金冠豆角籽粒中α-淀粉酶抑制剂的纯化及抑制动力学的研究

目的 提取金冠豆角籽粒中α -淀粉酶抑制剂（α-amylase inhibitor, α-AI）并将其进行纯化,研究其抑制类型,确定α-淀粉酶抑制剂的及抑制效果。方法 以金冠豆角籽粒为原料,通过NaCl盐溶、硫酸铵沉淀提取将α-AI进行提取,使用G50、G75葡聚糖凝胶柱进行层析,以NaCl洗脱液进行梯度洗脱,收集蛋白峰后,检测α-AI对猪胰淀粉酶的抑制活性;用Lineweaver-Burk双倒数绘图法和Michaelis-Menton方程分析酶反应动力学,通过Linerweaver-Burk作图,探究α-AI的抑制类型。结果 金冠豆角籽粒中提取的α-AI蛋白含量为1.74 mg/mL,对猪胰淀粉酶抑制率为84.20%,半抑制浓度（semi-inhibition concentrationhalf maximal inhibitory concentration, IC50 ）IC50 为6.765677±0.627 63 mg/mL、蛋白含量为1.74 mg/mL。基于酶反应动力学,利用Lineweaver-Burk双倒数绘图法和Michaelis-Menton方程分析发现,不添加抑制剂组和添加抑制剂组的α-淀粉酶的酶解速率曲线几乎相交于原点,并且酶最大反应速率（Vmax）随着抑制剂浓度的增大而减小,米氏常数（Km）不变。结论 α-AI与猪胰淀粉酶的结合呈现可逆型非竞争性抑制。     

紫冠豆角(Phaseolus vulgaris L.)种子中α淀粉酶抑制剂的提取及其性质研究

本研究采用盐溶的方法从紫冠豆角（Phaseolus vulgaris L.）种子中提取α-淀粉酶抑制剂（α-AI）,将提取的α-AI用不同温度和pH处理,并评价其稳定性。在此基础上,以提取物对猪胰腺α-淀粉酶的抑制活性（IC₅₀）为指标,分析了豆粉的细度（A）、料液比（B）、盐溶时间（C）三个因素对α-AI提取效果的影响,利用响应面分析法优化提取条件,通过对老豆角种子的深加工,实现提高其附加值的目的。结果表明:该α-AI为耐热性蛋白,在pH4~10的范围性质稳定,影响α-AI的IC₅₀因素按主次顺序排列为:豆粉的细度>料液比>盐溶时间,确定提取α-AI最佳工艺条件为:豆粉过60目筛（粒径<0.3 mm）,料液质量体积比为1:12（g/mL）、盐溶时间7.75 h。紫冠豆角种子α-AI的IC₅₀最优值为27.036±0.235 μg/mL。     

生长期及发酵处理对东北油豆角黄酮含量的影响

目的 研究生长期内不同品种油豆角黄酮含量的变化,对金冠豆角种子黄酮种类进行鉴定,并探究发酵处理对金冠种粒中黄酮含量的影响。方法 采用乙醇回流法提取7种东北油豆角总黄酮,通过芦丁比色法检测油豆角种粒及荚皮中的黄酮含量,利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight tandem mass spectrometry, UPLC-Q-TOF-MS)检测豆角中黄酮的种类,最后利用唾液链球菌嗜热亚种和植物乳植杆菌L3对金冠豆粒进行发酵处理,探究发酵处理对金冠豆粒黄酮含量的影响。结果 油豆角中黄酮含量随着生长时期的增加呈现出先上升后下降的变化过程,金冠油豆角粗黄酮中存在白杨素、黄芩黄素、二氢木蝴蝶素A等11种黄酮类物质,发酵处理均会导致金冠种粒的黄酮含量下降。结论 不同品种的油豆角在生长期内黄酮含量的整体变化趋势相似,该研究为油豆角品种选育及产品深加工提供了理论指导。