不同产地和品种白肋烟烟草特有亚硝胺与前体物关系

收集了我国4个白肋烟产区33份白肋烟晾制后上部叶样品,并以美国、马拉维样品为对照,测定了烟草特有亚硝胺(TS-NA)、生物碱和硝酸盐含量,以揭示TSNA含量与前体物之间的关系。结果表明,四川达州和云南宾川白肋烟TSNA含量水平较低,分别与美国和马拉维相当,不同产区间NNN和总TSNA含量差异较大,NNK、NAT和NAB含量差异相对较小。烟碱转化导致降烟碱含量升高是造成国内一些产区NNN和总TSNA含量较高的主要原因,随着总TSNA含量的增加,NNN所占比例增大。烟叶降烟碱含量、烟碱转化率与NNN和总TSNA含量呈极显著的正相关关系。NNK、NAT、NAB含量与硝酸盐含量呈显著正相关,同一产区不同烟叶样品NNK含量与硝酸盐含量呈极显著的正相关。品种间比较可知,鄂烟1号和鄂烟3号烟碱转化率较高,是导致其TS-NA含量升高的主要原因。     

国外口含型无烟气烟草制品总烟碱、游离烟碱和烟草特有亚硝胺含量分析

采用CORESTA推荐方法测定了65种国外口含型无烟气烟草制品样品的含水率、烟碱、pH、游离烟碱和4种烟草特有亚硝胺(TSNAs).结果表明,口含型无烟气烟草制品的各项化学指标差异显著:含水率为12.07％ ～55.58％;pH为5.55～8.98;以湿重计,烟碱含量为5.41 ～27.68 mg/g,释放游离烟碱含量为0.63 ～ 10.46 mg/g,游离烟碱释放率为7.8％～72.3％;N-亚硝基降烟碱(NNN)为0.31～17.00 μg/g,4-(N-亚硝基甲胺基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)为0.07～6.00μg,/g,N-亚硝基新烟草碱(NAT)为0.11 ～6.51 μg/g,N-亚硝基假木贼碱(NAB)为0.01 ～2.54μg/g,同一样品中4种TSNAs总含量为0.54～31.91μg/g.     

白肋烟低TSNA含量的品种筛选初探

研究了不同白肋烟品种的TSNA含量及组成、各组成成分之间以及它们与烟碱和总氮的关系。结果表明白肋烟中的TSNA主要以N-亚硝基去甲基烟碱（NNN）的形态存在,在TSNA总量中NNN含量所占比重最大,N-亚硝基新烟碱（NAT）和N-亚硝基假木贼碱（NAB）所占比重次之,4-（N-甲基-N-亚硝胺）-1（3-吡啶基）-丁酮（NNK）所占比重最小。TSNA含量在不同品种之间差异比较明显,可以将参试的15个品种分为3类,其中B21为高TSNA含量品种,Ky8959、Tn97、Ky907、20＃、21＃为低TSNA含量品种,其余品种为中等含量品种。TSNA和NNN与烟碱、总氮呈负相关,TSNA与NNN、NAT+NAB、NNK,NAT+NAB与烟碱和总氮都呈正相关,但是除了TSNA与NNN的相关性达到极显著外,其余的相关性均不显著。总之通过筛选来获得低TSNA含量的品种是可能的。      

烟碱转化率与卷烟感官评吸品质和烟气TSNA含量的关系

用具有不同烟碱向降烟碱转化能力的白肋烟鄂烟一号上部叶(2003年)和中部叶(2004年)分别卷制试验卷烟,研究了烟碱转化率与卷烟感官评吸品质和烟丝及烟气中TSNA含量的关系。同一年份的卷烟样品间总生物碱含量无显著差异,烟碱含量和降烟碱含量呈相反趋势变化,从而形成样品间烟碱转化率的梯度差异。感官评吸由5-6名评吸专家组成的评吸小组进行。结果表明,随着烟碱转化率的增高,白肋烟风格程度直线下降,香气质逐渐下降,香气量减少,烟气浓度变淡,生理强度下降,杂气有增加的趋势,余味变劣,口腔残余加重,但刺激性有减小的趋势。两年卷烟样品基本表现相同的趋势,但2003年样品,由于生物碱水平高,不同样品间烟碱转化率的幅度较大,所以各项评吸指标的变化更为明显。随着烟碱转化水平的增高,烟丝和烟气亚硝基降烟碱(NNN)含量和总的烟草特有亚硝胺(TSNA)含量大幅增加,而其它3种烟草特有亚硝胺含量无较大变化。      

我国烟草及其制品中烟草特有亚硝胺含量及与前体物的关系

我国主要烟叶类型烟草特有亚硝胺(TSNA)水平排序为:白肋烟 > 沙姆逊香料烟 > 烤烟 > 巴斯马香料烟,其平均含量分别为10.25、0.89、0.25和0.03 μg/g。在白肋烟和香料烟中,NNN和NAT为主要的TSNA,约占总TSNA的96%,且在总TSNA含量较高的烟样中,NNN占有较大比例。在烤烟中,NNN、NAT和NNK含量水平相差较小,且以NAT含量相对较高。我国烤烟型、混合型、雪茄型卷烟和雪茄的总TSNA含量平均分别为0.211、3.302、3.39和12.66 μg/g。与国外样品相比,我国烤烟烟叶、烤烟型卷烟和混合型卷烟TSNA含量均显著低于国外水平。相关分析表明,烟叶和卷烟中的TSNA含量与降烟碱水平呈显著正相关,其中NNN与降烟碱相关性最大,相关系数达0.8633。      

UPLC-MS/MS法同时测定烟叶中的TSNAs

为快速准确测定烟叶中的烟草特有亚硝胺(TSNAs),优化改进了LC-MS/MS法中样品的前处理条件,建立了测定烟叶中TSNAs的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法。结果表明:1用乙酸乙酯萃取代替固相萃取对TSNAs进行纯化,操作快速准确,更适合大批量样品的分析;2N-亚硝基降烟碱(NNN)、4-(N-甲基-N-亚硝基氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)、N-亚硝基新烟草碱(NAT)、N-亚硝基假木贼碱(NAB)的定量限分别为4.22、2.38、1.29和0.72 ng/g,加标回收率在87.7%~107.0%之间。     

法国对影响晾烟中烟草特有亚硝胺(TSNA)浓度因素的研究

为了研究品种、施氮量和调制后贮存方式对白肋烟和深色类型晾烟中 TSNA浓度的影响 ,于 1997年和1998年在法国贝日拉克烟草研究所进行了数次试验。并对这两种类型的烟草作了进一步的试验证实 ,TSNA的浓度 (1,4 - 3,8ppm)与生物碱的浓度呈正相关 ,尤其是在亚硝基降烟碱 (NNN)的浓度中亚硝胺占优势 (0 ,5 - 2 ,5 ppm) ,与调制后烟叶中降烟碱的浓度密切相关 ,而亚硝基降烟碱 (NAT)又与新烟草碱 (0 ,3- 1,2 ppm)的浓度相关。深色烟每公顶的施氮量从 2 5 0单位增加到 5 0 0单位 ,致使 TSNA的浓度增加 5 0 %。本研究采用深色烟对不同贮存期…     

无烟气烟草制品中TSNAs的分析研究

用100 mmol/L乙酸铵溶液萃取样品后,用0.22μm水相针式过滤器过滤,采用液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-ESI MS/MS)测定烟草特有N-亚硝胺,建立了无烟气烟草制品中4种烟草特有N-亚硝胺(TSNAs)的同时测定方法。利用建立的方法测定了72个不同品牌种类的无烟气烟草制品中TSNAs的含量。结果表明,N-亚硝基降烟碱(NNN)、4-(亚硝基甲氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)、N-亚硝基新烟草碱(NAT)和N-亚硝基假木贼碱(NAB)的检出限分别是0.03、0.08、0.03和0.02 ng/mL,回收率在93.17%-105.25%之间,精密度在2.03%-4.80%之间。方法的检测限低,特异性好,适合于无烟气烟草制品中TSNAs的检测。实验发现不同品牌的无烟气烟草制品TSNAs的含量差别较大,TSNAs的总含量范围从0.54μg/g到31.91μg/g,相差59倍,平均含量为5.06μg/g。     

我国不同类型烟叶烟碱转化株的比例和转化程度分布

为进一步纯化烟叶群体,提高烟叶品质。对我国5种类型(烤烟、白肋烟、香料烟、马里兰烟和晒红烟)13个主栽品种的烟叶(2003-2004年调制)烟碱转化株的比例和转化程度分布进行了分析测定。白肋烟品种和杂交种存在严重的烟碱向降烟碱转化问题,总转化株占烟株群体的比例除B37外,均在30%以上;烤烟品种烟碱转化问题相对较小,转化株比例低,且多为低转化株,所测品种群体中总转化株的比例不超过7%;香料烟和马里兰烟群体总转化株比例也偏高,分别为10.0%和9.84%,而且有一定比例的高转化株;晒红烟转化株比例较低。      

烟叶生物碱组成差异对白肋烟高温贮藏前后TSNAs形成的影响

本研究选用TN86的不同烟碱转化株系,在相同的栽培、田间管理以及晾制方式下,选取生物碱组成差异明显的烟叶样品进行高温贮藏,测定贮藏前后烟叶TSNAs含量,探究贮藏过程中TSNAs积累及与生物碱含量的关系。结果表明:贮藏前取自90株烟叶的4类生物碱株间差异明显,且以烟碱和降烟碱株间差异最大。控制待测样品总生物碱、NO₃-N和NO₂-N含量相近,45℃高温贮藏12 d后,TSNAs含量远高于贮藏前。与贮藏前相似,NNN和NNK在贮藏期间的增加量分别与其前体物降烟碱和烟碱含量呈极显著正相关。随着降烟碱含量的提高,仲胺类降烟碱形成的NNN增加量显著大于叔胺类烟碱形成的NNK的减少量,使总TSNAs含量增加。相关分析和逐步回归的结果显示,烟碱转化导致降烟碱比例增加是影响高温贮藏后TSNAs形成的主要因素。在烟叶总生物碱、硝态氮和亚硝态氮含量相近的条件下,生物碱组成差异对贮藏过程中TSNAs积累有重要影响。      

烤烟不同生物碱含量特征及其与烟叶内在质量关系研究初报

随机采集了全国9个省（自治区）烤烟烟叶样品141份和进口烟叶样品40份,采用气相色谱法分析了5种主要生物碱含量,并进行了感官评价。结果表明,国产烟叶生物碱含量变幅大于进口烟叶,烟叶生物碱含量由高到低依次是烟碱、新烟草碱、去甲基烟碱、假木贼碱、麦斯明。各种生物碱的相关关系都达到了极显著正水平。不同地区烤烟总生物碱含量：广西〉福建〉湖南〉山东〉贵州〉辽宁〉云南〉河南〉四川;烟叶烟碱转化率：下部〉上部〉中部,烟碱转化率：四川〉河南〉辽宁〉云南〉贵州〉湖南〉山东〉福建〉广西。四川省烤烟的烟碱和生物碱含量都最低,但其烟碱转化率却最高;广西和福建两省烤烟的烟碱和生物碱都最高,但烟碱转化率却最低。烟叶吸食质量与生物碱有显著的相关关系,其中烟碱对吸食质量影响最大,与香气质、余味、杂气、刺激性4项指标得分显著负相关。5种生物碱与烟支综合评价都表现为极显著负相关,但烟碱转化率及烟碱率与感官质量却没有显著的相关关系,烟碱转化率与综合评价也没有显著相关关系。     

16个雪茄烟品种的烟碱转化率及与发酵后烟叶TSNAs含量的关系

  目的  明确不同雪茄烟品种烟碱转化率差异及与烟草特有亚硝胺(TSNAs)含量的关系。  方法  对16个雪茄烟品种的中部叶生物碱、硝酸盐和TSNAs含量进行了测定，并分析了其相关关系。  结果  1) 不同品种雪茄烟叶均存在烟碱向降烟碱的转化问题，参试的16个品种烟碱含量变化范围为1.14%~5.42%，平均为3.02%，降烟碱含量的变化范围为0.11%~1.47%，平均值0.40%，烟碱转化率范围为5.03%~53.12%，平均值为12.66%，品种间烟碱转化率的变异系数高达101.01%。2)茄衣品种的降烟碱含量和烟碱转化率平均值显著高于茄芯品种。3)不同雪茄烟品种烟叶中的TSNAs含量和组成具有显著差异，总TSNAs含量的变化范围为181.74 ng/g~7759.1 ng/g，平均为3010.98 ng/g，以NNN含量最高，且变异性最大，其平均值为1616.59 ng/g，变异系数为97.28%。4)相关分析结果显示，参试的16个品种的雪茄烟叶中降烟碱含量、烟碱转化率都与NNN和TSNAs含量呈极显著的正相关关系，NNN与降烟碱含量的相关系数为0.802。  结论  烟碱转化导致降烟碱含量增高是造成雪茄烟叶中NNN含量和总TSNAs含量增加的主要原因之一。      

烟草转化株烟碱含量对其向降烟碱转化程度的影响

在烟株生长早期鉴别转化株,需要对转化株的烟碱转化进行诱导以使转化性状充分表达,但同一基因型材料在不同生长条件下经诱导产生的烟碱转化程度存在较大差异。本试验旨在探讨转化株的烟碱基础含量对诱导后烟碱转化程度的影响。结果表明由于打顶和增施氮肥造成烟碱基础含量增高可显著降低诱导后的烟碱转化程度。在温室条件下,通过调节氮肥施用量获得具有不同烟碱含量的植株,以白肋烟TN90的高转化品系为材料的试验表明,当烟碱基础含量超过2.0%时,烟碱向降烟碱转化不完全,随着烟碱含量的增高,烟碱转化百分率几乎呈线形下降。采用由高转化系和非转化系杂交的F1植株为材料进行试验,发现烟碱转化百分率随烟碱含量下降的趋势更加明显。采用低转化株的自交分离后代进行试验,发现在低施氮水平下对转化株进行诱导和鉴别的有效性高于在高施氮条件下对转化株的诱导和鉴别。因此,使烟株维持较低的烟碱水平有利于转化株特别是低转化株的有效鉴别。      

不同初烤烟叶叶片和烟梗TSNAs含量及高温贮藏后的变化研究

为明确不同地区、不同品种、不同部位初烤烟叶叶片和烟梗TSNAs含量及其与前体物之间的关系,探明高温贮藏对TSNAs形成的影响。收集了我国河南、云贵、粤湘产区的30个烤烟初烤后烟叶样品,在河南洛阳设置品种试验,另将初烤叶片和烟梗进行高温贮藏,研究烟草特有亚硝胺、生物碱和硝酸盐含量的变化。结果表明,初烤烟叶叶片TSNAs含量均显著高于烟梗,且在叶片中NNN比例较高,在烟梗中则以NNK比例较高;叶片中生物碱总量约为烟梗的4.7倍;硝酸盐含量则表现为烟梗中含量远高于叶片。不同地区叶片TSNAs含量达到极显著差异,以湘粤产区含量最高;不同品种叶片的TSNAs含量达到显著差异,生物碱含量较低的品种TSNAs含量较低;各部位烟叶TSNAs含量均表现为叶片 > 支脉 > 主脉。相关分析表明在烟叶烘烤过程中烟叶生物碱含量对TSNAs积累的影响较大。经高温贮藏后叶片和烟梗TSNAs含量增加幅度有较大差异,其中烟梗TSNAs增加比例达到229.2%,叶片增加30.6%,硝酸盐含量对高温贮藏过程中TSNAs形成影响较大。      

国内外不同产区和类型雪茄烟烟草特有亚硝胺及生物碱含量分析

为明确国内外不同产区雪茄烟叶生物碱组成和含量、烟草特有亚硝胺（TSNAs）含量水平及相关关系，本试验收集了国内外55个茄芯、茄衣和茄套烟叶样品，并分产区和类型进行分析。结果表明，不同产区雪茄烟样品生物碱含量样本间变异性均较大，烟碱含量为0.66%~10.02%，降烟碱含量为0.04%~0.79%，烟碱转化率为2.07%~28.01%。除国内产区雪茄烟叶生物碱含量相对较高外，其他产区间生物碱含量无显著差异，茄芯烟叶总生物碱含量高于茄衣和茄套。各产区和各类型雪茄烟叶烟碱向降烟碱转化问题均较为突出。不同产区雪茄烟样品总TSNAs含量范围为1.46 μg/g~25.75 μg/g，以NNN含量最高，在0.63 μg/g~20.91 μg/g之间，变异性较大。相关分析表明烟叶烟碱转化率较高是造成目前雪茄茄芯、茄衣、茄套烟叶总TSNAs和NNN含量较高的主要原因，针对烟碱转化性状进行品种改良，对生物碱组成进行优化是实现优质低害中式雪茄烟叶生产的重要途径。      

我国不同类型烟叶烟碱向降烟碱转化研究

对我国不同类型烟叶生物碱含量和烟碱向降烟碱转化的株间变异研究表明,白肋烟和沙姆逊香料烟降烟碱占总生物碱比例高,不同样品间变化幅度和变异性大,烟碱向降烟碱转化问题比较突出。单株分析表明,白肋烟JB80和TN90群体中转化株比例分别为20．0％和18．3％,且50％以上的转化株为转化率在20％以上的高转化株,烤烟转化株比例和转化程度较低。去除转化株后的纯化群体,其生物碱组成得到优化。