新疆传统乳制品中产蛋白酶乳酸菌的筛选及产酶条件优化

以新疆传统发酵乳制品为分离源,分离筛选产蛋白酶的乳酸菌,并通过形态学观察及16S rDNA序列比对鉴定菌株。以碳源、氮源、金属盐、磷酸盐的种类和添加量为影响因素,以蛋白酶活作为评价指标,通过单因素试验和正交试验优化乳酸菌产蛋白酶的产酶条件。结果表明,从样品中分离筛选出乳酸菌16株,产蛋白酶的乳酸菌4株（编号为A1～A4）,分别被鉴定为戊糖片球菌（Peciococcus pentosaceus）、发酵乳杆菌（Lactobacillus fermentum）、短乳杆菌（Lactobacillxus brevis）、乳酸明串珠菌（Leuconostoc lactis）。在以4.0%葡萄糖为碳源、4.0%牛肉膏为氮源、0.02%的镁离子为金属盐、0.7%的K2HPO4为磷酸盐的条件下,菌株A2产蛋白酶活最高为65.92 U/mL。     

罗伊氏粘液乳杆菌K07的生物学特性及其基因分析

从新疆昭苏县传统发酵乳酪中分离出2株罗伊氏粘液乳杆菌（编号K07、K08）,对2株菌的生长和产酸性能、耐酸耐胆盐、模拟胃肠道的耐受、产罗伊氏菌素能力和抗氧化活性进行了评估;此外还测定了2株菌的抑菌性能并对K07菌株进行基因分析。结果表明,2株菌均在培养12 h后进入对数生长末期,发酵终点pH值为4.45。K07对酸、胆盐和模拟胃肠道的耐受及抗氧化能力强于K08。pH值2.50处理4 h,K07存活率为73.27%。0.15%胆盐胁迫下K07菌株OD600 nm 上升0.3个单位需5.50 h,模拟胃肠道试验K07的存活率为74.13%。两株菌的无细胞提取物抗氧化活性高于完整细胞,其中K07无细胞提取物对DPPH自由基和羟自由基的清除率为42.39%、15.69%,还原力17.96%。K07产罗伊氏菌素量为183.05 mmol/L显著高于K08,且K07抑菌性能较好,对白色念珠菌和无乳链球菌的抑菌圈直径为22.20 mm、18.26 mm。K07基因组全长1 950 440 bp,预测蛋白质编码基因2 067种,GC含量为38.69%。研究结果显示罗伊氏粘液乳杆菌K07具有良好的益生特性,为后续产业化应用提供理论依据。     

酪蛋白源降胆固醇肽的酶解制备工艺优化

以酪蛋白为原料,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶以及胰蛋白酶对酪蛋白进行水解,确定制备降胆固醇肽的最佳蛋白酶;通过单因素实验和响应面试验,研究水解pH、水解温度、酶与底物比、底物浓度和水解时间对酪蛋白水解度和胆固醇胶束溶解度抑制率的影响,确定最佳水解条件;而后通过超滤和凝胶过滤层析确定降胆固醇肽的初步分离工艺。结果表明:制备酪蛋白源降胆固醇肽的最佳水解工具酶是中性蛋白酶,其最佳酶解条件为反应温度51.3 ℃,酶与底物浓度比6.47%,pH6.34,底物浓度5 g/100 mL,反应时间3.5 h,胆固醇抑制率为58.25%±0.59%;Sephadex G-10分离酪蛋白降胆固醇肽条件为上样浓度80 mg/mL,上样体积2.5 mL,洗脱速度3.5 mL/min;经酶解、超滤及层析后制备的酪蛋白源降胆固醇肽峰1和峰2样品在100 μg/mL的胆固醇溶解度抑制率为24.2%±0.24%和4.3%±0.16%。经酶解制备分离后,获得具有抑制降固醇胶束溶解活性的降胆固醇肽,为降胆固醇肽的开发提供理论研究基础。     

不同牧场鲜牛乳中重金属含量的研究

目的 考察4个牧场的生鲜牛乳的重金属污染情况和评估鲜牛乳原料的安全性。方法 采用国家标准检测方法对4个牧区的生牛乳中重金属铬、铅、汞以及金属砷进行检测,其中使用石墨炉原子吸收光谱法测定铅和铬的含量,使用氢化物发生原子荧光光谱法测定总砷含量,使用原子荧光光谱分析法测定总汞的含量。结果 铬含量最高值为DR牧场的0.052 mg/kg,铅含量最高值为YY牧场的6.60 μg/kg,总汞含量最高值为YY牧场的0.83μg/kg,总砷含量范围为 5.10 μg/kg～7.20 μg/kg。结论 实验测得的四种元素含量均远低于安全标准限量值,4个牧场的鲜牛乳未受到重金属污染。     

乳双歧杆菌Y6活菌型发酵乳对消化功能障碍人群肠道健康的影响

为了探究饮用乳双歧杆菌Y6活菌型发酵乳对消化功能障碍人群肠道健康的影响，本文进行了一项膳食干预试验。选择具有消化功能问题的受试者，每天饮用200 mL Y6活菌型发酵乳，持续4周。分别在干预前后进行临床评分，同时利用Illumina PE300测序平台，对受试者粪便微生物的16S rDNA PCR产物片段进行高通量测序，使用气相色谱测定了粪便中短链脂肪酸（SCFAs）的含量。结果表明，饮用Y6活菌型发酵乳对消化功能障碍导致的临床症状有极显著的改善作用（P<0.01）；高通量测序结果显示，Y6活菌型发酵乳的干预对人体肠道微生物群的组成影响显著，但对物种多样性和丰富度没有明显改变，其中有益菌Akkermansia、Collinsella和Erysipelotrichacee＿UCG＿003属的相对丰度增加，有害菌Lachnoclostridium属的相对丰富度减少；肠道内SCFAs（乙酸、丙酸和丁酸）含量显著增加（P<0.05）。乳双歧杆菌Y6活菌型发酵乳的干预可以显著改善消化功能障碍人群的肠道健康，为Y6菌株的应用提供理论依据。