研究

采用体外抑制模型方法评价竹叶椒生物碱对α-葡萄糖苷酶(酵母菌来源、小鼠小肠来源)抑制作用,并采用Lineweaver-Burk双倒数法分析其抑制α-葡萄糖苷酶活性的机制。结果显示,竹叶椒脂溶性生物碱和水溶性生物碱都对α-葡萄糖苷酶有一定的抑制作用。竹叶椒脂溶性生物碱和水溶性生物碱对酵母来源α-葡萄糖苷酶IC50(半数抑制浓度)分别为(0.73±0.17) mg/mL、(2.74±0.28) mg/mL;脂溶性生物碱对小鼠小肠来源α-葡萄糖苷酶的IC_(50)为(1.94±0.13) mg/mL。动力学研究表明,竹叶椒生物碱提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型为典型的非竞争性抑制。竹叶椒生物碱对α-葡萄糖苷酶有较好的抑制作用,为进一步的开发利用提供强有力的理论依据。     

醋酸催化下枸杞多糖的硒化修饰及抗肿瘤活性

制备硒化枸杞多糖,初步了解其结构及体外抗肿瘤活性。利用亚硒酸钠对枸杞多糖进行修饰,通过将无机硒转化为有机硒,为得到高含硒量的枸杞多糖进行探索,找出最佳反应条件为:2mL冰醋酸作为催化试剂,硒化试剂硒酸钠用量为2g,室温下反应时间48h。通过紫外光谱、红外光谱分析,并进行了体外抗肿瘤的初步试验研究。结果:确定了硒化枸杞多糖的分子结构中存在亚硒酸基团,人宫颈癌细胞抑制率可达到26.1%。硒化枸杞多糖对人宫颈癌细胞存在一定的抑制作用。