气相色谱法测定牛纤维蛋白原中磷酸三丁酯残留量

目的建立检测牛纤维蛋白原中磷酸三丁酯残留量的方法,并进行验证。方法采用气相色谱法。色谱条件:色谱柱为酸修饰交联聚乙二醇毛细管色谱柱-20M(30 m×0.25 mm×0.25μm),溶剂为正己烷,气化室190℃,检测器210℃,柱温140℃,高纯氮气载气(99.999%),流速1.0 ml/min,不分流,进样量0.1μl。确定磷酸三丁酯的定量限和最低检测限,对方法进行精密性、线性及准确性验证,并用该方法检测3批样品。结果磷酸三丁酯的定量限和最低检测限分别为0.830 6和0.207 6 ng;精密性相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为2.138 6%,磷酸三丁酯的线性范围为2.129 0~17.032 0μg/ml,回归方程y=5.317 7 x+1.096 1,R2=0.997 3,低、中、高3个剂量样品的平均回收率分别为100.596 9%、98.597 5%和99.712 5%,RSD分别为0.641 2%、0.553 7%和1.009 5%。3批样品中磷酸三丁酯残留量分别为3.259 6、3.287 9、3.193 3μg/ml。结论该方法简便、准确、可靠,可用于血液制品中磷酸三丁酯残留量的质量控制。     

氨基葡萄糖和骨碎补联用对大鼠慢性骨关节炎的干预作用及机制

目的：探讨氨基葡萄糖（glucosamine,GLU）和骨碎补（drynaria rhizome,DR）联合用药对大鼠慢 性骨关节炎（osteoarthritis,OA）的干预作用及机制。方法：关节腔注射白陶土-鹿角菜胶诱发大鼠急性骨关节 损伤,结合跑步运动,建立大鼠慢性OA模型。造模前开始灌胃,分别为750 mg/kg GLU（GLU单独作用组）、 150 mg/kg DR（DR单独作用组）、125 mg/kg GLU＋25 mg/kg DR（低剂量联合组）、250 mg/kg GLU＋50 mg/kg DR（中剂量联合组）、750 mg/kg GLU＋150 mg/kg DR（高剂量联合组）、无菌水（空白组、模型组）和2 mg/kg 双氯芬酸钠（diclofenac sodium,DS;阳性对照组）,直至6 周跑台运动后结束。测量大鼠骨关节肿胀 度;取膝关节制作石蜡组织切片,分别进行苏木精-伊红和番红-O-固绿染色,观察关节软骨组织学病理 变化;用酶联免疫吸附检测（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法测定血清金属基质蛋白酶-3 （matrix metalloproteinase-3,MMP-3）、金属基质蛋白酶抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinase-1, TIMP-1）、诱导型NO合成酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、白介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平,黄嘌呤氧化酶法测定血清中超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase,SOD）活力,硝酸还原酶法测定血清和滑膜组织中NO浓度,免疫组化检测关节软骨Ⅱ型胶 原的表达情况。结果：与空白组相比,模型组大鼠关节肿胀,软骨破坏;血清中MMP-3、TIMP-1质量浓度和MMP-3/ TIMP-1质量浓度比值显著升高（P＜0.05）;iNOS活力、IL-1β、NO和TNF-α质量浓度显著增加（P＜0.05）; SOD活力和关节软骨Ⅱ型胶原含量显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,GLU和DR单独作用及中、高剂量联合 作用均能减轻关节肿胀,改善膝关节组织病理学异常现象;明显抑制血清MMP-3、TIMP-1、NO、IL-1β、TNF-α 质量浓度和iNOS活力的增加（P＜0.05）;抑制SOD活力的降低（P＜0.05）;抑制关节软骨Ⅱ型胶原含量的降低 （P＜0.05）。其中,高剂量联合组效果最好,然后依次是GLU、DR、中剂量联合组、低剂量联合组。结论：GLU 和DR单独和联合作用都能够减轻骨关节损伤,联合作用需要达到有效作用剂量才有明显的抑制作用。其作用机制 与调节MMP-3/TIMP-1平衡,增加SOD活力和Ⅱ型胶原含量,降低iNOS活力和IL-1β、TNF-α、NO水平有关。这些 研究为预防和治疗OA的功能性食品的研发提供了理论依据。     

北京市售巴氏杀菌乳的消费调查及实验验证研究

目的了解北京地区消费者巴氏杀菌乳的消费习惯,评估储存温度和时间对巴氏杀菌乳中微生物数量的影响,为消费者正确储存巴氏杀菌乳提供依据。方法北京10个行政区各选择1个大型超市进行问卷调查,调查内容包括巴氏杀菌乳的饮用频率、储存温度和时间等。依据调查结果模拟消费者储存条件,结合微生物生长规律,采用正交试验方法探究温度和时间对巴氏杀菌乳中菌落总数及金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)数量的影响。结果调查问卷结果表明,18岁以下、18～54岁和55岁以上的消费者中,每天饮用巴氏杀菌乳的比例最高分别为15.4%、49.0%和75.9%;所调查消费者中,将巴氏杀菌乳储存在2～6℃、室温、-20℃的比例分别为75.0%、14.6%、5.5%;模拟实验结果表明储存温度对巴氏杀菌乳中微生物影响更大, 37℃储存48h后,菌落总数和S.aureus数量达到1.26×10~5CFU/mL和1.20×10~4 CFU/mL。结论北京市饮用巴氏杀菌乳的消费者主要集中在中老年人群;部分消费者(24.2%)不明确巴氏杀菌乳的正确储存温度;不当的储存温度导致巴氏杀菌乳中的菌落总数和金黄色葡萄球菌的数量增加。