东海乌参肽对小鼠酒精性肝损伤及肠道菌群的调节作用

目的：探讨东海乌参肽（Acaudina leucoprocta peptides,ALPs）对小鼠酒精性肝损伤和肠道菌群的调节作用。方法：将45 只C57BL/6N雄性小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物组（80 mg/（kg mb·d）水飞蓟宾）、ALPs低剂量组（200 mg/（kg mb·d）ALPs）和ALPs高剂量组（400 mg/（kg mb·d）ALPs）。采用慢性酒精干预3 周后进行急性酒精灌胃建立小鼠肝损伤模型,检测小鼠血清和肝脏组织相关生化指标、观察肝脏和结肠组织形态学变化;取小鼠粪便进行16S rRNA测序,分析肠道菌群多样性。结果：ALPs可以显著改善小鼠的肝脏和结肠组织损伤,降低酒精性肝损伤血清标志物丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶的活力,提升乙醇代谢相关酶的活力,抑制酒精性肝损伤小鼠肝脏中的脂肪蓄积,减少肿瘤坏死因子-α、白介素（interleukin,IL）-1β、干扰素-γ和IL-6的分泌及氧化应激标志物丙二醛的含量。ALPs显著改善小鼠肠道菌群的α-多样性和β-多样性,调节多种门、纲、科细菌的相对丰度,改善乙醇诱导的小鼠肠道菌群紊乱并使其趋于正常。结论：ALPs对乙醇诱导的小鼠肝损伤具有明显的保护作用,其机制与ALPs抗氧化、抗炎和改善肠道菌群紊乱相关。     

白肛海地瓜和刺参体壁的比较分析

目的：比较白肛海地瓜和刺参的营养价值和结构特征,提高海地瓜的综合利用价值。方法：对海地瓜和刺参的基本营养成分进行测定;利用扫描电镜、差示热量扫描仪(DSC)和傅里叶变换红外光谱(FTIR),对刺参和海地瓜的体壁超微结构、热反应变化过程和红外吸收光谱加以分析。结论：海地瓜和刺参中蛋白质含量分别为54.80%和52.08%;粗脂肪含量分别为0.42%和3.27%;总糖含量分别为1.12%和1.05%。电镜扫描发现,海地瓜的肌纤维丝较粗壮,排列凌乱,纤维丝排列紧密;刺参肌纤维纤细,排列整齐均匀,并且纤维丝间隙较大,束状纤维较疏松。DSC测试表明,刺参和海地瓜的变性转变温度分别是51.8℃和53.4℃。红外光谱显示,海地瓜在873cm-1波数处有一明显吸收峰,可作为区别参类的特异识别峰。     

海地瓜和冰岛刺参海参岩藻聚糖硫酸酯抗肿瘤作用的比较研究

目的:采用离子交换层析法分别从海地瓜和冰岛刺参中,分离纯化两种海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC),通过建立小鼠Lewis肺癌自发性肺转移模型,比较分析两种SC-FUC对小鼠肿瘤生长和转移的抑制作用。方法:采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)测定其单糖组成,采用离子色谱法测定其硫酸基含量。通过连续腹腔注射两种SC-FUC 21d,剥离原位肿瘤和双侧肺,分别称瘤质量和计数肺表面转移灶结节数。采用RT-PCR法检测肿瘤组织中缺氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达。结果:海地瓜SC-FUC和冰岛刺参SC-FUC均由岩藻糖组成,硫酸基含量分别为26.3%和29.31%;两者均能显著抑制荷瘤小鼠原位肿瘤的生长,抑瘤率分别为19.24%和28.69%;显著减少肺表面转移灶结节数(P<0.01),转移抑制率分别为31.4%和57.1%;显著降低荷瘤小鼠肿瘤组织中HIF-1α和VEGF mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。冰岛刺参SC-FUC的效果要优于海地瓜SC-FUC。结论:两种SC-FUC均能显著抑制肿瘤的生长和转移,其作用机制与其高硫酸化程度有关。     

舟山海域光参酶解嫩化工艺研究

以舟山产光参为研究对象,考察复合酶对光参硬度的影响。结果表明:动物蛋白水解酶酶解效果最好,中性蛋白酶酶解后腥味较轻;两种酶复配后最佳酶解工艺条件为光参质量浓度4 g/100 mL,温度40℃,复合比1∶1,酶量6×10^3 IU/100 mL,pH 7,时间1 h;酶解处理后的光参网状结构密度降低,质构变得松散,肌纤维变细,硬度显著降低,光参嫩度显著改善;采用复合酶处理后的光参皂甙活性物质含量显著提高,酶解处理对光参保健功效有促进作用,而多糖含量有少许下降。     

电感耦合等离子体质谱法测定东海乌参中多种金属元素含量

目的 建立微波消解处理样品, 动态反应池一电感耦合等离子体质谱法测定东海乌参中 Cr、Cu、Zn、 As、Cd、Pb、Ni 七种元素的分析方法。方法 采用以 H2 作为动态反应池反应气, 消除了 ArCl、CaO、MgAr、 CaCl、ArO 和 MgAr 的质谱干扰, 并确定最佳 H2 流量为 75 mL/min, 采用 In、Y、Sc 为内标元素补偿了仪器信 号漂移和基体效应。 结果 方法检出限介于 0.027~0.32 ng/mL, 加标回收率在 83.5%~105.3%之间, 相对标准偏 差为 2.5%~8.2%。结论 本文所建立的方法适用于海参等海产品中多种金属元素的检测分析。     

东海海参胶原蛋白多肽的制备及清除自由基功能研究

以东海海参为原料,采用酶法提取胶原蛋白。选取木瓜蛋白酶、风味蛋白酶以及复合酶(木瓜-风味),在其最佳水解条件下水解,以自由基清除率为指标,确定最佳水解时间及酶种类。研究结果表明,用木瓜蛋白酶水解4 h得到的多肽清除自由基的能力最强,清除率在70%以上;多肽清除羟自由基和超氧自由基的IC50分别为27.8mg/mL和49.3mg/mL。通过超滤处理及DEAE琼脂糖离子交换柱(DEAE Sepharose FF)分离纯化抗氧化肽,得到分子质量小于5kDa的肽,其功能性最强。利用HPLC测定该肽的氨基酸含量,结果显示该肽段以甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro)、天冬氨酸(Asp)、精氨酸(Arg)、丝氨酸(Ser)和苏氨酸(Thr)为主。     

东海海参多糖酶解提取工艺优化

将现代酶解技术应用于东海海参多糖提取工艺,选取胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶进行酶解,通过单因素试验确定最佳蛋白酶为胃蛋白酶,并通过响应面分析方法以多糖得率为响应值优化酶解工艺。结果表明,酶解工艺最优条件为胃蛋白酶用量(m/m)0.95%、酶解温度56℃、酶解时间6h、酶解液pH1。在此条件下海参多糖得率为1.65%,该值与响应面模型的预测值1.59% 基本相符。     

Collagen peptides from Acaudina molpadioides prevent CCl4-induced liver injury via Keap1/Nrf2-ARE,PI3K/AKT,and MAPKs pathways

Collagen peptide from Acaudina molpadioides (AMP) showed antioxidative activity in H₂O₂-induced RAW264.7 cells in our pervious study. In this study, it was observed that AMP could effectively improve the morphology and function of liver in CCl₄-induced mice. After 200 mg/kg AMP treatment, the content of MDA in liver decreased by 62.3%, and the level of antioxidant enzymes (SOD, GSH-Px, and CAT) increased by more than 65%. Western blot results disclosed that AMP (200 mg/kg) upregulated the Nrf2 level by 73.8% and downregulated Keap1 by 41.0% in CCl₄-induced mice liver. The levels of p-ERK, p-JNK, and p-p38 in 200 mg/kg AMP treatment groups decreased by 57.3%, 40.9%, and 40.6%, but the levels of p-PI3K and p-AKT increased by 162.6% and 60.3%, respectively. Furthermore, the trends of Nrf2, Keap1, p-ERK, p-JNK, p-p38, p-PI3K, and p-AKT levels in H₂O₂-induced RAW264.7 cells after AMP treatment were similar to the results in CCl₄-induced mice liver. These findings provided evidence that AMP exerted antioxidant activity via Keap1/Nrf2-ARE, PI3K/AKT, and MAPKs pathways in vivo and in vitro. Therefore, the collagen peptide from A. molpadioides might represent a novel functional food to prevent acute liver injury via attenuation of oxidative stress.     

海地瓜多肽分离及抗氧化活性研究

本文检测评价海地瓜体壁干粉及多肽氨基酸组成,通过超滤膜分级过滤技术及层析色谱分离技术分级分离海地瓜酶解多肽,采用生化水平及细胞水平抗氧化活性分析方法研究海地瓜多肽抗氧化活性特征。研究显示,海地瓜体壁干粉及酶解多肽氨基酸含量丰富,检测的19种氨基酸总量分别占样品干重的63.06%及82.90%;其中,必需氨基酸含量分别为10.87%及15.60%。海地瓜酶解多肽小分子肽(3 kDa)含量最高,达到43.9%;其次是分子量为3 k~10 kDa的多肽,含量为36.8%;而10 kDa的多肽含量最低,仅为19.3%。三种海地瓜多肽中,小分子多肽(3 kDa)抗氧化活性最高,ABTS法及FRAP法检测的TEAC值分别为0.61±0.03 mmol Trolox/g及0.32±0.02 mmol Trolox/g。海地瓜多肽明显增强HepG-2及HEK293细胞抗H2O2氧化损伤能力,且小分子多肽(3 kDa)活性高于其他组分;G-25层析分离海地瓜小分子多肽(3 kDa),形成6个主要吸收峰,对其样品抗氧化分析结果显示第5峰多肽样品抗氧化活性最高。     

海参岩藻聚糖硫酸酯对小鼠胰岛素抵抗及炎症因子的影响

目的：比较研究海地瓜岩藻聚糖硫酸酯（fucoidan from Acaudina molpadioidea,Am-FUC）和美国肉参岩藻聚糖硫酸酯（fucoidan from Isostichopus badionotus,Ib-FUC）对肥胖小鼠胰岛素抵抗及相关炎症因子的改善作用。方法：以高脂高果糖饲料饲喂法建立胰岛素抵抗小鼠模型。雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、实验A、B、C、D组。正常对照组饲喂标准饲料,其他组饲喂高脂高果糖饲料。阳性对照组、实验A、B、C、D组分别在饲料中添加罗格列酮（rosiglitazone,RSG,1 mg/（kg·d））、低剂量Ib-FUC（20 mg/（kg·d））、高剂量Ib-FUC（80 mg/（kg·d））、低剂量Am-FUC（20 mg/（kg·d））、高剂量Am-FUC（80 mg/（kg·d））。各组小鼠自由摄食摄水120 d。实验结束后,称量小鼠白色脂肪质量,检测空腹血糖、血清胰岛素及血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、瘦素、脂联素水平。结果：2 种FUC均可极显著地降低胰岛素抵抗小鼠的脂肪积累（P＜0.01）,降低血糖（P＜0.01）和胰岛素（P＜0.01）水平,改善胰岛素抵抗（P＜0.01）,降低TNF-α（P＜0.01）、IL-6（P＜0.01）和瘦素（P＜0.01）含量,提高血清脂联素含量（P＜0.01）。Am-FUC效果优于Ib-FUC。结论：Am-FUC和Ib-FUC能显著改善胰岛素抵抗小鼠的高血糖症状及胰岛素抵抗程度,Am-FUC的效果优于Ib-FUC,其作用机制可能与改善肥胖引起的细胞因子的分泌有关。