基于环介导等温扩增技术的产呕吐毒素 蜡样芽胞杆菌特异性检测

本研究旨在建立食品中产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的快速检测方法.基于产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌合成酶基因cesB靶基因,设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立环介导等温扩增技术(LAMP).然后采用2株产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌、19株蜡样芽胞杆菌和41株非蜡样芽胞杆菌验证了该LAMP具有很好的特异性.LAMP检测的灵敏...     

小肠结肠炎耶尔森氏菌分子生物学检测技术研究进展

小肠结肠炎耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica,Y. enterocolitica）是一种重要的食源性致病菌,可以引起人类的耶尔森氏菌病,该病的典型症状为腹泻、回肠炎和肠系膜淋巴结炎等。由于该菌在特定食品（如肉与肉制品）中的检出率较高,因此对食品安全构成一定的威胁。就现有的检测方法而言,分离纯化和生理生化鉴定方法耗时且难以检测出复杂食品基质中低浓度的小肠结肠炎耶尔森氏菌。所以,研发能够快速、准确地检测食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的鉴别方法迫在眉睫。该研究将小肠结肠炎耶尔森氏菌现有的分子生物学检测方法分为两大类：变温扩增技术和等温扩增技术进行相关研究最新进展的总结,并对其优缺点和发展方向进行讨论,以期为小肠结肠炎耶尔森氏菌快速检测方法研究提供参考。     

模拟胃肠消化提高蛹虫草蛋白的体外抗氧化活性

探究模拟胃肠消化对蛹虫草蛋白质理化性质及抗氧化活性的影响。分别采用SDS-PAGE和酸水解法分析模拟胃肠消化前后的蛋白质分子量分布及氨基酸组成。通过体外化学评价方法,测定模拟胃肠消化前后蛹虫草蛋白质及其消化产物的抗氧化活性。构建H2O2诱导氧化损伤的PC12细胞模型,使用CCK-8试剂盒测定经蛹虫草蛋白质消化产物处理后细胞模型中的细胞活力。结果表明,经模拟胃肠消化后,蛋白质分子量的主要分布范围由10~120 ku变为8~15 ku;模拟胃肠消化前后DPPH自由基清除力的IC50值分别为1.55 mg/mL和1.06 mg/mL,Fe2+螯合力的IC50值分别为1.32 mg/mL和0.18 mg/mL,0.3 mg/mL样品的ORAC值分别为467.27±46.53μmol TE/g和948.80±24.02μmol TE/g;100μg/mL消化产物预保护H2O2损伤的PC12细胞后,细胞活力显著提高(p<0.05)。蛹虫草蛋白质模拟胃肠消化前后均具有较强的抗脂质过氧化能力及较低的Fe3+还原能力。蛹虫草蛋白质经模拟胃肠消化后产生了更多小分子量多肽,抗氧化活性显著提高,因此可对消化产物中的抗氧化肽进行进一步的研究和开发。     

扩增型和非扩增型CRISPR/Cas系统在食源性致病菌快速检测领域应用的研究进展

食源性致病菌引起的食品安全事件频发已对公众健康和社会经济造成巨大的影响,构建针对其快速、高效的检测方法是保障食品安全的重要手段。成簇的间隔短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）及其相关蛋白（CRISPR-associated protein,Cas）组成的CRISPR/Cas是广泛存在于细菌和古细菌中的一种免疫系统,可以有效地识别并切割外源核酸。因此,可以利用CRISPR/Cas系统这一对外源核酸的识别及切割活性实现对食源性致病菌的快速高效检测。本文详细介绍基于核酸扩增和免核酸扩增的两种CRISPR/Cas系统,综述其在对各种食源性致病菌检测中的应用,讨论它们的优势、局限性以及未来的发展趋势,旨在为建立更高效的食源性致病菌检测方法提供技术参考,以期更有效地减少食源性致病菌造成的食品安全问题。     

细菌素的抑菌机制及其在食品工业中应用进展

由致病菌等微生物污染所引起的食源性疾病和食品腐败变质始终是食品工业面临的巨大难题,而传统的抗生素防腐剂所产生的细菌耐药性会对人体健康造成潜在的威胁。出于人们对于安全和绿色防腐剂的巨大需求,细菌素的研究愈发成为焦点,以期发现可有效控制食源性病原体的新型抗菌物质。细菌素是细菌分泌的多肽或前体多肽,分子量在1~100 ku之间不均匀分布,可以杀死或抑制同一生态系统中竞争营养物质的敏感细菌,少数细菌素还表现出抗病毒和抗真菌等特性。已有研究发现的细菌素具有不同的作用模式,例如：成孔、抑制细胞壁/核酸/蛋白质合成等。该研究综述了细菌素的种类与抑菌作用机制,并结合最新的细菌素在食品工业上的应用,全面概述了细菌素抑菌的特性及其对未来食品行业的应用前景与展望,为细菌素更好的应用在食品工业中提供一定的理论依据,同时对推动食品防腐保鲜技术的革新发展具有重要的意义。     

1 株宽宿主谱的阪崎肠杆菌噬菌体生物特性分析及其在乳制品中的应用

以阪崎肠杆菌菌株ATCC25944为宿主菌从河涌水中分离1 株噬菌体TBC-1,具有较宽的阪崎肠杆菌宿主范围。电镜形态学及生物特性结果显示：此噬菌体衣壳为二十面体,具有可收缩性尾部;该噬菌体的最佳感染复数（multiplicity of infection,MOI）为0.001,一步生长曲线显示其潜伏期20 min,爆发期50 min;爆发量为100 PFU/cell;该噬菌体在温度区间40～50 ℃及pH 4～10之间可以保持其效价稳定;对阪崎肠杆菌有较好的裂解杀菌效果,并且MOI越高抑制效果越好。全基因组测序分析显示：该噬菌体的基因组为双链DNA,全基因组分子质量85 313 bp,平均GC含量40.65%,共有118 个蛋白编码区,24 个tRNA。应用结果显示,TBC-1对牛乳中2 种阪崎肠杆菌的抑制效果：室温（25 ℃）培育3 h ,在MOI为106时,能将102 CFU/mL菌抑制到检出限以下;TBC-1对乳粉中2 种阪崎肠杆菌的抑制效果：在25 ℃与37 ℃培育3 h,ATCCBAA894菌量均减少到检出限以下,在25 ℃培育3～12 h,ATCC25944菌量均在检出限以下。本研究表明噬菌体TBC-1具有宽宿主谱系特性、稳定的裂解杀菌以及在牛乳与乳粉中对不同的阪崎肠杆菌均有良好的抑制作用,有潜力成为阪崎肠杆菌生物抑制剂。     

屎肠球菌132胆盐水解酶基因的克隆表达与酶学特性

该研究旨在探究降胆固醇潜在菌株屎肠球菌132胆盐水解酶（bile salt hydrolase,BSH）的活性,通过PCR技术克隆目的基因并在大肠杆菌BL21中表达,同时探讨其酶学特性。利用茚三酮法对其菌体破碎液BSH活性进行测定,比酶活达0.55 U/mg。通过克隆其目的基因,连接pET-28a(+)的表达载体并进行异源表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）实验显示,该酶分子量约37 ku。当底物为甘氨胆酸钠（glycocholic acid,GCA）、pH 5.50时,BSH酶活达4.93 U/mg。酶学特性结果表明,GCA为底物、pH 5.50、温度为30 ℃时达最适条件,BSH水解能力最强,酶活达6.59 U/mg,温度在4~30 ℃时,pH为5~7有较好的热稳定和pH稳定性。不同离子对酶活的影响实验表明Na+、Ca2+、Mg2+均对酶活有激活作用;Mn2+、Fe2+对酶活影响不大,但Ni2+、Al3+、Li2+、Co2+、Zn2+均对酶活有强抑制作用,比酶活降到10%以下,几乎丧失活性。通过酶反应动力学得出该酶的Vmax为6.44 μmol/(min?mg),Km值为3.16 mmol/L。因此,通过bsh基因克隆并异源表达,提高了屎肠球菌132BSH活性,并且BSH水解各类胆盐能力较强,为降胆固醇功能食品的开发与应用奠定基础。     

意图感知网络助力物联网发展

意图感知网络是一种全新的网络模型,其通过分析用户的意图,将意图转译为相应的网络策略,最终实现网络感知和控制策略的自动化部署,使得网络管理的效率得到极大提升,降低企业网络运维成本,这是未来网络发展的趋势。针对意图感知网络基础概念、关键技术、产业进展等方面,深入分析研究意图感知的前世今生,借鉴其网络自动化的理念,将其概念拓展至业务层面,助力物联网从“互联”到“智联”,再到“敏捷智联”,打造敏捷的端到端物联网系统。基于意图感知网络的优势,提出业务意图感知功能架构,打破商业与网络之间的鸿沟,将用户的业务意图转换为网络可执行操作的路径,通过持续的保障机制确保网络与意图始终对齐,对构建下一代物联网体系架构具有指导意义。     

关于伊春林区实施经济转型的探讨

伊春作为全国重要的国有林区,属于典型的资源型城市.由于历史的原因,目前面临着一系列经济、社会和环境问题.这些问题如果得不到及时解决,那么它所危胁和影响的不仅是伊春这座资源型城市的本身的可持续发展,而且可能引发区域性的经济和环境的衰退.本文结合伊春林区的历史和现实,就加快经济转型的问题作以探讨.     

车载网络中基于区域覆盖的机会传递算法研究

The highly mobility of vehicles, intermit-tent communication between the vehicles and the requirements of real time applications are some of the main challenges of multi-hop message delivery in Vehicular Ad Hoc Networks(VANETs).There are also additional challenges, especially when the des-tination for the message delivery is a moving vehi-cle. In this paper, we propose a novel multi-hop message delivery method, called the Coverage Area-based oPportunistic message forwarding algorithm (CAP). The main idea of CAP is to cover the poten-tial area of a moving target vehicle as much as pos-sible with the reachable area of the required deliver-y messages, so that the message can be delivered successfully. Because the success ratio and overhead of the multi-hop message delivery are two important but incompatible parameters in CAP, two tunings are discussed in the algorithm in order to maintain the balance of the two parameters. The simulation results show that compared with other reference ap-proaches, CAP provides an efficient message deliv-ery with a higher success ratio and a shorter mes-sage delay.