蛇毒抗栓酶的质量分析

对从白眉蝮蛇毒、江浙蝮蛇毒和尖吻蝮蛇毒中提取的蛇毒抗栓酶制剂进行了酶活性和安全性分析。被检样品的精氨酸酯酶活性都能达到要求，有的还超过出厂规格的1～3倍，但类凝血酶活性定性试验只有68.1％（64／94批）呈阳性反应。出血毒性和神经毒性检测，有14．4％和38．5％的样品不能通过。用SDS－PAGE分析纯度，被检样品分别含3～7条区带，分子量最低14．6KD，最高87.6KD．说明目前国产蛇毒酶制品纯度和质量较差。     

免标记DNA电化学传感器测定凝血酶

研制了一种基于介孔二氧化硅负载纳米金和适体DNA的免标记电化学传感器,用于检测凝血酶的含量。实验中先用三甲基氯硅烷(TMCS)封闭介孔二氧化硅(MPS)前驱体外壁硅羟基的活性,煅烧除去模板剂后,再用氨基丙基三乙氧基硅烷(APTS)与孔道内壁硅羟基反应,接枝氨基,最后得到内壁修饰氨基的介孔硅材料(APTS-TMCS-MPS)。金纳米粒子(GNPs)通过与APTS-TMCS-MPS氨基的静电作用力组装到介孔孔道内,然后和巯基修饰的适体DNA通过金硫键相结合,制得免标记探针(DNA/GNPs/APTSTMCS-MPS)。将探针修饰在玻碳电极表面,制得免标记DNA电化学传感器。将该传感器与含有凝血酶的待测液温育反应后,凝血酶和固定在介孔内的适体DNA发生特异性反应,形成位阻较大的适体DNA和凝血酶的复合物,从而增加了介孔孔道内的空间位阻,导致电流响应信号降低。随着凝血酶浓度的增加,孔道内部的位阻也随之增加。根据形成的复合物对电子转移和响应电流的阻碍,可以实现对凝血酶的免标记测定。实验结果表明,APTS-TMCS-MPS介孔孔道内的GNPs,可以提高孔道内电子的传递效率。在优化的实验条件下,该免标记DNA电化学传感器对凝血酶的检测线性范围是1.0×10-8~1.0×10-6 mol·L-1,检测限是7.5×10-9 mol·L-1(3σ)。     

凝血酶合奥美拉唑治疗胃出血75例临床观察

目的:探讨凝血酶联合奥美拉唑治疗胃出血的临床疗效。方法:选取胃出血患者150例随机分为观察组与对照组,各75例。对照组应用凝血酶进行治疗,观察组应用凝血酶联合奥美拉唑治疗,比较两组的临床疗效。结果:观察组患者治疗总有效率为92.0%,显著高于对照组的77.3%,差异具有统计学意义(P<0.05);两组不良反应无统计学差异(P>0.05)。结论:凝血酶联合奥美拉唑治疗胃出血患者疗效较好,不良反应少,值得临床推广应用。     

超声引导下瘤腔内注射凝血酶治疗股动脉假性动脉瘤的临床研究

目的:评价超声引导下瘤内注射凝血酶治疗股动脉假性动脉瘤的应用价值。方法:入选33例经皮冠脉介入治疗术后形成的股动脉假性动脉瘤患者。采用超声引导下,于超声探头压迫瘤颈同时,瘤腔内注射凝血酶(浓度为100 U/mL)。分析假性动脉瘤的类型、大小、瘤径长度及宽度、凝血酶用量及其疗效,观察其并发症。结果:33例患者中,单纯型25例,复杂型8例。动脉瘤平均体积为(9.0±5.0)cm3,瘤颈部宽度(2.7±0.7)mm,颈部长度(5.9±0.9)mm,平均凝血酶用量(299±110)U。30例一次成功,3例第一次注射后复发,经第二次注射后成功,其中单纯型1例,复杂型2例。未发生动脉或静脉栓塞等并发症。术后随访3个月无复发。与单纯型相比,复杂型动脉瘤患者年龄更大,女性更多,体重指数及瘤腔体积更大,所需凝血酶剂量更多(P<0.05);两者在瘤径长度及宽度方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论:超声引导下瘤腔内注射凝血酶治疗股动脉假性动脉瘤操作简便,疗效好,安全性高,可作为介入术后股动脉假性动脉瘤的首选治疗方法。     

蛇毒类凝血酶基因真核表达载体的构建

目的 构建大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin,GSB)基因真核表达载体,试图借助IL-2的分泌通路,使GSB分泌至胞外而达到溶栓和防栓的目的。方法 应用PCR重组技术,将GSB的5’端和3’端分别与IL-2基因的信号肽和poly A尾相连接,将此重组基因克隆入逆转录病毒载体 pLNCX,以脂质体介导转染人外用血淋巴细胞,并以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因检测转染效率、确定DNA和脂质体的比例。转染24h后从mR-NA、DNA和蛋白质水平检测GSB的表达情况。结果 mRNA和DNA水平均有外源基因GSB的表达;SDS-PAGE显示在相对分子质量 30 000左右出现一条带,且转染上清具有精氨酸酯酶活性。结论 构建的真核表达载体可表达具有活性的GSB,为GSB基因治疗血栓的体内研究打下基础。     

关于欧洲议会两项议案的启示

欧洲议会反对批准使用肉凝血酶添加剂的启示 2010年6月7日，欧洲议会表决阻止对猪和牛凝血酶作为肉凝胶添加剂的授权。根据欧委会的提议，使用凝血酶制成的再生肉制品应使用标签标识，且不得在餐厅使用。但欧洲议会环境委员会提交了一项议案阻止批准使用该添加剂，且该议案已被表决通过。     

核酸适体在自组装法制备石墨烯/金纳米复合薄膜上的固定及凝血酶的检测

采用自组装法制备出石墨烯/金纳米(g/AuNPs)复合材料,并将核酸适体固定其表面上,用于凝血酶的检测。采用原子力显微镜对g/AuNPs自组装膜的表面形貌进行了详细考察,采用X射线光电子能谱对核酸适体在g/AuNPs自组装膜上固定前后的元素组成进行测试。同时对核酸适体固定前后g/AuNPs自组装膜的电化学性能变化进行了测试。采用石英晶体微天平对g/AuNPs自组装、核酸适体固定和凝血酶检测过程中的g/AuNPs复合材料薄膜质量变化进行在位检测。结果表明,采用简单易行的自组装法所制备出的g/AuNPs复合材料有望使用在核酸适体生物传感器方面。     

一起敌鼠钠盐二次中毒的调查报告

1988年10月6日北京市怀柔县北宅村发生一起吃死猪肉而引起的16人敌鼠钠盐二次中毒。主要症状为鼻腔、口腔及牙龈出血及腰痛、下腹部痛、关节痛;重者肉眼血尿、低烧37．5~38．5℃,临床检验:尿镜检 RBC满视野、原蛋自3_+,血液检验WBC8875个/mm~3; ...     

凝血酶抑制肽研究进展

凝血酶是凝血过程的关键酶,以凝血酶作为靶点,用凝血酶抑制剂来阻碍凝血过程的发生是抗凝血常用方法之一。活性肽具有诸多生物功能,其抗凝血活性目前也受到越来越多的关注。该文综述了近年来有关凝血酶抑制肽的研究成果,重点介绍食物源凝血酶抑制肽的来源和结构信息,并对酶法制备抗凝活性肽的应用前景作出了展望。     

化零为整——探讨影响凝血酶/血纤维蛋白凝胶粘合度的因素

<正> 从牛、小牛、猪和羊等家畜及家禽类得到的肉,以及在分割胴体时得到的肉,在质量上常常出现很大的差异。因此,我们会根据肉品的种类、肉块大小、脂肪含量、结缔组织含量以及市场的需求等因素,将不同的肉类原材料制造成各式各样的肉制品。一般来说,