乳酸菌S-层蛋白及其黏附性相关研究技术

乳酸菌为人体的重要生理性细菌,在维持人体肠道生态环境、提高机体免疫力等方面起到重要的作用。然而,乳酸菌发挥这些生理功能的重要前提是黏附到肠细胞的表面。随着研究的深入,越来越多的研究表明乳酸菌S-层蛋白对宿主细胞具有黏附性,如罗伊氏乳酸菌S-层蛋白可与黏蛋白及人结肠癌细胞HT-29进行黏附。在研究乳酸菌S-层蛋白对宿主细胞的黏附时,人们采用了不同的方法。一些常用的基本方法有SDS-PAGE、层析纯化技术、显微镜观察技术等。随着新技术的应用,表面等离子共振技术、免疫学技术等也用于研究S-层蛋白的黏附性。本文将着重介绍S-层蛋白及S-层蛋白黏附性研究的相关技术。     

乳源短乳杆菌M8 S- 层蛋白的提纯及其生物学特征分析

通过利用原子力显微镜(AFM)来观察凝胶过滤层析法提纯短乳杆菌M8菌株的S-层蛋白的表面形貌,同时探讨S-层蛋白的再生特性及黏附特性。结果表明：凝胶过滤层析法能够获得纯度较高的S-层蛋白;该蛋白在纯水中可自我组装成纳米级“团簇”结构;去除S-层蛋白的菌体细胞仍然具有生命活性,适当培养后可重新表达该蛋白;短乳杆菌M8可黏附到Caco-2细胞上,其S-层蛋白介导此过程。     

乳酸菌S-层蛋白的多样性及其研究方法

乳酸菌是人体和许多动物肠道的正常菌群,在预防肠道感染、促进人体健康方面,具有不可或缺的作用.乳酸茵通过竞争性黏附来抑制致病茵的繁殖.研究表明,乳酸菌的黏附作用与细胞表层蛋白密切相关.表层蛋白又名S-层蛋白(surface layer protein,Sip),是许多细菌及古生菌细胞壁表面所包被的生物活性大分子,在一些乳酸茵中也发现了S-层蛋白的存在.S-层蛋白的相对分子质量在40 000～200 000间,而在已发现的乳酸菌中,S-层蛋白相对分子质量在25 000～70 000间.作者讨论了乳酸菌中S-层蛋白的多样性及主要特性,对乳酸菌S-层蛋白的研究方法进行了初步探索.     

一种实用的步进电机细分驱动控制系统

以AT89C2051单片机为控制核心,结合数/模转换器NJU39612及双极性驱动器NJM3777,采用等步距角的细分控制策略,设计出一种新颖的步进电机恒流斩波细分驱动控制系统.当选用步距角为0.9°/1.8°的两相混合式步进电机,配导程为1 mm的精密滚珠丝杆时,系统可实现对步进电机单步微调位移为0.02/0.04 μm的控制精度.     

牵引-制动型液力变矩器流场分析

利用计算流体动力学(CFD)技术对新型液力变矩器内部三维流场进行数值分析。根据变矩器内部流场的特点提出一定的假设,以牵引-制动型液力变矩器为基础,通过三维模型得到工作液体的控制体,利用有限元分析软件CFX计算变矩器内部流场,得出牵引和制动工况流场的分布特点,使一维束流理论的设计方法得到完善和改进,是进一步提高液力变矩器性能的基础。     

不同水平的大豆异黄酮拮抗β淀粉样肽介导的大鼠空间学习记忆损伤作用

目的研究不同剂量大豆异黄酮(SIF)对β淀粉样肽1-42(Aβ1-42)介导的空间学习记忆损伤大鼠的神经保护作用,并探讨其作用机制。方法按体重将3月龄雄性Wistar大鼠随机分为5组:对照组、Aβ模型组、SIF低剂量组、SIF中剂量组、SIF高剂量组每组12只,SIF灌胃剂量分别为每天每公斤体重40、80和160 mg,对照组和模型组灌胃等量的0.5%CMC-Na,连续灌胃14 d后,模型组和实验组大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-42,制备大鼠学习记忆损伤模型。对照组注射等量生理盐水,于术后7 d,Morris水迷宫检测学习记忆能力;术后14 d,股动脉采血,断头处死,测定血清AOC、MDA、GSH-Px等抗氧化指标和脑矿物元素钙、镁、锰、铁、锌和铜的水平。结果1.与Aβ模型组比,SIF各剂量组潜伏期和总路程明显缩短,在平台象限距离的百分比明显增高(P<0.05),SIF高剂量组潜伏期比低剂量组缩短明显(P<0.05);2.与Aβ模型组比,SIF各剂量组血清AOC水平和GSH-Px活力显著增高,MDA水平显著降低(P<0.05),SIF中和高剂量组血清AOC水平高于低剂量组,SIF高剂量组MDA水平低于低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05);3.与Aβ模型组比,SIF低、中、高剂量组锌含量和铜/锌值差异均有统计学意义(P<0.05),SIF中、高剂量组铜含量显著减少(P<0.05),并且SIF高剂量组铜含量和铜/锌值低于低剂量组。结论SIF可有效改善大鼠的空间学习记忆能力,可能是通过改善机体氧化还原状态,提高抗氧化水平,调节脑内矿物元素的平衡,进而拮抗Aβ介导的神经毒性,发挥其神经保护作用,并且在一定范围内表现出剂量-反应关系。     

乳酸菌S-层蛋白的功能特性及在微生态制剂中的应用

S-层蛋白(surface layer protein,slp)是一些乳酸菌,细菌及古细菌细胞壁表面所包被的生物活性大分子。这些蛋白能够形成周期性的有序结构,如倾斜形,正方形或是匀称的六边形。最新研究表明,这些结构是通过非共价键相互作用,在熵驱动下自我组装而成。与其他S-层蛋白相比,乳酸菌S-层蛋白的显著特点是分子质量小、等电点高。一些乳酸菌含有多种S-层蛋白编码基因,他们能够分别或同时表达。随后,文中介绍了3种乳酸菌S-层蛋白的分离方法。最后简单介绍了乳酸菌S-层蛋白在益生菌微生态制剂中的的应用。     

反油酸对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞线粒体功能和细胞自噬的影响

目的研究反油酸对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞线粒体功能和细胞自噬的影响。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞,加入不同剂量(0、10、20、50和100μmol/L)的反油酸,24 h后收集细胞,采用透射电镜观察细胞自噬小体;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和蛋白免疫印迹(western blot)方法检测细胞自噬相关的基因和蛋白表达水平。结果透射电镜观察细胞结构发现,50和100μmol/L反油酸可使细胞内出现自噬小体,并可以引起细胞活力下降,差异均有统计学意义(P0.01);100μmol/L反油酸作用24和48 h后,细胞活力明显降低,差异均有统计学意义(P0.05);100μmol/L反油酸可使SH-SY5Y细胞中细胞色素C(cytochrome c,cyt-c)基因mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05);随着反油酸浓度的升高,细胞浆中cyt-c蛋白表达水平逐渐升高,差异均有统计学意义(P0.05)。但是不同剂量的反油酸对SH-SY5Y细胞自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)基因、Beclin1基因、p62基因、自噬相关基因5(atg5)、自噬相关基因12(atg12)mRNA水平表达差异无统计学意义(P0.05);但与对照组比较,50和100μmol/L反油酸可使SH-SY5Y细胞LC3B和Beclin1蛋白表达水平逐渐上调,差异均有统计学意义(P0.05)。结论反油酸可以引起人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞活力下降,可能与其引起细胞自噬小体形成,上调自噬相关蛋白表达水平,促进线粒体cyt-c蛋白释放入细胞浆有关。     

广西龙胜芭蕉湾滑石矿地质灾害评估及其防治措施

本文对广西龙胜芭蕉湾滑石矿矿区地质灾害现状和灾害预测进行了评估,在分析各种地质灾害形成条件及影响因素的基础上提出了相应的防治对策,为合理开发矿山资源和保护矿山地质环境提供了一定的理论依据。     

β淀粉样肽31-35介导的神经细胞线粒体损伤及机制研究

目的研究Aβ31-35介导的神经细胞线粒体毒性作用,并探讨其可能的作用机制。方法24h龄Wista,大鼠大脑皮质神经细胞原代培养,培养48h后在培养基中分别加入Aβ31-35和Aβ25—35建立大脑神经细胞线粒体损伤模型。24h后,流式细胞术检测神经细胞线粒体通透性转变孔道（PTP）开放;酶法检测神经细胞线粒体氧化还原平衡体系GSH／GSSG比率的改变;激光共聚焦显微术检测神经细胞活性氧（ROS）水平。结果与对照组相比,Aβ31-35和Aβ25—35处理组神经细胞线粒体膜电住显著降低（P〈0．05）,反映线粒体颗粒大小的前向光散射（FSC）和反映线粒体颗粒性状的侧向光散射（SSC）分布峰由低道数向高道数移动,表明线粒体肿胀、颗粒性状发生改变;Aβ31-35和Aβ25-35处理组神经细胞线粒体GSH／GSSG比率显著降低,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）;Aβ31-35和Aβ25—35处理可以使神经细胞ROS水平显著增高,且与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论Aβ31-35同Aβ25-35一样可引起神经细胞线粒体毒性作用,其作用机制与邮介导的神经细胞线粒体氧化损伤有关。