Degradation of biorefractory furaltadone in aqueous solution by ozonation

BACKGROUND: Furaltadone (FD), a nitrofuran derivative, is a highly effective chemotherapeutic drug. In China the FD wastewater discharged by the pharmaceutical industry is high in organics and biorefractory compounds. The objective of this study was to investigate the degradation mechanism of FD in aqueous solution by ozone oxidation. Preliminary results on the reaction mechanism were obtained using three different spectral analysis techniques. RESULTS: The ozonation mechanism was significantly affected by the pH value. At low pH values the primary reaction is direct oxidation of ozone, an incomplete oxidisation, which can only destroy the FD molecule's conjugated structure. At high pH values the major reaction changes to hydroxyl radical oxidation. FD can be rapidly oxidised into CO₂, H₂O, NH₃, NO , HCHO, oxalic acid and other aliphatic acids of low molecular weight, which can be entirely mineralised by continued ozonation. CONCLUSION: The pH value significantly influences the mode of FD ozonation. The present experiment suggests a potentially useful pretreatment method for conventional biological treatment of wastewater containing FD. Copyright © 2008 Society of Chemical Industry     

抗呋喃它酮代谢物噬菌体单链抗体库的构建

目的：构建抗呋喃它酮代谢物(AMOZ)的衍生物噬菌体单链抗体库。方法：从分泌抗AMOZ 的单克隆抗体的杂交瘤细胞系(BC3-E8)中提取总RNA,经RT-PCR 反转录成cDNA,设计通用简并引物,PCR 扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL)。经重叠延伸PCR (SOE-PCR),将VH 和VL 基因用编码(G1y4Ser)3 的linker随机拼接成单链抗体(scFv)基因,然后将其克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E 中,转化大肠杆菌(Escherichia coli) TG1 感受态细胞,经辅助噬菌体M13K07 超感染,建立噬菌体单链抗体库。随机挑取10 个阳性克隆,经PCR 和双酶切鉴定,并测序。登陆DNAMAN 软件对序列进行分析、比对。结果：成功扩增VH、VL 及scFv 基因,并得到库容为1.2 × 106 的噬菌体抗体库,噬菌体的滴度为2.0 × 1010PFU,PCR 鉴定及双酶切鉴定文库重组率较高,软件对序列比对结果显示,scFv 基因全长序列之间差异为8.38%,VH 序列差异为3.68%,VL 序列差异为14.34%,且序列差异多集中在CDR 抗原结合区域对应的核酸序列上。结论：已构建抗呋喃它酮代谢物的衍生物噬菌体单链抗体库,为进一步富集筛选并表达抗AMOZ 的衍生物的单链抗体提供参考。     

测定食品中呋喃它酮代谢物3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮的酶联免疫吸附法

目的建立以多克隆抗体为基础的测定食品中呋喃它酮代谢物3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮(AMOZ)的间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA)。方法以4-甲酰基苯氧基乙酸(4-FPA)为修饰剂,合成AMOZ半抗原衍生物,并使其分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)交联制备得到免疫原和包被抗原,经免疫动物(兔),获得抗NPAMOZ(AMOZ与衍生化试剂2-硝基苯甲醛所形成的结合物)的多克隆抗体。用酶联免疫分析法测定AMOZ(以NPAMOZ形式)。结果在包被抗原为2.5ng/mL,抗体为1:300000稀释,酶标二抗为1:10000稀释的优化条件下,ELISA测定AMOZ(以NPAMOZ形式)的IC50值(标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值50%时所对应的待测物浓度)为1.86ng/mL。抗体与呋喃它酮的交叉反应率较高(70.7%),与AMOZ的交叉反应率仅为0.32%,与其余三种硝基呋喃抗生素及它们的代谢物以及其它八种药物的交叉反应率很小(0.01%),表明抗体的特异性高。四种市售的肉样(鱼肉、虾肉、鸡肉、猪肝)用作加标实验,加标浓度分别为0.5、1.0和5.0ng/g,加标样品经衍生化处理后用ELISA测定,回收率为75.6%~112.2%,批间相对标准偏差(RSD)为8.3%~17.5%。结论本法具有高灵敏性和高特特异性,能用于动物产品中AMOZ的检测。     

动物组织中呋喃它酮代谢物快速检测试纸条的研制

介绍了检测动物组织中呋喃它酮代谢物的胶体金试纸条的研制方法,主要包括胶体金标记物的制备并冻干成微孔试剂,样品吸收垫和反应膜的制备,试纸条的组装等研究步骤,所研制出的呋喃它酮代谢物快速检测胶体金试纸条对动物组织的最低检测限为1.0μg/kg,检测时间短,试纸条特异性好、假阳性率不高于5%、假阴性率为0,可应用于动物组织中呋喃它酮代谢物的快速检测和现场筛查,具有较高的市场应用前景。     

臭氧化降解呋吗唑酮模拟废水的实验研究

对极难生物降解性呋吗唑酮模拟废水进行了臭氧化处理研究,考察了臭氧进气量、pH、HO·清除剂的消除、臭氧投加量、废水初始浓度、催化剂等对反应的影响,并对反应动力学进行了初步探讨。在持续强碱性溶液中,臭氧自分解产生HO·,能快速且无选择性地氧化呋吗唑酮为二氧化碳、水、氮气及少量小分子有机醛和酸,在模拟废水质量浓度为500mg/L,最佳pH12.8,臭氧投加量2g/L,BOD5/CODCr>0.3时,可生化性显著提高;臭氧投加量6g/L时,脱色率达100%,CODCr和TOC去除率分别达到95.9%和95.2%,水中有机物基本完全矿化。     

呋喃它酮代谢物间接竞争酶联免疫检测方法的建立

目的建立呋喃它酮代谢物5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(5-morpholine-methyl-3-amino-2-oxazolidinone,AMOZ)间接竞争酶联免疫检测法。方法通过衍生化反应制备了人工抗原CPAMOZ并用活化酯法将其与鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)连接成为包被原CPAMOZ-OVA。对包被原和单克隆抗体的最佳工作浓度、封闭液浓度、竞争时间、辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗(horseradish peroxidase labelled goat antimouse Ig G conjugate,HRP-Ig G)、孵育时间和显色反应时间进行优化,并对方法灵敏度、特异性、精密度和准确度进行方法学评价。结果最优条件下,包被原和单克隆抗体稀释倍数分别为500倍和2000倍,封闭液浓度为2%,竞争时间为30 min,二抗孵育时间为30 min,显色时间为15 min。所建立标准曲线的对应线性方程是Y=-0.439X+0.670(r~2=0.992),IC_50为2.439 ng/m L,线性范围为0.506~11.765 ng/m L,回收率为86.7%~90.1%,批内和批间变异系数分别为1.4%~5.8%和2.1%~4.9%。结论该方法特异性强,准确性、精密度和重现性良好,可用于对AMOZ的快速筛查。     

呋喃它酮代谢物可视化凝胶柱快速免疫检测方法研究

本研究建立了兽药呋喃它酮代谢物(Furaltadone metabolites,AMOZ)的免疫亲和凝胶柱检测新方法,并用于动物源性食品中呋喃它酮代谢物残留的可视化快速检测。整个检测在一个标准的1 mL固相萃取(SPE)柱中进行,柱中包含两层:一个结合了呋喃它酮代谢物特异性抗体的凝胶检测层和一个结合了辣根过氧化物酶(HRP)抗体的凝胶质控层。将样品提取液与酶标抗原预混合后加入到检测柱中,基于抗原抗体的竞争结合反应和辣根过氧化物酶的酶促反应,根据检测柱的检测层颜色的深浅和有无来定性,半定量检测呋喃它酮代谢物的含量。整个检测过程可以在10 min内完成,该凝胶检测柱的检测限为20μg/L;牛肉、鲷鱼、鸡肉、虾肉、猪肉、鱿鱼、鸡肝和黄花鱼等动物源性食品中呋喃它酮代谢物的检测限为3μg/kg。该方法准确度高、特异性好、检测步骤简单,适用于大量样品中呋喃它酮代谢物残留的快速检测。