真鲷肌肉生长抑素(MSTN)基因的克隆及表达分析

采用同源克隆的策略,设计了3对引物,首次分离、克隆了2820bp的真鲷肌肉生长抑素(MSTN)基因组序列,该序列在GenBank上注册(注册登录号为AY965686).经过剪接、比较,分析了真鲷MSTN基因的序列和结构特征.真鲷的MSTN基因具有3个外显子、2个内含子,整个开放阅读框编码着384个氨基酸,第1个外显子上有一个连续11个Q氨基酸的残基,C-末端具有9个保守的半胱氨基酸及一个RVRR的蛋白酶解加工位点.在第1、第2内含子和3'非翻译区上分别具有一个微卫星重复序列.RT-PCR分析表明,MSTN基因在真鲷不同组织中都有表达,但表达量具有明显的差异;MSTN在肌肉中表达量最高,其次是脑、小肠、头肾、鳃和性腺,心脏、眼睛、肝脏中只有极少量表达,脾脏中没有检测到MSTN的表达.     

牛蒡寡糖对黄瓜幼苗诱导抗病性的研究

利用浓度为1．0mg／ml、3．0mg／ml、5．0mg／ml、8．0mg／ml和10．0mg／ml的牛蒡寡糖对黄瓜幼苗离体诱导3d，并用5．0mg／ml的牛蒡寡糖对黄瓜幼苗离体诱导1～6d后，测定与抗病相关的防御酶活性；利用5．0mg／ml的牛蒡寡糖诱导黄瓜幼苗第1真叶3d后接种白粉病菌，调查黄瓜植株的病情指数。结果表明，与对照组相比，不同浓度的牛蒡寡糖对黄瓜幼苗均有诱导作用，能显著提高被处理叶片PAL、POD、PPO、SOD、CAT和壳多糖酶的活性，不同的酶活性达到最高水平时的诱导浓度略有差异。几种酶活性随诱导的时间进程呈现不同水平的动态变化趋势，其中POD活性的提高幅度最大，且一直呈上升趋势。第1真叶的处理组较对照组病情指数降低11．91％，同株未诱导的第2真叶处理组较对照组降低27．42％，说明牛蒡寡糖诱导了黄瓜幼苗对白粉病的系统抗性。     

萌育与冻融处理对芝麻γ-氨基丁酸含量的影响

探究萌育时间、萌育温度、氯化钙、谷氨酸钠等因素以及冻融处理对芝麻萌育过程中γ-氨基丁酸含量的影响。结果表明,随着萌育时间的延长,γ-氨基丁酸含量显著提升,萌育3.0 d时,γ-氨基丁酸含量增至7.19 mg/g;30℃时萌育γ-氨基丁酸含量增至最大值;萌育过程中添加氯化钙溶液、谷氨酸钠溶液均有利于γ-氨基丁酸的转化;冻融处理对于转化γ-氨基丁酸具有显著作用。使用萌育1 d的芝麻,采用响应面试验得出最优的γ-氨基丁酸转化条件为：冷冻胁迫18 h,解冻温度32℃,解冻时间15 h,在该条件下芝麻中γ-氨基丁酸含量为10.02 mg/g,比未经冻融处理的芝麻γ-氨基丁酸含量提高3.02倍,比对照组γ-氨基丁酸含量提高4.06倍。     

南极大磷虾油脂的提取及其脂肪酸组成分析

通过单因素实验和正交实验对有机溶剂萃取南极大磷虾油脂的工艺参数进行了优化,并利用气相色谱分析了所提油脂的脂肪酸组成。研究结果表明无水乙醇为南极大磷虾油脂的最佳提取试剂,当提取温度为65℃,时间为3h,料液比为1:9(w:v)时,可获得最高提取率为19.60g/100g(干基)。气相分析发现南极大磷虾油脂中含有14种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸占34.73%,饱和脂肪酸占65.26%;主要脂肪酸种类包括棕榈酸(29.3%)、二十二酸(20.1%)、油酸(13.7%)、十四酸(11.7%)、二十二碳六烯酸(10.2%)、十六烯酸(7.39%)、亚油酸(2.04%)。     

南极磷虾脱脂蛋白肽抗疲劳和耐缺氧实验研究

目的：通过灌服南极磷虾脱脂蛋白肽研究其对小鼠抗疲劳、耐缺氧能力的影响。方法：对照组小鼠灌胃蒸馏水,低剂量组、中剂量组和高剂量组分别以南极磷虾脱脂蛋白肽灌胃,灌胃剂量分别为0.2、1.0、5.0g/(kg ·d),连续28d。分别测定小鼠负重游泳时间和血乳酸(LA)、血尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、肝糖原含量;常压耐缺氧时间及耗氧量、亚硝酸钠中毒存活时间。结果：高剂量组小鼠负重游泳时间及血清中LDH含量、LA清除率及肝糖原含量明显高于空白组,BUN含量明显低于空白组。高剂量组常压耐缺氧存活时间及亚硝酸钠中毒存活时间明显高于空白组。结论：南极磷虾脱脂蛋白肽能明显提高小鼠抗疲劳、耐缺氧的能力,具有非常明显的保健作用。     

真姬菇发酵海带废渣制备多糖的抗氧化活性

利用试剂盒法测定了真姬菇液态发酵海带废渣后发酵上清液中多糖的抗氧化能力,结果表明,在多糖浓度为0.5mg/mL时,真姬菇31菌株发酵上清液中的多糖(简称31菌株多糖)对羟自由基的抑制率比海带废渣水溶液上清中的多糖(简称对照多糖)高了17.6%,对照多糖的IC50为1.94mg/mL,31菌株多糖的IC50为0.55mg/mL;多糖浓度为10mg/mL时,31菌株多糖对超氧阴离子自由基的抑制率比对照多糖高了14.6%;多糖浓度在0.6mg/mL时,31菌株多糖的总抗氧化能力比对照多糖高出了35.76%。通过实验可以得出:真姬菇发酵海带废渣后获得的多糖抗氧化活性比未发酵海带废渣中的多糖抗氧化活性显著提高,从而为海带废渣的高附加值再利用提供了科学依据。     

虫草素发酵、纯化及产业化研究新进展

近几年,通过国内外学者的共同努力,虫草素在其产量、分离纯化技术方面取得了较大进展。本文对高产虫草素的生产方法及分离纯化技术的最新研究进展进行系统概述,并总结虫草素产品开发现状,旨在为中国虫草素的快速产业化提供指导。     

单环刺螠纤溶酶UFE-Ⅱ的分离纯化及其酶学性质

目的分离纯化单一组分的单环刺螠纤溶酶UFE-Ⅱ,并分析其酶学性质。方法单环刺螠体腔液经离心、超滤、离子交换层析、凝胶过滤等方法进行分离纯化,得到单一洗脱峰酶组分,经Native-PAGE、SDS-PAGE和飞行质谱分析,测定其纯度和相对分子质量;并以酪蛋白为底物,Folin-酚试剂法测定酶活力,对其酶学性质进行分析。结果分离纯化的UFE-Ⅱ具有水解纤维蛋白的活性,其水解酪蛋白的比活力达到375.6U/mg,纯化倍数为10.3倍,回收率为14.0%。UFE-Ⅱ为单一组分,纯度达99%以上,相对分子质量为24329。UFE-Ⅱ的最适反应温度约为45℃;最适反应pH值为7.0;Ca2+、Mn2+和Fe2+是该酶的强激活剂;Fe3+、Cu2+和Pb2+对该酶活力具有一定的抑制作用;SBTI和PMSF能完全抑制酶活力,表明该酶为丝氨酸蛋白酶;糜蛋白酶抑制剂可部分抑制酶活力,亮抑酶肽、抑蛋白酶肽、苯甲脒可较弱地抑制酶活力。结论从单环刺螠体内成功分离纯化出纤溶酶UFE-Ⅱ,并分析了其酶学性质,该酶具有进一步开发利用价值。     

大菱鲆(Scophthamus maximus)幼鱼鳃氯细胞的超微结构研究

大菱鲆是我国由欧洲引进的养殖经济鱼种，属冷水性鲆鲽鱼类，生长于盐度范围为12‰～40‰的水环境中，具有十分发达的氯细胞渗透压调节系统和很强的适应能力。目前，有关大菱鲆养殖技术方面的研究及报道较多，但相关基础理论研究明显滞后，尤其鲆鲽鱼类鳃氯细胞渗透压调节机理研究的报道甚少。而开展海洋鲆鲽鱼类氯细胞结构、细胞类型和细胞生理学特征的研究，对于鱼类渗透压调节机制和细胞生理学基础研究，以及海水鱼类养殖业的发展都具有重要的意义。     

水平井筛管完井多段塞完井液技术

针对高渗透油藏筛管完井的水平井, 研发了包括高黏替浆、防漏酸洗的多段塞完井液技术.第一段塞为高黏度(表观黏度＞100 mPa·s)替浆液,是含有多种功能添加剂的交联聚合物凝胶,滤失系数C3在5.32×10-4～7.74×10-4 m/min1/2,对岩心伤害＜15%,破胶后黏度＜2 mPa·s,残渣率＜3%.第二段塞为高效配方清洗液.第三段塞为复合酸化解堵液,其组成为:按常规土酸基本原理配制的一种缓速酸,一种降解聚合物的成分(用量0.1%～0.3%时可使聚合物溶液黏度由6 mPa·s降至0.447～0.348 mPa·s)及助溶剂(用量3%～8%时可使解堵液对岩屑的溶蚀率达到35.0%～78.5%);该解堵液可彻底去除泥饼,对泥浆伤害后的岩心的解堵率高达85%.第四段塞为加入粒度分布符合要求的TR-5油溶性屏蔽暂堵剂的复合酸化解堵液.第五段塞为优质洗井液(氯化铵溶液).该技术在冀东油田6口井完井中试验获得成功,介绍了G104-5 P46井施工中所用各段塞量、挤注压力变化及返排情况.截止2007-07-01,该技术已用于胜利许多油田的40余口井,均获得成功,大幅度提高了筛管完井水平井的产能.表8参3.