反相高效液相色谱和超高效液相色谱法测定 饮料中咖啡因含量的比较研究

目的对原反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法进行转化并优化,建立超高效液相色谱(UPLC)方法,为饮料中咖啡因的含量测定提供更快速、高效、灵敏和环保的方法。方法分别采用RP-HPLC法和UPLC法测定饮料中咖啡因的含量,并对比二者的精密度、稳定性、重复性和加标回收率。结果 2种方法所得8种市售饮料中咖啡因的含量测定结果变化趋势一致,但UPLC法含量测定结果比RP-HPLC法含量测定结果偏高,二者精密度、回收率均符合要求。结论 UPLC法可以成功替代RP-HPLC法,为饮料中咖啡因的快速定性定量分析与检测提供新的途径。     

阿纳其根醇提物对D-半乳糖致衰老小鼠抗衰老作用的血清核磁共振代谢组学研究

目的 利用核磁共振代谢组学方法研究阿纳其根提取物对D-半乳糖致衰老小鼠抗衰老作用机制。方法 选取3月龄的昆明小鼠60只并将其随机分为正常组、模型组、阳性对照组和阿纳其根95%醇提物低、中、高剂量给药组,正常组以外的小鼠每天1次皮下注射D-半乳糖100mg/kg的同时对阿纳其根低、中、高剂量给药组分别灌胃相应浓度的阿纳其根95%醇提物(1.5g/kg,3.0g/kg,6g/kg),对阳性对照组灌胃盐酸多奈哌齐(0.92mg/kg),模型组灌胃等体积的生理盐水,连续给药45d, 第45d末次给药1h后利用Morris水迷宫实验观察小鼠学习和记忆能力并收集各组小鼠血清,用核磁共振波谱(_¹H-NMR)技术测定核磁共振氢谱,采用PLS-DA法和OPLS-DA法分析研究每组小鼠血清中代谢产物差异。结果 行为学检测结果显示与模型组小鼠比较,阳性对照组和阿纳其根醇提物不同剂量组的逃避潜伏期和游泳距离逐渐缩短,差异有统计学意义(P＜0.01),各组小鼠的空间探索实验,与模型组相比,阿纳其根95%醇提物各剂量组小鼠经过有效区次数增加(P＜0.05);各组血清多种代谢物有显著性差异,阿纳其根提取物低、中、高剂量给药组小鼠血清中β-葡萄糖、α-葡萄糖、脂类(VLDL)、脂类(LDL)、缬氨酸、丙酮酸、亮氨酸、酪氨酸、乳酸、组氨酸、乳酸、胆碱、甲酸含量升高;糖蛋白、谷氨酰胺、肌醇、乙酸、蛋氨酸、乙酰半胱氨酸、谷氨酰胺、肌醇、甘氨酸、肌酸、鲨肌醇、乙酸、蛋氨酸、异亮氨酸含量降低。结论 D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的糖代谢代谢、氨基酸代谢发生紊乱,而阿纳其根醇提物对其紊乱有一定的改善作用从而发挥抗衰老作用。     

疏花蔷薇花总多酚提取工艺优化及其抗氧化活性

以疏花蔷薇花中总多酚、鞣花酸、浸膏得率的综合评分作为评价指标,采用单因素试验结合响应面法优化疏花蔷薇花总多酚的提取工艺参数,并测定所得提取物对DPPH 自由基和ABTS+自由基的清除能力及其还原能力。结果表明,疏花蔷薇花总多酚最佳提取工艺参数为采用55%乙醇作为提取溶剂,料液比1∶25（g/mL）,回流提取2 次、90 min/次,所得提取物的浸膏得率为（51.36±0.78）%,总多酚含量为（141.36±2.07）mg/g,鞣花酸含量为（13.46±0.14）mg/g,与模型预测值相当。疏花蔷薇花提取物对DPPH 自由基、ABTS+自由基清除率的半抑制浓度（the half maximal inhibitory concentration,IC50）值分别为0.02、0.03 mg/mL,还原能力较强。     

响应面法优化破壁卡西卡甫枣果总黄酮提取工艺

目的:旨在采用响应面法优选破壁后提取的卡西卡甫枣果总黄酮(FZM)工艺。方法:采用细胞计数法对卡西卡甫枣果破壁时间及破壁率的影响进行考察,随后选取料液比、乙醇体积分数和提取时间3个因素为考察指标,采用响应面法分析优化卡西卡甫枣果破壁提取工艺。结果:响应面法优化破壁提取FZM的工艺:提取温度74℃,提取时间1.7h,料液比1∶26,得到FZM含量平均为1.435mg.g~(-1)。对比前处理后未经破壁处理的卡西卡甫枣果优化工艺提取得到FZM含量相比降低了2.24%,相对误差0.18%。与理论预测值较接近,结果较理想。结论:验证试验表明,该方法简便、可行,可为卡西卡甫枣总黄酮的高效提取,以及后续工业生产提供有利参考。     

骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性研究

目的探讨骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性。方法用不同浓度的骆驼蓬多糖干预,诱导NRK细胞自噬,用激光共聚焦显微镜观察自噬体,筛选出骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳干预浓度和时间范围;利用RAW264.7细胞,以1μg/mL脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)建立体外细胞炎症模型;在骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳浓度和时间下进行干预,以CCK-8试验检测细胞活性,用Hoechst和PI双重染色方法观察细胞凋亡,用ELISA试剂盒检测炎症因子IL-1β和IL-6的分泌量。结果骆驼蓬多糖对NRK细胞诱导自噬的最佳时间为12 h,浓度范围为50～100μg/mL。骆驼蓬多糖干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型后,对细胞活力均无明显影响,诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性,细胞培养液中IL-6和IL-1β分泌量降低,与模型组有显著差异(P(27)0.05)。结论骆驼蓬多糖能抑制LPS刺激诱导的炎症因子的释放,诱导细胞自噬和凋亡,在50～100μg/mL范围内对巨噬细胞RAW264.7具有良好的免疫调节作用。     

沙枣果肉中氨基酸的含量测定

以L-天冬氨酸为对照品,以茚三酮为显色剂,采用可见分光光度法在检测波长586 nm处测定两批沙枣果肉中氨基酸的含量。结果表明,L-天冬氨酸溶液浓度在5~35μg/mL(r=0.999 6)范围内与吸光度呈现良好的线性关系,加样回收率为100.33%,RSD为2.31%,昌吉地区、哈密地区沙枣果肉中氨基酸的含量分别为17.2,31.1 mg/g。可见紫外分光光度法简单、便捷,准确度、重复性良好,为沙枣氨基酸的进一步开发利用提供了基础数据。     

考马斯亮兰法(Bradford法)测定驼乳中蛋白质的含量

用考马斯亮蓝G-250显色,以牛血清蛋白为对照品,采用可见分光光度法在检测波长595 nm处测定驼乳中蛋白质的含量。结果表明,CBB G-250显色测定牛血清蛋白浓度在0.008~0.024 mg/m L(r=0.999 3)范围内与吸光度呈现良好的线性关系,加样回收率(100.20±2.25)%、RSD为2.24%。考马斯亮蓝显色法,具有简便、快速、灵敏度高、成本低、重现性好等特点,为新疆驼乳的进一步开发利用奠定基础。     

高效液相-示差折光法比较新疆地产8种蜂蜜中单糖的含量

目的 本文依据国标检测方法(GB/T18932.22-2003)并依据文献对其改进研究比较新疆地区8种蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖的含量,评价其真伪和质量。方法 采用 Waters carbohydrate high performance(4.6 mm×250 mm,4 μm),乙腈：水(75:25,V:V)为流动相,流速：1.0 mL/min,柱温：35℃,检测器为示差折光检测器,进样量为10 μL。结果 混标及蜂蜜样品中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖在10 min内均达到基线分离,加样回收率分别为98.6%～102.6%,相对标准偏差(RSD)分别为1.5%～2.6%,并且8种蜂蜜中果糖、葡萄糖含量均大于30%,蔗糖含量低于2%。结论 8中蜂蜜中山花蜂蜜果糖含量最高,枸杞蜂蜜葡萄糖含量最高,并且国标检测方法灵敏度高,分析时间短,结果准确可靠,适用于蜂蜜中糖的快速分析和质量控制。     

骆驼蓬多糖以自噬途径免疫调节炎症细胞模型

目的：以骆驼蓬多糖干预小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7炎症反应模型,探讨骆驼蓬多糖调节炎症反应的生物活性及意义。方法：利用稳定表达GFP-LC3的NRK细胞,用不同浓度的骆驼蓬多糖干预,诱导细胞自噬,用激光共聚焦显微镜进行观察自噬体,筛选出骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳干预浓度和时间范围;利用RAW264.7细胞,以1μg/mL脂多糖构建炎症反应细胞模型;参照骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳浓度和时间进行干预,以CCK-8试验检测细胞活性,选择Hoechst和PI双重染色方法观察细胞凋亡,用ELISA试剂检测炎症因子IL-1β和TNF-α的分泌量。结果：骆驼蓬多糖对NRK细胞诱导自噬的最佳时间为12h,浓度为50μg/mL-100μg/mL范围。骆驼蓬多糖干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型后,抑制细胞增殖活性,诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性,细胞培养液中,TNF-a和IL-1β分泌量降低,与模型组有显著差异(p<0.05)。结论：骆驼蓬多糖能抑制LPS刺激诱导的巨噬细胞增殖,诱导细胞自噬和凋亡,能抑制LPS诱导的炎症因子。     

甲基三氧化铼催化过氧化氢氧化异丁香酚合成香兰素的研究

以异丁香酚为原料,叔丁醇为溶剂,CH_3ReO_3为催化剂,H_2O_2为氧化剂,进行氧化合成香兰素。采用单因素结合正交实验对异丁香酚氧化合成香兰素工艺进行优化。结果表明,最佳工艺条件为:反应温度70℃,反应时间4 h,催化剂用量0.9%(以异丁香酚的质量分数计)。在此条件下,反应稳定性较好,产物平均得率可达90.3%,产品香气较为纯正。采用IR、GC-MS、和¹H NMR等对产物进行了分析。