蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus LJ01中亚硝酸盐还原酶的基因克隆、表达和纯化

利用克隆表达技术,对一种蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus LJ01的亚硝酸盐还原酶（nitrite reductase,NiR）基因进行克隆、原核表达,利用Ni柱亲和层析和DEAE Sepharose Fast Flow交换层析对表达的重组NiR进行纯化,分析重组酶的性质。研究结果显示,该NiR含有一个1?623?bp的开放阅读框,编码540?个氨基酸序列,重组NiR的分子质量约为67?ku;该酶中同时存在铁离子和铜离子,且含量分别为51.0?mg/kg和184.5?mg/kg;圆二色谱结果显示α-螺旋结构在重组NiR中所占比例最大。     

潜在的水体修复菌Bacillus subtilis H001的筛选及其高密度培养

在水产养殖规模日益扩大和集约化程度不断提高时,带来了养殖水体富营养化、亚硝酸盐超标、致病微生物等问题,在其中引入益生菌,可起到预防和控制的作用。从10株枯草芽孢杆菌中,筛选出菌株H001具有较高淀粉酶和蛋白酶酶活,分别为36.7U/mL和35.6U/mL。当麸皮浸汁为40g/L,玉米浸汁为15g/L,豆粕为20g/L,H001菌落总数(TCN)对数值分别为12.1,12.1和14.0。当玉米浸汁与豆粕粉质量比为2:1时,麸皮浸汁与豆粕粉的质量比为2:1时,H001的TCN对数值都约为15.0。在模拟水体中,当亚硝酸盐含量分别为5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、30.0mg/L、40.0mg/L和50.0mg/L时,菌株H001对其降解率分别为95.0%、95.0%、84.1%、68.6%、48.5%和44.4%。综上所述,具有较高淀粉酶和蛋白酶酶活的枯草芽孢杆菌H001,其培养基经优化后TCN提高到1.6×1015CFU/mL,优化后培养基组合经济且适合于H001的高密度培养,H001是一种潜在的养殖水体修复菌。