反应萃取法在氨基酸分离中的应用

反应萃取法是分离提取氨基酸的一种重要方法,具有分离效率高,萃取剂可重复利用,分离过程中产生的废水废液少,具有广泛的应用前景。本文综述了常见的反应萃取剂及在氨基酸分离中的应用,分析了反应萃取法分离氨基酸的影响因素,介绍了几种与反应萃取法结合分离氨基酸的技术。     

7075铝合金与H68黄铜的搅拌摩擦焊组织分析

采用金相显微镜对7075铝合金与H68黄铜异种材料搅拌摩擦焊接头组织进行观察、采用X射线衍射仪（XRD）对焊接接头中相结构进行分析,并采用显微硬度计对焊接接头硬度分布进行测试.结果表明,搅拌针的旋转频率为1 100 r/min,焊接速度为80 mm/min时,焊接接头未形成金属间化合物,焊核区晶粒细化,且显微硬度值增加...     

益生菌在构建功能性食品方面的开发研究与展望

益生菌是一类活的微生物,当摄入足够数量时,能对寄主产生有益作用.由于现在人们越来越注重自身的健康,益生菌产品市场正在不断扩大.益生菌在功能性食品市场中的应用有很大的发展潜力.本文将介绍益生菌对于人类身体的保健作用,着重介绍本实验室的研究状况和具有发展潜力的益生菌菌种Bifidobacterium、L. acidophilus、LGG and Lactobacillus reuter,并对益生菌在功能性食品市场上的应用作了分析.     

牛乳极性脂质的提取工艺优化及成分鉴定

为更好开发利用牛乳中的乳极性脂质,本文采用氯仿-甲醇浸提法对酪乳粉中的极性脂质进行提取研究。以磷脂含量为指标,通过单因素试验对氯仿-甲醇体积比、液料比、提取温度及提取时间四个影响牛乳极性脂质提取的因素参数进行优化,后利用响应面法筛选最优提取条件,并采用薄层层析对所得样品进行了分析鉴定。结果表明,氯仿-甲醇比为2:1（v/v, %）最优的料液比为1:4（v/v, %）,提取温度20 ℃,提取时间10 min为极性脂质的最优提取条件,在此条件下测得实际提取磷脂含量为（1.647±0.010）mg/g,且存在磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、神经鞘磷脂等极性脂质。本工艺旨在为乳极性脂质的提取及开发提供研究基础。     

嗜酸乳杆菌ATCC4356分选酶A基因克隆、表达及功能分析

分选酶在细菌对宿主细胞的黏附过程中具有重要作用。为探究乳酸菌分选酶的特性及与其他致病菌分选酶的差异,以嗜酸乳杆菌ATCC4356为模板,构建分选酶A（sortase A,SrtA）重组表达载体pET28a-SrtAΔN48,转入大肠杆菌感受态细胞Transetta（DE3）内表达,使用Dabcyl-QALPTTGEE（Edans）探究其酶活特性。结果发现：嗜酸乳杆菌ATCC4356 SrtA（Lap-SrtAΔN48）分子质量为20kDa左右;Mg2＋、Zn2＋、Mn2＋可提高Lap-SrtAΔN48的转肽能力;Ca2＋不会影响SrtAΔN48的活性,明显区别于致病菌;且分选酶抑制剂查尔酮会抑制Lap-SrtAΔN48的活性。进一步通过蛋白质同源建模分析发现Lap-SrtA由8条中心β桶状结构互相折叠而成,属于经典的分选酶结构,Lap-SrtA的活性位点为His137、Cys198、Arg205。     

乳酸乳球菌细胞壁蛋白酶的分离纯化

本研究确定了分离纯化乳酸乳球菌细胞壁蛋白酶(CEP)的最佳技术路线.用裂解液(50mmol/L Tris-HCI,2mmol/L EDTA-Na2,100mmol/L NaCl,0.5%Tritonx-100,1mg/ml溶菌酶,pH8.5)悬浮菌体(20ml/g),37℃下保温3h,离心后取上清液即为粗酶液.粗酶液通过45%硫酸铵沉淀,DEAE-Sephadcx A-25和Sephacryl-S-300 HR两步层析,可以得到纯化的细胞壁蛋白酶.蛋白酶提纯倍数达到74.048%,最后回收率为14.865%,PAGE电泳检测为一条带,SDS-PAGE检测蛋白酶为单体结构,分子量大约为53kD.用纯化后CEP酶解乳清蛋白,酶解液ACE抑制率为45%.     

壳聚糖固定瑞士乳杆菌蛋白酶的条件研究

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,采用交联-吸附法对瑞士乳杆菌蛋白酶的固定化条件进行研究。在单因素试验基础上,以固定化酶活力为主要指标,研究凝结液、壳聚糖质量浓度、酶用量、交联时间、戊二醛质量浓度对瑞士乳杆菌蛋白酶固定化的影响。运用响应面对固定化条件进行优化,确定瑞士乳杆菌蛋白酶的最优固定条件：凝结液为4g/100mL NaOH-甲醇(体积比3:1)、壳聚糖质量浓度2.89g/100mL、酶用量2.95mg、交联时间1h、戊二醛质量浓度0.40g/100mL,此时固定化酶活力为28.67U。     

瑞士乳杆菌蛋白酶水解酪蛋白制备血管紧张素转化酶抑制肽的条件优化

本研究以酪蛋白为原料,对瑞士乳杆菌蛋白酶水解酪蛋白产生血管紧张素转化酶(angiotensin I-convertingenzyme,ACE)抑制肽工艺条件进行研究。通过单因素分析和响应面试验设计,确定酪蛋白酶解制备ACE 抑制肽的最佳工艺条件为：底物浓度6%(W/W), 酶解温度39.64℃、pH 8.94、酶与底物的比0.92%(W/W),底物预处理温度90℃、酶解时间8h,其对ACE 抑制率可达92.67%。     

水苏糖-植物乳杆菌合生元对小鼠免疫功能的影响

以免疫力低下的小鼠为研究对象,研究水苏糖-植物乳杆菌合生元对小鼠的单核巨噬细胞吞噬功能,绵羊红细胞所致小鼠迟发型超敏反应(DTH),血清溶血素(HC),免疫器官指数(脾脏、胸腺),血清中IL-10、IL-12、IgG及TNF-α水平等免疫指标的影响。试验结果表明,合生元能显著提高小鼠单核巨噬细胞吞噬功能,增强迟发型超敏反应,显著增加脾脏和胸腺指数和血清中IL-10、TNF-α、IgG的含量,对血清中IL-12含量没有显著影响。水苏糖-植物乳杆菌合生元能显著改善免疫力低下小鼠的特异性细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能,提高血清中部分免疫因子水平,增强免疫力低下小鼠的免疫功能。     

产超氧化物歧化酶乳酸菌的筛选及发酵条件优化

从不同地区的传统发酵食品中筛选出104株菌落形态各异的乳酸菌,通过过氧化氢抗性试验筛选出20株具有抗氧化能力的乳酸菌,并测定其产SOD的能力。结果表明,20株乳酸菌中C8的SOD活性最高,达349.62 U/mg。通过革兰氏染色、过氧化氢酶试验和16S rRNA基因序列分析,构建系统发育树,根据同源性分析确定C8为乳酸乳球菌。为提高菌株产SOD的能力,通过单因素实验探究培养温度、初始接种量、初始pH值和灌装量对乳酸乳球菌产SOD的影响,并通过正交试验进一步优化菌株的发酵条件。最终确定最佳发酵条件为:发酵温度37℃,初始接种量3%,初始pH 7.5,灌装量75mL。在此培养条件下,乳酸乳球菌的SOD活性达93.95 U/mL,与优化前相比提高了2.2倍,为后期乳酸乳球菌在发酵产业的应用奠定基础。