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目的建立免疫学快速检测动物制品中的环丙沙星、恩诺沙星、磺胺二甲嘧啶残留,制备融合表达蛋白并进行评价。方法利用传统单克隆抗体制备方法分别制备环丙沙星、恩诺沙星、磺胺二甲嘧啶的单克隆抗体,通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)获得3种单抗的单链抗体(single-chainvariable fragment,Sc-Fv),再通过套嵌PCR方法,使用柔性氨基酸Linker将已获得的单链抗体进行串联并通过分子生物学技术获得高效融合表达,以纯化的多联融合单链抗体为探针,结合前期技术建立的免疫学快速检测技术,对融合表达产物的抗原特性进行初步的分析。结果制备的单克隆抗体抗原抗体反应性良好,效价较高,融合表达抗体蛋白能够很好的与3种相应药物反应。结论本研究初步建立了特异性较高的3种药物的融合表达抗体的制备方法,且该抗体具有良好的反应原性。 相似文献
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pH吸附法纯化乳酸片球菌素的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将乳酸片球菌PA003接种于MRS液体培养基,37℃静置培养16h产生片球菌素.通过建立效价标准曲线来测定片球菌素的效价,为了确定片球菌素对产生菌细胞的pH吸附特性,研究在不同的pH条件下,片球菌素对产生菌细胞吸附率的大小.结果表明,在不同的pH条件下片球菌素活性较为稳定,而且对产生菌细胞的吸附率不同,pH6.0时吸附率可达60%,而在pH小于3.0或pH大于10.0时,吸附率为0.这一结果表明了片球菌素对细胞的吸附是具有pH依赖性的,这一特性将有助于对片球菌素的分离纯化. 相似文献
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目的 基于表面增强拉曼光谱(surface enhanced Raman spectroscopy,SERS)建立小麦表面脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)的快速检测方法。方法 以银纳米颗粒(silver nanoparticles,AgNPs)为基础,利用其表面修饰的特殊官能团与DON之间的疏水作用,捕获小麦表面附着的DON,然后再以银AgNPs作为表面增强拉曼基底材料,在铝箔表面进行自组装并进行SERS检测。结果 采用1-硫代硅烷对纳米银进行修饰,可以更好的捕获DON分子,选择合适浓度的纳米银在铝箔表面进行自组装就可以实现DON的快速SERS检测。实验结果显示,在DON浓度为3.3 ~ 333 ppm的范围内具有良好的线性关系。将经过修饰的纳米银分散到小麦表面,可以捕获附着在其表面的DON,回收率实验显示,在小麦表面DON的添加浓度为12 ppm、25 ppm和50 ppm时,均可以实现80 %以上的回收率。结论 本方法操作简单、快速,结合便携式拉曼光谱仪,有望用于小麦表面DON的快速现场检测。 相似文献
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